吳梅青，唐海飛，陳 思

(湘潭醫(yī)衛(wèi)職業(yè)技術學院，湖南 湘潭 411102)

蓮的六個藥用部位為蓮子、蓮子心、蓮房、蓮須、荷葉和藕節(jié)，分別來自于為睡蓮科植物蓮(NelumbonuciferaGaertn.)的干燥成熟種子、成熟種子中的干燥幼葉及胚根、干燥花托、干燥雄蕊、干燥葉和干燥根莖節(jié)部[1]。蓮子具有補脾止瀉、止帶、益腎澀精、養(yǎng)心安神的功效；蓮子心具有清心安神、交通心腎、澀精止血的功效；蓮房具有化瘀止血的功效；蓮須具有固腎澀精的功效；荷葉具有清暑化濕、升發(fā)清陽、涼血止血的功效；藕節(jié)具有收斂止血和化瘀的功效。這六味中藥均收載于《中華人民共和國藥典》(以下簡稱《中國藥典》)，除蓮子心和荷葉具有明確的指標成分外，其它四種藥材均沒有明確指標成分的質量評價，不能滿足現(xiàn)代化中藥質量評價體系的要求。近年來中藥在物質基礎、藥材質量可追溯性及農藥殘留、黃曲霉毒素、重金屬元素檢測、二氧化硫殘存等安全性方面。本文就近年來國內外關于對蓮六個藥用部位外源性污染物含量測定和活性成分含量測定的研究成果進行綜述，為后續(xù)蓮的質量標準完善和提升研究奠定理論基礎。

1 蓮六個藥用部位質量安全性的研究

中藥材中重金屬及有害元素、農藥殘留、易霉變中藥材真菌毒素等的限量標準與檢測方法研究，引起了研究者的關注。有關蓮的六個藥用部位的質量安全性研究報道綜述如下。

1.1 農殘測定研究

農藥殘留會造成中草藥污染，危害人的健康。當服用了農藥殘留超量的中藥后，農藥的毒性有害成分便會在體內積蓄，導致急性或慢性中毒，誘發(fā)癌癥等危險。蓮屬于多年生水生草木，在種植過程中有可能受到農藥殘留污染而影響其安全性。唐志康等[2]采用乙腈提取樣品，以聯(lián)苯菊酯為對照品，采用GC-MS/MS測定，建立了一測多評方法并測定蓮子中聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯、溴氰菊酯3種農藥殘留量，3批蓮子樣品中均無聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯、溴氰菊酯3種農藥殘留。張新忠等[3]采用超高效液相色譜-串聯(lián)質譜法，以有效成分劑量630 gai/ha和945 gai/ha施用1次后，測定蓮藕、蓮葉、蓮子、田泥與田水中12種農藥殘留，結果發(fā)現(xiàn)異草松和異丙甲草胺在蓮藕、蓮子和蓮葉中均無殘留，撲草凈在蓮藕、蓮子殼、蓮子肉和蓮葉樣品中的殘留量分別不超過0.022、0.166、0.012、0.181 mg/kg。

1.2 重金屬離子含量測定研究

蓮不同部位重金屬含量測定也受到研究者的關注。姜濤等[4]采用ICP-MS法，測定并比較了55份不同產(chǎn)地蓮子及蓮子不同部位中鉛(Pb)、鎘(Cd)、汞(Hg)、銅(Cu)、砷(As)等 5種重金屬元素含量，結果表明，無論是蓮子的不同部位還是不同產(chǎn)地，鉛元素的含量是共同的區(qū)別點，而去心蓮子和蓮子心除鉛元素外，其余4種重金屬元素的含量差異很大，特別是銅元素的含量。魏華東[5]采用原子吸收光譜法測定白洋淀8個采樣點荷葉中錳(Mn)、鎳(Ni)、鉛(Pb)、鎘(Cd)、銅(Cu)、砷(As)等11種重金屬元素的含量，其中8個采樣點荷葉檢測出的重金屬元素Mn、Cu、Pb、As，但含量符合國家標準范圍，另有采樣點的荷葉中檢測出Cd超出國家標準。

