邱世杰, 佟立權(quán)

(黑龍江省大慶市人民醫(yī)院 普外科, 黑龍江 大慶, 163316)

納米醫(yī)學(xué)領(lǐng)域近年來(lái)發(fā)展飛速，納米顆粒經(jīng)修飾后具備多種特性，可在疾病的診斷和治療中發(fā)揮潛在的應(yīng)用價(jià)值。納米技術(shù)可增加載藥量并提高組織藥物濃度，已被應(yīng)用于藥物遞送過(guò)程，但其存在不具備靶向性且易被巨噬細(xì)胞系統(tǒng)識(shí)別并吞噬的缺陷，納米顆粒攜帶的藥物進(jìn)入體內(nèi)后大部分不能通過(guò)全身循環(huán)系統(tǒng)到達(dá)靶器官，限制了其在臨床的廣泛應(yīng)用。天然細(xì)胞膜包被納米顆粒(CMCNPs)具備低免疫原性、長(zhǎng)半衰期、低毒性和先天靶向性特點(diǎn)，正成為一種極具前景的遞藥策略[1]。常用的細(xì)胞膜來(lái)源包括紅細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、血小板和自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)、外泌體、干細(xì)胞等，不同類型的細(xì)胞膜各自具有獨(dú)特的特點(diǎn)，可用于不同疾病的診斷和治療[1-3]。紅細(xì)胞壽命長(zhǎng)，紅細(xì)胞膜包被納米顆粒可在體內(nèi)實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)半衰期[4]; 中性粒細(xì)胞膜負(fù)載抗生素后可在趨化作用下主動(dòng)靶向至炎性損傷部位，發(fā)揮抗感染作用[5]; 腫瘤細(xì)胞膜包被后可實(shí)現(xiàn)同源性靶向[6]; 血小板膜載藥后可富集于損傷血管內(nèi)皮下，用于血管損傷性疾病的治療[7]。本文將CMCNPs在炎性疾病和腫瘤治療中的研究進(jìn)展綜述如下，以期為CMCNPs的臨床應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 基于不同類型細(xì)胞膜的CMCNPs特征

1.1 紅細(xì)胞膜

紅細(xì)胞在體內(nèi)的平均壽命為120 d, 其膜表面表達(dá)的CD47與巨噬細(xì)胞膜表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α(SIRPα)相互作用后釋放“don′t eat me”信號(hào)，降低巨噬細(xì)胞系統(tǒng)攝取能力以實(shí)現(xiàn)免疫逃避，延長(zhǎng)在血液中的循環(huán)時(shí)間[8]。研究[9]報(bào)道，紅細(xì)胞膜包被的載藥納米顆粒進(jìn)入體內(nèi)的前72 h約釋放總藥物量的20%, 非膜包被的載藥納米顆粒則釋放約40%。因此，基于紅細(xì)胞膜的納米顆粒不僅能逃避免疫系統(tǒng)的識(shí)別，還能延長(zhǎng)藥物在體內(nèi)的半衰期以維持藥物濃度，這為長(zhǎng)循環(huán)藥物提供了新的設(shè)計(jì)思路。

1.2 中性粒細(xì)胞膜

中性粒細(xì)胞在感染和癌癥發(fā)展過(guò)程中最早被招募，具有穿越生物屏障、免疫逃避、特異靶向炎性病灶的能力。這些能力得益于中性粒細(xì)胞與腫瘤微環(huán)境或炎性病灶血管內(nèi)皮細(xì)胞間表面分子的特異性結(jié)合，即CD44與L-選擇素、淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原-1(LFA-1)與細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)、β1整合素與血管細(xì)胞黏附分子-1(VCAM-1)的結(jié)合[10]。由此提示，以中性粒細(xì)胞膜為基礎(chǔ)的治療策略可在炎性疾病和腫瘤治療的藥物輸送方面發(fā)揮巨大潛力。

