李 穎，王 健，顧秀峰，李玉明，胡金朋

1.天津市第四中心醫(yī)院心內(nèi)科（天津 300140）

2.武警特色醫(yī)學(xué)中心研究部（天津 300162）

子癇前期（preeclampsia，PE）是指妊娠20周后新發(fā)高血壓和蛋白尿，或新發(fā)高血壓和器官功能障礙伴或不伴蛋白尿[1]。PE 發(fā)生率約為5%～8%，嚴(yán)重影響孕婦及胎兒的健康[2]。目前研究認(rèn)為胎盤(pán)滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)能力下降導(dǎo)致子宮螺旋動(dòng)脈重構(gòu)異常，引起胎兒缺氧是造成PE 的主要原因，但是其潛在的發(fā)病機(jī)制尚未闡明。目前治療PE的重要方法仍是終止妊娠，但不適用于孕早期[3]。因此，深入探索PE 的發(fā)病機(jī)制具有重要意義。

隨著基因組測(cè)序技術(shù)的發(fā)展，研究發(fā)現(xiàn)人類(lèi)基因組中存在大量不能轉(zhuǎn)錄成蛋白質(zhì)但是仍可在各種生物學(xué)過(guò)程中發(fā)揮作用的基因，即非編碼RNA。其中，微小RNA（microRNA，miRNA）是一種高度保守的單鏈小分子RNA，通過(guò)抑制蛋白質(zhì)翻譯或促進(jìn)mRNA 降解，在多種信號(hào)傳導(dǎo)和生理病理過(guò)程中發(fā)揮作用。長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）是一種長(zhǎng)度大于200個(gè)核苷酸，缺少開(kāi)放閱讀框且具有高度組織器官特異性的RNA，可參與染色體沉默、染色質(zhì)修飾、轉(zhuǎn)錄干擾與激活等多種重要的調(diào)控過(guò)程[4]。已有研究表明lncRNA 和miRNA 對(duì)PE 的發(fā)生與發(fā)展均有潛在影響，為此本研究對(duì)lncRNA 和miRNA在PE 中的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 長(zhǎng)鏈非編碼RNA與子癇前期

胎盤(pán)是胎兒-母體交換的屏障，在胎兒發(fā)育中起關(guān)鍵作用。隨著轉(zhuǎn)錄組分析技術(shù)的不斷發(fā)展，特別是微陣列技術(shù)和RNA-Seq 技術(shù)在轉(zhuǎn)錄組分析中的應(yīng)用，使越來(lái)越多的lncRNA 被發(fā)現(xiàn)[5]。在PE 患者胎盤(pán)組織中存在多種lncRNA 的差異表達(dá)，并可以對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲、免疫反應(yīng)，以及妊娠結(jié)局產(chǎn)生影響。

1.1 lncRNA對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞增殖、遷移、侵襲和凋亡的影響

PE 是一種子宮螺旋動(dòng)脈重塑受損導(dǎo)致的妊娠特異性疾病，與滋養(yǎng)層細(xì)胞功能障礙有關(guān)。最近，越來(lái)越多的證據(jù)表明lncRNA 的異常表達(dá)與包括PE 在內(nèi)的多種人類(lèi)疾病有關(guān)。研究顯示，lncRNASNHG16在PE 患者胎盤(pán)中表達(dá)下調(diào)，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)小核仁RNA 宿主基因16（small nucleolar RNA host gene 16，SNHG16）缺失顯著抑制滋養(yǎng)層細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，并刺激細(xì)胞凋亡，而SNHG16過(guò)表達(dá)則起到相反的作用[6]。PE 胎盤(pán)組織中l(wèi)ncRNA MVIH 表達(dá)下調(diào)，沉默肝細(xì)胞癌微血管浸潤(rùn)基因表達(dá)可通過(guò)調(diào)節(jié)Jun-B 蛋白表達(dá)，抑制各種滋養(yǎng)層細(xì)胞系中的細(xì)胞生長(zhǎng)、遷移、侵襲和血管生成[7]。與正常女性相比，PE 患者胎盤(pán)組織中的lncRNA 微管蛋白γ-1 鏈（tubulin gamma-1 chain，TUBG1）降低，TUBG1 的下調(diào)可抑制細(xì)胞增殖、遷移和侵襲，并促進(jìn)滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡，同時(shí)，增加PE 中Zeste 同源物2 的增強(qiáng)子表達(dá)，從而抑制子宮螺旋動(dòng)脈重塑[8]。滋養(yǎng)層細(xì)胞相較于其他人體組織更方便獲取，且涉及的倫理問(wèn)題較少，已成為目前研究的重點(diǎn)。相關(guān)lncRNA 通過(guò)調(diào)控下游基因，抑制滋養(yǎng)層細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，影響子宮螺旋動(dòng)脈重塑，是導(dǎo)致PE 的重要因素之一。