1.3 黃曲霉毒素測定研究

黃曲霉毒素是一種毒性極強的劇毒物質，對人及動物肝臟組織有破壞作用，嚴重時，可導致肝癌甚至死亡。2020版《中華人民共和國藥典》(以下簡稱《中國藥典》)在蓮子項下就有黃曲霉毒素含量檢查項目。黃曲霉毒素超標是近年來我國蓮子產(chǎn)品被出口地通報的主要原因之一[6]。羅定強等[7]收集5批蓮子，采用高效液相色譜-串聯(lián)四極桿質譜聯(lián)用技術，多反應監(jiān)測(MRM)模式進行定量檢測，結果發(fā)現(xiàn)有1批發(fā)霉的蓮子中檢出黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2。趙穎等[8]將蓮子樣品經(jīng)適配體親和柱凈化富集后，用高效液相色譜-光化學衍生熒光法檢測，檢出限達到0.05 ng/mL，回收率為91.8%～108.6%，所建立的方法具有較好的準確性、穩(wěn)定性、精密度和重復性。吳梅青等[9]采用高效液相色譜-光化學衍生法測定了湖南產(chǎn)蓮子中黃曲霉毒素G1、G2、B1、B2的含量，自于農貿市場農戶自存的2批次和霉變的中檢出黃曲霉毒素B1，但低于《中國藥典》2020年版規(guī)定限量，而且所建立的測定方法結果準確、重復性良好，可為完善蓮子安全性控制和質量標準提升提供實驗依據(jù)。

1.4 二氧化硫含量測定

硫磺熏制中藥材是常見的貯存方式，但殘留在中藥材中的二氧化硫對人體的消化道、呼吸系統(tǒng)、肝臟和腎臟等器官有損害。有些不法廠商和個體戶在蓮子加工過程中采用硫磺熏蒸蓮子，使蓮子的品質下降。吳少紅等[10]按照GB/T5009.34-2003《食品中亞硫酸鹽的測定》第一法鹽酸苯胺法測定了武漢市硚口區(qū)主要的大型超市和農貿市場蓮子等樣品中二氧化硫的含量，結果發(fā)現(xiàn)蓮子中存在二氧化硫污染情況。張云等[11]采用半自動凱氏定氮儀建立了蓮子中二氧化硫殘留量的檢測方法，并用此方法測定建寧及其周邊地區(qū)出產(chǎn)的52批蓮子進行二氧化硫污染情況，結果顯示有7批樣品不同程度檢出二氧化硫，最高的83 mg/kg，最低的19 mg/kg，含量最高的1批超過了GB 5009.34-2016中規(guī)定的50 mg/kg的標準限量，并且二氧化硫含量偏高的蓮子其成色比未檢出的更鮮白一些。

通過綜述蓮不同藥用部位的蓮六個藥用部位質量安全性的研究發(fā)現(xiàn)：蓮不同藥用部位外源性污染物的研究主要集中在蓮子，其次是蓮子心和荷葉。其中蓮子中檢出二氧化硫含量超出標準限量，在霉變的蓮子中檢測出黃曲霉毒素殘留，由于蓮子屬于藥食同源物質，因此蓮子在采收、加工和儲存過程要嚴格按照相關標準操作，確保藥材的安全性。

2 蓮的六個藥用部位有效組分含量測定研究

蓮子、蓮子心、蓮房、蓮須、荷葉和藕節(jié)的有效成分或有效部位如多糖、生物堿類、黃酮類、萜類、鞣質和揮發(fā)油等均有文獻報道，但由于藥用部位不同，其所含的有效組分有差異，藥理活性也有差別。下面綜述各有效組分提取和含量測定的研究進展。