1.3 腫瘤細(xì)胞膜

強(qiáng)大的增殖能力使腫瘤細(xì)胞易于在體外進(jìn)行大量培養(yǎng)和膜收集。腫瘤細(xì)胞膜表面過(guò)表達(dá)的CD47分子在腫瘤免疫逃避中發(fā)揮關(guān)鍵作用，細(xì)胞間黏附分子賦予腫瘤細(xì)胞獨(dú)特的同源靶向性[11]。相關(guān)研究[12]顯示，腫瘤組織對(duì)同源腫瘤細(xì)胞膜來(lái)源納米顆粒的攝取能力約為紅細(xì)胞膜來(lái)源的40倍，這為腫瘤細(xì)胞膜來(lái)源的納米顆粒在載藥后主動(dòng)靶向腫瘤病灶、轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)以及追蹤并捕獲血液中癌細(xì)胞提供了新的可能。

1.4 血小板膜

血液循環(huán)中的血小板具有修復(fù)損傷血管內(nèi)皮的功能，可被損傷血管內(nèi)皮下基質(zhì)成分招募。因此，血小板可用于多種因素引起的血管損傷的靶向治療，例如動(dòng)脈粥樣硬化(AS)、癌癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)等多種疾病[7, 12]。血小板膜表面也表達(dá)多種膜蛋白，除CD47幫助免疫逃避外, CD55和CD59可阻止補(bǔ)體系統(tǒng)激活[13], P選擇素可介導(dǎo)血小板與腫瘤細(xì)胞上CD44分子結(jié)合[7], 展現(xiàn)出對(duì)腫瘤細(xì)胞的天然親和性。

1.5 其他

除了上述4種細(xì)胞來(lái)源外，NK細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、外泌體、干細(xì)胞等也可作為納米顆粒膜供體。干細(xì)胞具有無(wú)限自我更新與定向分化的能力，可用于血管疾病的內(nèi)源性靶向修復(fù)[14]。外泌體可阻斷上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化和促進(jìn)血管生成而參與腫瘤的生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程，用于抗腫瘤治療[15]。

2 CMCNPs制備及表征

2.1 細(xì)胞膜提取

細(xì)胞膜提取過(guò)程根據(jù)源細(xì)胞是否有核而有所不同，細(xì)胞膜的分離和純化過(guò)程主要包括細(xì)胞裂解和超速離心[12]。提取無(wú)核細(xì)胞(如成熟紅細(xì)胞)膜時(shí)，首先通過(guò)反復(fù)離心和等滲洗滌法將紅細(xì)胞從全血中分離，再采用低滲或反復(fù)凍融方式裂解紅細(xì)胞，隨后再進(jìn)行超速離心以去除可溶性蛋白，最后通過(guò)反復(fù)擠壓獲得目的細(xì)胞膜[16-17]。有核細(xì)胞(如中性粒細(xì)胞)膜的提取則更為復(fù)雜，首先面臨的問(wèn)題是源細(xì)胞數(shù)量可能不足以在分離后直接利用，需要進(jìn)行富集和純化，其次細(xì)胞裂解除需低滲處理外還需進(jìn)行機(jī)械破碎，然后通過(guò)差速離心去除細(xì)胞內(nèi)成分[13]。值得注意的是，從全血樣本中提取細(xì)胞膜常在4 ℃條件下進(jìn)行，以保持細(xì)胞膜上重要蛋白的活性[12, 18]。

2.2 細(xì)胞膜囊泡與核心顆粒的融合

細(xì)胞膜囊泡與核心顆粒的融合主要通過(guò)擠壓、超聲或電穿孔實(shí)現(xiàn)[17]。擠壓法是兩者通過(guò)大小不同的多孔膜循序共同擠出產(chǎn)生囊泡顆粒融合體，雖穩(wěn)定有效，但費(fèi)時(shí)費(fèi)力，不適宜大規(guī)模生產(chǎn)[13]。超聲法是利用超聲波促進(jìn)共孵育的質(zhì)膜囊泡和納米顆粒融合在一起，但需嚴(yán)格把控功率、頻率及持續(xù)時(shí)間等參數(shù)，從而最大限度減少蛋白變性[12]。微流控電穿孔技術(shù)作為一種新型制膜方式備受關(guān)注，該法只需將膜囊泡和納米顆粒注入系統(tǒng)入口，兩者在電脈沖作用下自動(dòng)進(jìn)行融合，最后在出口處可直接獲得CMCNPs[1, 16-17]。

