程芝 楊銘 陳靜文 董軻

(空軍軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院檢驗科，西安 710038)

西弗射盾子囊霉(Stephanoascusciferrii)曾用名西弗念珠菌，早期被稱為假絲酵母菌，是一種類似酵母的真菌，在人類中罕見引起感染。有關(guān)該菌的文獻有限，通常在一些散發(fā)感染病例中報道。近年來，西弗射盾子囊霉在痰液、腦脊液、腹膜透析液、化膿性中耳炎耳道分泌物及肝移植術(shù)后繼發(fā)膽道感染患者膽汁中都有分離成功報道[1-5]。本文從1例中耳膽脂瘤患者耳道分泌物中分離出西弗射盾子囊霉，現(xiàn)報道如下。

1 病歷資料

患者，女，38歲。10 年前無明顯誘因出現(xiàn)左耳流膿癥狀，無耳悶，眩暈及頭痛，就診當?shù)蒯t(yī)院，給予滴耳及口服抗生素對癥治療(具體藥物及劑量不詳)。1個月前自覺左耳聽力下降，前往外院給予耳內(nèi)鏡下外耳道清理，診斷 “中耳膽脂瘤(雙)”并建議手術(shù)治療?；颊邽榍筮M一步診治于 2021年4月20日以“中耳膽脂瘤(雙)”收治入院。

專科檢查 雙側(cè)耳廓無畸形，左耳外道可見霉菌樣物及肉芽組織新生物，鼓膜結(jié)構(gòu)不清。右耳鼓膜結(jié)構(gòu)不清，可見明顯內(nèi)陷及少許肉芽樣物。送檢左耳道分泌物培養(yǎng)，其檢出西弗射盾子囊霉。顳骨CT示：雙側(cè)中耳膽脂瘤可能；雙側(cè)聽骨鏈骨質(zhì)結(jié)構(gòu)不完整。純音測聽：左耳聽閾氣導(dǎo)51 dB，骨導(dǎo)13 dB，右耳聽閾氣導(dǎo) 32 dB，骨導(dǎo)13 dB。

真菌鑒定及藥敏試驗 無菌采集患者左耳分泌物，接種血瓊脂平板，巧克力平板和沙堡弱平板(鄭州安圖生物公司)，在28℃和35℃培養(yǎng)均生長良好，培養(yǎng)24 h可見圓形乳白色凸起光滑濕潤菌落。4 d后觀察血平板培養(yǎng)基上菌落，生長良好呈乳白色奶油狀，隨著時間延長菌落邊緣規(guī)整，略粗糙凸起，表面微絨毛狀，在瓊脂內(nèi)底部“鑲嵌生長”，不易刮取和研碎(見圖1)。革蘭染色鏡檢可見革蘭陽性酵母樣真菌及細長菌絲，孢子為單細胞，卵圓形，沿菌絲周邊或者散在分布(見圖2)。該菌轉(zhuǎn)種科瑪嘉念珠菌顯色培養(yǎng)基(溫州康泰公司)置35℃培養(yǎng)24 h菌落微小不明顯，繼續(xù)培養(yǎng)3 d后菌落變大，開始無色逐漸顯示藍色(見圖3)。采用(BD公司)phoenix-M50全自動微生物系統(tǒng)分析儀及配套的酵母菌YEAST ID鑒定板，鑒定結(jié)果為西弗射盾子囊霉(Stephanoascusciferrii)ID.99.9%。再經(jīng)質(zhì)譜儀VITEK MS(法國梅里埃公司)全自動快速微生物質(zhì)譜檢測系統(tǒng)鑒定，鑒定結(jié)果為西弗射盾子囊霉(Stephanoascusciferrii)，置信度為99.9%。進一步手工補充同化試驗(杭州天和公司)：可以同化利用的有D-麥芽糖、D-棉子糖、D-甘露糖、L-阿拉伯糖、L-鼠李糖、D-山梨糖、a-半乳糖、木糖等。根據(jù)質(zhì)譜儀結(jié)果及同化反應(yīng)試驗特征，鑒定為西弗射盾子囊霉。體外藥敏試驗采用ATB FUNGUS3(法國梅里埃公司)真菌藥敏檢測條進行試驗，結(jié)果顯示伏立康唑、伊曲康唑、兩性霉素B和氟康唑均敏感，5-氟胞嘧啶耐藥。

圖1 血平板35℃培養(yǎng)4 d 圖2 血平板35℃培養(yǎng)4 d后革蘭染色(×1000) 圖3 科瑪嘉念珠菌顯色平板35℃培養(yǎng)3 dFig.1 Blood agar plate cultured for 4 days at 35℃ Fig.2 Microscopic examination of Gram staining after BAP cultured for 4 days(×1000) Fig.3 CHROM agar plate cultured for 3 days at 35℃

診斷 根據(jù)患者病史、體征及輔助檢查結(jié)果，雙側(cè)中耳膽脂瘤診斷明確。

治療 左耳聽力下降較嚴重，有手術(shù)適應(yīng)癥，于2021年4月22日進行左耳完璧式鼓室成形術(shù)，手術(shù)順利，給予氟康唑抗感染治療，術(shù)后恢復(fù)情況良好。術(shù)后病理回報：(左耳膽脂瘤)符合膽脂瘤型中耳炎伴膽固醇結(jié)晶形成并異物巨細胞反應(yīng)。術(shù)后1周出院?；颊咝g(shù)后3個月隨訪未見異常。

2 討 論

西弗射盾子囊霉首次發(fā)現(xiàn)于1965年，是一種罕見的機會性酵母病原體，發(fā)病率很低[6]。由這種真菌引起的耳道部感染尚不清楚。在這個病例中，我們應(yīng)用質(zhì)譜生物學(xué)技術(shù)給出診斷并成功治療了由西弗射盾子囊霉引起的耳道感染。該菌通常影響免疫功能低下的患者。該患者有先天性心臟病房間隔缺損，自訴平素易感冒，7年前于西安交大一附院行房間隔缺損封堵術(shù)。慢性真菌性中耳炎患者常易被誤診，如不能及時明確診斷感染菌進而給予有效治療可能導(dǎo)致感染加重。采用適當?shù)姆椒ㄟM行微生物檢查有助于確定診斷。西弗射盾子囊霉在血瓊脂平板、巧克力平板和沙堡弱平板上均可生長，在血瓊脂平板上為乳白色凸起菌落，邊緣整齊，不易刮取和研碎，隨著培養(yǎng)時間的延長，菌落顏色逐漸變黃，表面有皺褶，邊緣呈花邊狀。 革蘭染色鏡檢可見革蘭陽性酵母樣真菌及細長菌絲，孢子為單細胞，卵圓形，沿菌絲周邊或者散在分布。但依靠這些形態(tài)特征鑒定該菌仍比較困難，且耗時長，容易耽誤臨床治療。而應(yīng)用質(zhì)譜儀檢測可快速鑒定該菌，可信度高， 便于臨床依據(jù)檢驗結(jié)果及時治療，有利于患者康復(fù)。研究報道中耳膽脂瘤患者中檢出率最高的病原菌為金黃色葡萄球菌[7]，本例患者曾滴耳及口服抗生素治療但均未改善癥狀。

本次經(jīng)質(zhì)譜儀及時準確的診斷，結(jié)合藥敏試驗結(jié)果，應(yīng)用抗真菌藥氟康唑治療后患者恢復(fù)良好。也有報道分離出對氟康唑耐藥的西弗射盾子囊霉菌株，需要在治療上引起重視[8]。