1.2 lncRNA對(duì)PE患者免疫反應(yīng)的影響

妊娠是一個(gè)半同種異體移植的過(guò)程，免疫機(jī)制在其中起著重要作用，貫穿于從胚胎植入、胎盤(pán)形成直到分娩的全過(guò)程。妊娠特異性免疫既要保護(hù)母胎抵抗病原體的侵害，又要防止母體對(duì)半異體基因胎兒胎盤(pán)單位的排斥，免疫狀態(tài)失衡會(huì)引起PE 等疾病。lncRNA-DC 是樹(shù)突狀細(xì)胞（dendritic cells，DC）中表達(dá)的一種lncRNA，PE 患者胎盤(pán)組織中可見(jiàn)lncRNA-DC 的下調(diào)，其可通過(guò)弱化DC 對(duì)T 調(diào)節(jié)細(xì)胞的抑制作用，改變母體免疫平衡狀態(tài)，進(jìn)而促進(jìn)PE 的發(fā)生[9]。

1.3 lncRNA對(duì)PE患者不良妊娠結(jié)局的影響

PE 是妊娠期常見(jiàn)的綜合征，也是導(dǎo)致孕婦及其嬰兒死亡等不良妊娠結(jié)局的主要原因。Wang等研究發(fā)現(xiàn)PE 患者血清中l(wèi)ncRNA TCL6 水平明顯升高；此外，與其他PE 患者相比，lncRNA TCL6 在早發(fā)性或重度PE 合并有溶血、肝酶升高和低血小板計(jì)數(shù)患者亞組中升高；lncRNA TCL6高表達(dá)與不良妊娠結(jié)局的發(fā)生率升高相關(guān)，是不良妊娠結(jié)局的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[10]。

2 微小RNA與子癇前期

miRNA 是小型非編碼RNA，長(zhǎng)度約為22 個(gè)核苷酸，在調(diào)節(jié)包括細(xì)胞分化、凋亡和發(fā)育在內(nèi)的多種生物過(guò)程中起著重要作用，目前有超過(guò)2 600 種miRNA 在人類(lèi)基因組注釋?zhuān)⑶覔?jù)估計(jì)，30%～60%的蛋白質(zhì)編碼基因可受miRNA 調(diào)節(jié)[11]。

2.1 miRNA對(duì)PE滋養(yǎng)層細(xì)胞的影響

PE 的明顯特征之一是滋養(yǎng)層侵襲不足，一些異常表達(dá)的miRNA 主要在調(diào)節(jié)滋養(yǎng)層細(xì)胞增殖、凋亡和侵襲中發(fā)揮作用。研究表明，miRNA-195、miRNA-376c、miRNA-378a-5p等可通過(guò)靶向激活素受體Ⅱ、活化素受體樣激酶 5（activin receptor-like kinase 5，ALK5）、ALK7 等，促進(jìn)人滋養(yǎng)細(xì)胞的增殖和侵襲。miRNA-223 低表達(dá)可通過(guò)促進(jìn)白介素6（interleukin-6，IL-6）的增加使血管功能發(fā)生障礙，影響滋養(yǎng)層細(xì)胞的侵襲性，進(jìn)而引發(fā)PE[12]。miRNA-210 可通過(guò)調(diào)控缺氧相關(guān)信號(hào)通路抑制滋養(yǎng)細(xì)胞的侵襲，影響PE的發(fā)生與發(fā)展[13]。