2.3 表征鑒定

CMCNPs建立后需驗(yàn)證細(xì)胞膜的化學(xué)結(jié)構(gòu)、形態(tài)、理化特性及表面蛋白的完整性[9], 保持細(xì)胞膜與源細(xì)胞在形態(tài)及功能方面的一致，以確保膜包被工藝設(shè)計(jì)的合理性及可行性。透射電鏡及掃描電子顯微鏡被用于觀察CMCNPs形態(tài)及殼-核結(jié)構(gòu)，熒光共聚焦也常被用于進(jìn)一步驗(yàn)證殼-核結(jié)構(gòu)的完整性，動(dòng)態(tài)光散射和Zeta電位分別被用于觀察粒子直徑和帶電情況, Western Blot法則被用于檢測(cè)細(xì)胞膜上特征性蛋白表達(dá)情況。此外，紫外可見(jiàn)吸收光譜被用于CMCNPs表征時(shí)可觀察到，與原始的納米顆粒吸收?qǐng)D案相比，膜包被納米顆粒不但保留了原有的吸收峰，而且還獲得了與細(xì)胞膜囊泡吸收峰一致的額外吸收峰[4, 17, 19]。

3 CMCNPs在炎性疾病治療中的應(yīng)用

3.1 急性炎癥

急性炎癥反應(yīng)發(fā)生時(shí)，炎性介質(zhì)被大量釋放，造成組織缺氧、低pH值環(huán)境，導(dǎo)致組織損傷?？寡姿幵隗w內(nèi)缺乏靶向性，因此靶向炎癥組織的藥物輸送對(duì)治療感染等疾病至關(guān)重要。CHU D等[20]將治療藥物整合至變性白蛋白納米顆粒中并應(yīng)用于急性肺炎老鼠模型，成功靶向肺血管內(nèi)皮，并減少肺部中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)和炎性介質(zhì)釋放，成功逆轉(zhuǎn)了脂多糖誘導(dǎo)的急性肺損傷。但這種形式的納米顆粒容易與中性粒細(xì)胞發(fā)生分離，造成藥物脫靶，難以取得理想療效。隨著納米技術(shù)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的推廣應(yīng)用，基于天然細(xì)胞膜包裹藥物的納米療法在炎癥治療方面發(fā)揮了重要作用。

消退素D(RvD)是一種具有促組織炎癥消退作用的脂質(zhì)介質(zhì)。研究[21]報(bào)道, RvD2在小鼠膿毒血癥模型中不僅能下調(diào)中性粒細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞間黏附作用，減少炎癥因子釋放，還能抑制中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，加速炎癥消退。但RvD靶向性和穩(wěn)定性較差，在體內(nèi)易被酶降解，為解決該難題, GAO J等[18]設(shè)計(jì)了一種中性粒細(xì)胞膜來(lái)源的納米微囊(NMVs), NMVs表面及內(nèi)部分別負(fù)載RvD1、頭孢他啶(CEF)以構(gòu)建CEF-RvD1-NMVs, 在銅綠假單胞菌誘導(dǎo)的腹膜炎小鼠模型中, CEF-RvD1-NMVs可靶向腹膜炎性血管，且相較于CEF-RvD1、CEF、RvD1具有更強(qiáng)的抗炎及抑菌效果。