2.1 生物堿類

關于蓮中生物堿的研究報道主要集中于蓮房、蓮子心、荷葉，其它部位鮮見文獻報道。生物堿類型主要包括蓮心堿、異蓮心堿、甲基蓮心堿、荷葉堿、N-去甲基荷葉堿、O-去甲基荷葉堿和蓮堿等。其中蓮心堿和荷葉堿是蓮子心和荷葉生物堿的主要特征性成分之一，為《中國藥典(一部)》(2020年版)蓮子心和荷葉質量評價的成分，且含量不低于0.2%。楊鵬[12]采用高效液相色譜法測定3批蓮房中荷葉堿含量分別為0.03748%、0.03891%、0.03865%。雷德卿等[13]采用高效液相色譜法測定湘蓮蓮房中蓮心堿、異蓮心堿、甲基蓮心堿含量，結果發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地的湘蓮蓮房中生物堿含量差異較大，湘潭的含量最高。石炳娟等[14]對《中國藥典》2015年版一部蓮子心含量測定方法進行了改進，通過調整流動相的比例，在供試品的制備中改用80%乙醇先浸泡30 min，超聲處理(400 W，50 Hz)30 min，蓮心堿的提取率明顯比原方法平均高192%，但同時發(fā)現(xiàn)市售蓮子心蓮心堿含量低，達到藥典含量要求的(0.20%))幾乎沒有。王協(xié)和等[15]建立了蓮子心的指紋圖譜以及其中蓮心堿、異蓮心堿、甲基蓮心堿3種成分含量測定方法，所建立的方法準確、快速、可行，可用于蓮子心的質量評價。陳強等[16]采用高效液相色譜法，以荷葉堿為內標，分別建立荷葉堿與N-去甲基荷葉堿、O-去甲基荷葉堿、蓮堿的相對校正因子，采用外標法測定荷葉中4種生物堿類成分的量，并將計算結果與一測多評法進行比較，荷葉生物堿含量無顯著性差異，說明一測多評法在荷葉4種生物堿類成分含量測定研究中是可行的。

2.2 黃酮類

蓮中黃酮類研究的文獻報道較多。肖建平等[17]采用高效液相色譜法測定經(jīng)酸水解后蓮房中槲皮素的含量，發(fā)現(xiàn)不同收集地的蓮房樣品中槲皮素的含量存在較大的差異，福建產(chǎn)最高，達0.21%。李彥博等[18]首次采用HPLC法測定蓮須中木犀草素的含量，結果表明不同產(chǎn)地蓮須中的木犀草素含量有一定差異，其中浙江杭州產(chǎn)含量最高，達0.0844%，河北保定產(chǎn)含量最低，僅0.0404%。陳建忠等[19]將蓮須樣品用25%的鹽酸-甲醇溶液(1∶4)水解提取后，采用高效液相色譜法測定15批不同來源的蓮須樣品中槲皮素和山柰酚含量差異較大，分別為0.07～0.76 mg/g和0.24～2.40 mg/g。凌智輝等[20]采用質譜和核磁共振鑒定荷葉中金絲桃苷、異槲皮苷和槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷等3中黃酮類成分，再高效液相色譜法對不同干燥方法及不同采收時期荷葉樣品中3個黃酮類懲罰你含量進行測定，結果表明烘干著優(yōu)于陰干和曬干，陰干和曬干無差異，隨著烘干溫度的升高，各組分含量有上升趨勢，100 ℃烘干時含量最高，8月和 9月為荷葉較佳采收時間。李會端[21]優(yōu)選藕節(jié)中總黃酮的提取工藝條件，并通過高效液相色譜法建立了蓮子心黃酮的指紋圖譜，確認了蓮子心黃酮中的主要成分為夏佛托苷和異夏佛托苷，并且測定二者含量分別為1.43%和2.04%。

2.3 多糖類

現(xiàn)代研究表明，中藥多糖具有抗氧化、抗炎、促進免疫調節(jié)、抗衰老、抗腫瘤、改善腸道微環(huán)境、抑菌等作用。目前蓮子和藕節(jié)中多糖含量測定主要是以葡萄糖為對照品，采用苯酚-硫酸法，再通過紫外分光光度計測定吸光度來計算多糖的含量。周婷婷等[22]采用苯酚-硫酸法，通過紫外分光光度法測定了蓮子多糖的含量，結果顯示，湘、浙、閩、贛、鄂5大蓮子產(chǎn)區(qū)的多糖含量均值分別為21.37%、18.00%、19.16%、18.73%、21.29%，其中湖南省蓮子的多糖含量最高，其次是湖北省蓮子多糖含量。李婧等[23]采用苯酚-硫酸法測得15 批炒蓮子多糖含量為 8.71%～21.04%，平均值為 13.06%，并首次提出蓮子的質量標準中要求多糖含量不少于15%。