腦缺血再灌注損傷后產(chǎn)生的大量活性氧、炎癥介質(zhì)可造成組織細(xì)胞嚴(yán)重?fù)p傷甚至壞死，血腦屏障(BBB)雖然能阻止有害物質(zhì)進(jìn)入腦組織，但同時(shí)也將藥物排除在外，成為藥物治療腦損傷的巨大障礙。DONG X Y等[22]設(shè)計(jì)了一種載有RvD2的中性粒細(xì)胞膜衍生納米囊泡以對(duì)抗腦缺血再灌注損傷，在動(dòng)物活體顯微鏡下觀察到該納米囊泡明顯積聚于缺血腦組織，最終實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示病灶部位大量促炎因子被有效清除，大腦中動(dòng)脈梗死面積減小，神經(jīng)炎癥減輕，表明該納米顆?？赡茉诖┰紹BB后釋放藥物而發(fā)揮抗炎作用。WANG Y等[23]用單核細(xì)胞膜包裹雷帕霉素制得納米顆粒，將其應(yīng)用于腦缺血再灌注損傷大鼠模型中，可克服BBB與損傷部位結(jié)合并釋放雷帕霉素抑制炎癥細(xì)胞增殖，顯著改善神經(jīng)評(píng)分和腦梗死體積。

人體內(nèi)除了BBB外還存在血-胰腺屏障，后者能影響抗生素透入胰液，一項(xiàng)采用雷公藤紅素(CLT)治療急性胰腺炎的研究[24]發(fā)現(xiàn)，中性粒細(xì)胞膜包被后的CLT能輕松透過(guò)血-胰腺屏障而特異性分布于炎性胰腺組織，其比未包膜的納米顆粒擁有更強(qiáng)的選擇積聚性，且能顯著下調(diào)急性胰腺炎大鼠血清淀粉酶和胰腺髓過(guò)氧化物酶水平，明顯減輕胰腺損傷及急性胰腺炎所致肺損傷。

3.2 慢性炎癥

炎癥性腸病是一組病因尚未闡明的慢性非特異性腸道炎性疾病。角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)是由間質(zhì)細(xì)胞分泌的刺激上皮增殖的細(xì)胞因子，對(duì)胃腸損傷和結(jié)腸炎具有保護(hù)性作用。穩(wěn)定性差和非特異性分布是阻礙KGF在潰瘍性結(jié)腸炎治療中發(fā)揮持續(xù)療效的兩大障礙。將KGF嵌入小鼠來(lái)源中性粒細(xì)胞膜中建立中性粒細(xì)胞樣脂質(zhì)體(KGF-Neus)并靜脈注射至小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型中發(fā)現(xiàn), KGF被膜包裹后始終保持良好穩(wěn)定性，可明顯減輕小鼠腸黏膜潰瘍和降低中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)程度，使腸道形態(tài)和功能得到有效恢復(fù)，對(duì)結(jié)腸炎小鼠具有良好的治療效果[10, 25]。

RA是一種以關(guān)節(jié)病變?yōu)橹鞯穆苑翘禺愋匝装Y，臨床治療效果并不令人滿意。相關(guān)研究[26]表明，M2型巨噬細(xì)胞來(lái)源的外泌體可通過(guò)重編程炎癥M1型巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)化為M2型抗炎巨噬細(xì)胞而緩解RA。目前，CMCNPs在RA治療中也取得了一定進(jìn)展[27], 在轉(zhuǎn)基因小鼠模型和膠原蛋白誘導(dǎo)的小鼠模型中，載藥CMCNPs不僅能中和促炎細(xì)胞因子，抑制炎癥反應(yīng)，還能穿透軟骨基質(zhì)，為軟骨提供強(qiáng)有力的保護(hù)，防止關(guān)節(jié)損傷。

AS是一種以脂質(zhì)和脂肪在動(dòng)脈內(nèi)皮下沉積形成粥樣斑塊為主要病理變化的血管慢性炎癥疾病，血小板與斑塊有內(nèi)在親和力，基于這一特點(diǎn)，血小板膜包被納米顆粒(PNPs)極其適用于AS的治療[28]。SONG Y等[29]報(bào)道，在載脂蛋白E缺陷小鼠AS模型中, PNPs在AS中的沉積率是無(wú)膜包被組的4.98倍，包裹雷帕霉素的PNPs使得AS病變程度減輕了(14.5±2.9)%。在冠狀動(dòng)脈再狹窄的大鼠模型中，負(fù)載多西紫杉醇(DTX)的PNPs有效抑制了大鼠血管新生內(nèi)膜的生長(zhǎng)，使管腔閉塞率大幅降低[30]。