2.4 萜類和揮發(fā)油

蓮中萜類和揮發(fā)油得研究也常見文獻報道。黃旭東等[24]利用水蒸氣蒸餾法提取荷葉中的揮發(fā)油，采用GC-MS測定揮發(fā)油的含量及成分，荷葉揮發(fā)油含量最高的是洪湖蓮，達0.75%，荷葉揮發(fā)油中植醇、葉綠醇、烯類較多。王文通等[25]采用頂空固相微萃取結合氣質聯(lián)用技術對蓮須、蓮子心揮發(fā)性成分進行了分析，結果發(fā)現(xiàn)蓮須中檢測出24種揮發(fā)性成分，含量最高的是右旋萜二烯(14.12%)，蓮子心中檢測出26種成分，含量最高的是右旋萜二烯(52.63%)，蓮須、蓮子心中含有己醛、壬醛、右旋萜二烯、樟腦、癸醛、1-石竹烯、十五烷、萜品烯、苯乙醇9種共有揮發(fā)性成分。馮峰等[26]采用水蒸氣蒸餾法提取蓮須揮發(fā)油，利用GC-MS分離鑒定鑒定出44種化學成分，占總成分的89.98%，主要為脂肪酸、萜烯、烷烴類。

2.5 鞣 質

鞣質廣泛存在于中草藥中，具有收斂性和蛋白質凝固作用，由于具有抗氧化、抗腫瘤、抗病毒、抑菌、降血糖血脂等藥理活性，蓮的六個藥用部位關于鞣質研究主要在藕節(jié)中，如李永強等[27]利用響應面法優(yōu)化藕節(jié)鞣質提取工藝，采用紫外分光度法測定提取液中總酚和不被吸附的多酚的含量，得到最佳提取條件是提取時間6.03 h，液料比11.2∶1(mL/g)，乙醇體積分數(shù)50%，pH值6.6，得到的鞣質提取率為0.0133%，與理論值0.0135% 基本相符。

通過綜述蓮不同藥用部位的化學成分含量測定研究發(fā)現(xiàn)：不同的活性成分采用的測定方法各異，如生物堿類的測定主要采用的是高效液相色譜法，總黃酮、多糖、鞣質的含量測定主要是紫外-可見分光光度法，萜類和揮發(fā)油的含量測定主要是氣相色譜-質譜聯(lián)用(GC-MS)。蓮子心中蓮心堿、甲基蓮心堿和異蓮心堿的藥理作用明確，如果能以蓮心堿、異蓮心堿、甲基蓮心堿含量共同評價蓮子心的質量，將能更全面的評價蓮子心。蓮子、蓮須、蓮房和藕節(jié)含量測定主要是總生物堿、多糖、和鞣質等有效部位，因此，應繼續(xù)深入開展蓮六個藥用部位有效成分的研究，為藥材質量標準的完善提供技術支撐。

3 結 語

蓮的六個藥用部位在生長、采集、加工、貯存、流通各環(huán)節(jié)可能涉及到重金屬殘留、農藥殘留、二氧化硫殘留、黃曲霉毒素污染等，有檢測發(fā)霉了的蓮子和農貿市場購買的蓮子有黃曲霉毒素殘留的文獻報道。因此要進一步加強對有毒有害物質的監(jiān)測，還應嚴格制定其標準限量，以保證藥材的安全性。

蓮的六個藥用部位的化學成分主要有生物堿類、黃酮類、多糖類、鞣質類、萜類和揮發(fā)油類，不同的活性成分采用的測定方法各異，化學成分含量也不同。針對蓮的六個藥用部位的活性成分含量測定研究，應進一步開展的工作有：研究蓮房、蓮須、蓮子和藕節(jié)中療效確切、結構確定的化學成分指標來控制其內在質量；蓮子心和荷葉的指紋圖譜有待于進一步研究；蓮須、荷葉和蓮子心中黃酮類化合物有待深入研究；將各有效組分化學成分的含量測定和與藥理作用有機結合。