4 CMCNPs在腫瘤治療中的應(yīng)用

4.1 化學(xué)治療(簡(jiǎn)稱化療)

惡性腫瘤嚴(yán)重威脅人類健康，化療是目前應(yīng)用最為廣泛的惡性腫瘤治療方式之一，化療藥最大的缺點(diǎn)是不具備靶向性，在體內(nèi)殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)也會(huì)無(wú)選擇性地殺傷正常細(xì)胞。近年來(lái)，藥物載體遞送系統(tǒng)(DDS)[3]是一種全新的化療藥遞送策略，其利用腫瘤組織高通透性以及滯留效應(yīng)(EPR)促進(jìn)化療藥物被動(dòng)進(jìn)入腫瘤組織，提高藥物濃度，發(fā)揮抗腫瘤效應(yīng)[31]。但這種利用腫瘤組織EPR遞送藥物的治療方式并不具備主動(dòng)靶向病灶的功能，據(jù)估計(jì)無(wú)膜包被的納米藥物進(jìn)入體內(nèi)后僅有約0.7%被輸送到腫瘤部位，而高達(dá)99%則在全身給藥后通過(guò)肝臟被消除[11]。目前, DDS與天然細(xì)胞膜結(jié)合的新興遞藥策略在納米醫(yī)學(xué)領(lǐng)域取得重大成就，包括藥物傳遞、解毒、疫苗接種、光療和成像[2]。

三陰性乳腺癌(TNBC)嚴(yán)重威脅女性健康，但目前尚無(wú)針對(duì)TNBC的臨床靶向治療藥物。iRGD是一種已被證實(shí)的環(huán)狀腫瘤穿透肽，可與腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞上整合素αvβ3或αvβ5特異性結(jié)合，TNBC血管內(nèi)皮細(xì)胞高表達(dá)αvβ3和αvβ5整合素[32], 因此在TNBC缺少多種表面受體的情況下, iRGD有望成為一種靶向TNBC的配體。HUANG J等[33]受此啟發(fā)將阿霉素(DOX)負(fù)載到介孔二氧化硅納米粒(MSN)中，隨后用iRGD修飾的紅細(xì)胞膜將其包裹制得iRGD-RM-(DOX/MSN), 在抗乳腺癌皮下原位移植瘤模型中, iRGD-RM-(DOX/MSN)可靶向至腫瘤，且腫瘤生長(zhǎng)抑制率達(dá)(86.29±5.12)%, 在實(shí)驗(yàn)各組別中顯示出最高的抑瘤率(P<0.01)。另有研究[34]將Arg-Gly-Asp三肽錨定的紅細(xì)胞膜包裹紫杉醇(PTX)和DOX用于抗腫瘤治療，不僅延長(zhǎng)了化療藥物在體內(nèi)的半衰期，提高了靶器官藥物濃度，還可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞攝取，減輕了毒副作用。

肺癌是臨床最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一, DTX常被用于治療肺癌，但因較差的水溶性和嚴(yán)重的副作用而臨床應(yīng)用受限。血小板膜表面表達(dá)的蛋白對(duì)腫瘤細(xì)胞有親和力, CHI C L等[35]設(shè)計(jì)了一種以血小板膜為基礎(chǔ)的DTX聚合物納米顆粒(PM/PLGA/DTX)用于肺癌靶向治療，基于納米顆粒本身的藥物受控釋放特性, PM/PLGA/DTX靶向腫瘤部位后釋放的DTX含量遠(yuǎn)高于游離DTX, 可有效抑制A549腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)并縮小腫瘤組織體積，腫瘤抑制率達(dá)81.3%, 而單獨(dú)使用DTX的腫瘤抑制率僅為44.1%。

顱內(nèi)腫瘤的化療較為困難，原因在于BBB使得大部分藥物無(wú)法進(jìn)入顱內(nèi)。SURYAPRAKASH S等[36]提出了一種由間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)與納米微球結(jié)合的MSC/納米微球系統(tǒng)，在小鼠膠質(zhì)母細(xì)胞瘤模型中，該MSC/納米微球快速遷移至膠質(zhì)瘤附近釋放攜帶的甲氨蝶呤(MTX), 展現(xiàn)出強(qiáng)大的腫瘤抑制效應(yīng)。XUE J等[37]研究結(jié)果也表明，經(jīng)中性粒細(xì)胞膜包裹的PTX可穿透BBB靶向至顱內(nèi)膠質(zhì)瘤附近而抑制術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)。

CAO X等[38]報(bào)道了一種負(fù)載CLT的中性粒細(xì)胞膜包被納米顆粒(NNPs)治療胰腺癌的效果，在荷瘤小鼠異種移植模型中, NNPs可克服血-胰腺屏障在腫瘤部位選擇性積聚，實(shí)現(xiàn)胰腺的特異性給藥，并使小鼠生存周期延長(zhǎng)，最大限度減少了肝轉(zhuǎn)移。ZHOU X等[39]為有效治療黑色素瘤設(shè)計(jì)了中性粒細(xì)胞源性納米粒(NNPs-CLT), 體外實(shí)驗(yàn)中NNPs-CLT釋放出CLT后，小鼠黑色素瘤細(xì)胞株B16F10的細(xì)胞毒作用增強(qiáng)且凋亡率升高。在非實(shí)體腫瘤中, XU P等[40]利用血小板轉(zhuǎn)運(yùn)DOX治療淋巴瘤時(shí)發(fā)現(xiàn)，血小板膜包裹的DOX能很好地誘導(dǎo)血小板凝集現(xiàn)象靶向腫瘤細(xì)胞，促進(jìn)DOX在腫瘤細(xì)胞內(nèi)聚集，并以pH值控制方式將DOX釋放到介質(zhì)中，增強(qiáng)對(duì)淋巴瘤Raji細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用并降低其心臟毒性。

4.2 光學(xué)治療(簡(jiǎn)稱光療)

光療常被用于腫瘤治療中，可分為光熱治療(PTT)和光動(dòng)力治療(PDT)。PTT是使用光吸收劑在近紅外激光照射下產(chǎn)生熱量，導(dǎo)致癌細(xì)胞熱消融。PDT則是在特定波長(zhǎng)的光下，利用光敏劑中產(chǎn)生的具有細(xì)胞毒性的活性氧物質(zhì)氧化鄰近的生物分子而殺死癌細(xì)胞。利用細(xì)胞膜包裹納米顆粒使其獲得良好的生物學(xué)特點(diǎn)以治療腫瘤，正成為增強(qiáng)抗腫瘤效應(yīng)的一種新策略。

YE S F等[19]將大鼠來(lái)源紅細(xì)胞膜包裹在化療藥物10-羥基喜樹(shù)堿(10-HCPT)和光熱劑吲哚氰綠(ICG)共聚體表面以構(gòu)建RBC@ICG-HCPT納米粒，在生物分布方面，游離ICG、ICG-HCPT NPs主要集中分布于肝臟、脾臟中, RBC@ICG-HCPT則主要集中分布于腫瘤組織中。同時(shí)，熱成像數(shù)據(jù)顯示, RBC@ICG-HCPT可使小鼠腫瘤組織周圍溫度迅速上升至50 ℃, 致紅細(xì)胞膜在近紅外激光照射下發(fā)生熱裂解，釋放出的HCPT破壞腫瘤細(xì)胞核結(jié)構(gòu)并抑制腫瘤細(xì)胞復(fù)制, ICG則通過(guò)輻射產(chǎn)生熱量誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。最終結(jié)果顯示, RBC@ICG-HCPT在化療-PTT聯(lián)合作用下的抗腫瘤效果遠(yuǎn)優(yōu)于單獨(dú)化療或PTT。

化療-光療聯(lián)合用于腦膠質(zhì)瘤的研究也有報(bào)道, REN Y等[6]在體外實(shí)驗(yàn)中將光熱治療劑石墨烯量子點(diǎn)(GQDs)與DOX包裹在膠質(zhì)瘤同型癌細(xì)胞膜(CCM)中制備了GQDs/DOX@CCM納米顆粒，其可在體外主動(dòng)靶向至小鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞，使細(xì)胞攝取量顯著增加，激光照射后腫瘤細(xì)胞存活率不足10%, 展現(xiàn)出極高的殺傷效率。這為臨床更高效地抗腫瘤提供了潛在的可能性。

4.3 免疫治療

近年來(lái)，腫瘤免疫治療已成為惡性腫瘤治療中的一項(xiàng)極具前景的新策略。CHENG S等[41]基于納米技術(shù)開(kāi)發(fā)了一種由樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)修飾的仿生納米疫苗用于卵巢癌的治療。該“微型DC”納米疫苗繼承了DC的抗原提呈能力和T細(xì)胞刺激能力，在體內(nèi)外均可誘導(dǎo)T細(xì)胞的強(qiáng)化激活，此外在小鼠卵巢癌模型中，“微型DC”疫苗在延緩腫瘤生長(zhǎng)和減少腫瘤轉(zhuǎn)移方面比普通DC疫苗更具有效性，展現(xiàn)出更好的預(yù)防及抗腫瘤效果。

GUO Y Y等[42]研制了一種紅細(xì)胞膜包裹的聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)納米疫苗，其內(nèi)裝載有hgp10025-33抗原肽和Toll樣受體4激動(dòng)劑單磷酰脂質(zhì)A, 并在細(xì)胞膜上鑲嵌了甘露糖，使其具有靶向淋巴細(xì)胞表面甘露糖受體能力，增強(qiáng)了淋巴細(xì)胞攝取能力。該疫苗應(yīng)用于黑色素瘤的免疫治療中，可增強(qiáng)γ干擾素(IFN-γ)的分泌和CD8+T細(xì)胞的應(yīng)答，經(jīng)其誘導(dǎo)產(chǎn)生的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)含量可高達(dá)36.6%, 充分展現(xiàn)出納米腫瘤疫苗在抗腫瘤方面的優(yōu)越性。

5 小結(jié)與展望

細(xì)胞膜包裹策略是一種基于天然細(xì)胞的極具前景的藥物遞送方法，其可延長(zhǎng)藥物在血液中的半衰期，降低免疫原性，且具備主動(dòng)靶向病變部位的能力，但該技術(shù)發(fā)展過(guò)程中仍存在一些問(wèn)題需要解決。首先，血細(xì)胞從血液中分離后還需經(jīng)歷純化、載藥、再輸入過(guò)程，且分離過(guò)程中需保證細(xì)胞活性，因?yàn)橐坏┘?xì)胞結(jié)構(gòu)破壞便會(huì)表達(dá)“find me”和“eat me”信號(hào)，觸發(fā)免疫細(xì)胞吞噬作用，這就要求研究者必須掌握不同細(xì)胞膜的提取及載藥方法，并在回輸前建立可靠的細(xì)胞活性檢測(cè)方法，復(fù)雜的提取過(guò)程及較差的重復(fù)性增大了工業(yè)化量產(chǎn)的難度。其次，實(shí)驗(yàn)室研究與臨床實(shí)際應(yīng)用存在著實(shí)質(zhì)性區(qū)別，基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)向臨床轉(zhuǎn)化需克服很多困難，包括需開(kāi)展更加全面的生物研究和進(jìn)一步的臨床實(shí)驗(yàn)證實(shí)CMCNPs在疾病診斷和治療中的安全性與有效性。最后，為了避免CMCNPs輸入體內(nèi)后觸發(fā)免疫反應(yīng)，研究人員應(yīng)制訂并執(zhí)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，以確保納米顆粒在制備的每個(gè)環(huán)節(jié)均不被微生物污染。盡管CMCNPs的應(yīng)用還有眾多問(wèn)題亟待解決，但CMCNPs的天然優(yōu)勢(shì)和應(yīng)用潛力是不可否認(rèn)的，這種基于天然細(xì)胞膜的DDS無(wú)疑將開(kāi)辟出令人振奮的前沿陣地，重新引起醫(yī)學(xué)研究者對(duì)納米醫(yī)學(xué)設(shè)計(jì)和應(yīng)用的思考。