2.2 miRNA對(duì)PE炎癥反應(yīng)的影響

有研究表明，與正常胎盤(pán)相比，PE 胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞中miR126-3p 的表達(dá)下調(diào)，IL-6 和腫瘤壞死因子α 增加；此外，過(guò)表達(dá)miRNA-126-3p 顯著降低正常胎盤(pán)和PE 胎盤(pán)滋養(yǎng)層IL-6 和腫瘤壞死因子α 的產(chǎn)生，同時(shí)還減弱了低氧條件下培養(yǎng)的滋養(yǎng)層細(xì)胞中8-異前列腺素的產(chǎn)生，這表明miRNA-126-3p 表達(dá)下調(diào)降低了PE胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞的抗炎和抗氧化應(yīng)激活性[14]。miRNA-210 升高可能通過(guò)抑制抗炎Th2 細(xì)胞因子參與PE 的發(fā)生[15]。亦有研究發(fā)現(xiàn)，與正常對(duì)照組相比，PE 患者血清和胎盤(pán)組織中miRNA-548c-5p 表達(dá)明顯下調(diào)，并與蛋白酪氨酸磷酸酶受體O（recombinant protein tyrosine phosphatase receptor type O，PTPRO）的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。PTPRO可促進(jìn)脂多糖刺激的巨噬細(xì)胞的增殖和活化，加重炎癥反應(yīng)[16]。Wang 等的研究發(fā)現(xiàn)PE 患者血管內(nèi)皮細(xì)胞中miRNA-203 和細(xì)胞間黏附分子（intercellular cell adhesion molecule-1，ICAM）表達(dá)上調(diào)，細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3（suppressor of cytokine signaling-3，SOCS-3）表達(dá)下調(diào)，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)miRNA-203 過(guò)表達(dá)導(dǎo)致SOCS-3 表達(dá)下調(diào)，IL-6、ICAM 產(chǎn)生增加，中性粒細(xì)胞黏附增加，提示內(nèi)皮細(xì)胞miRNA-203 表達(dá)增加可降低其抗炎活性，增強(qiáng)PE 患者的內(nèi)皮炎癥反應(yīng)[17]。

2.3 miRNA對(duì)PE患者血管生成的影響

血管生成受阻可導(dǎo)致胎盤(pán)處于缺血狀態(tài)，影響胎盤(pán)功能，促進(jìn)PE 的發(fā)生。研究顯示，在滋養(yǎng)細(xì)胞中miRNA-302a 的上調(diào)可能通過(guò)靶向血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子促進(jìn)細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，抑制血管生成[18]。與健康人群相比，PE 患者絨毛組織中miRNA-17、miRNA-20a、miRNA-20b 三種miRNA 的高表達(dá)水平顯著升高。它們共同通過(guò)調(diào)節(jié)滋養(yǎng)層細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞中腎上腺素B 型受體4 和EPH 相關(guān)受體酪氨酸激酶配體B2 的表達(dá)，從而抑制血管生成。miRNA-126 在血管生成中同樣發(fā)揮重要作用，Hong 等的研究發(fā)現(xiàn)miRNA-126 水平顯著降低，且與VEGF mRNA 水平呈正相關(guān)，說(shuō)明miRNA-126 可刺激滋養(yǎng)細(xì)胞中的VEGF 表達(dá)[11]。

2.4 miRNA對(duì)PE患者不良妊娠結(jié)局的影響

miRNA-203 在PE 孕婦血漿中高表達(dá)，且與圍生兒呼吸系統(tǒng)窘迫、宮內(nèi)生長(zhǎng)受限、低出生體重等不良妊娠結(jié)局相關(guān)，可作為PE 診斷、疾病程度監(jiān)測(cè)及預(yù)后評(píng)估的生物標(biāo)志物[19]。重度PE孕婦血清miRNA-210、miRNA-34a 水平升高，且血清miRNA-210、miRNA-34a 水平可作為重度PE孕婦不良妊娠結(jié)局發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測(cè)指標(biāo)[20]。

3 lncRNA-miRNA間相互作用對(duì)子癇前期的影響

lncRNA 與miRNA 相互作用從而發(fā)揮調(diào)控功能的機(jī)制主要有以下三點(diǎn)：一是lncRNA 與miRNA 競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合靶向mRNA 的3’端，從而抑制miRNA 對(duì)靶基因的調(diào)控；二是lncRNA 作為競(jìng)爭(zhēng)性?xún)?nèi)源性 RNA 發(fā)揮miRNA 的“分子海綿”作用而抑制miRNA 的生物學(xué)功能；三是lncRNA 還可作為潛在的miRNA 前體，產(chǎn)生成熟的miRNA，間接調(diào)控靶基因的表達(dá)[21]。

3.1 lncRNA聯(lián)合miRNA對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞的影響

PE 患者外周血中l(wèi)ncRNA XIST 表達(dá)增強(qiáng)，進(jìn)一步基于人滋養(yǎng)層細(xì)胞株HTR-8/SVneo 的研究表明，上調(diào)lncRNA XIST 可抑制細(xì)胞的增殖和侵襲，并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，miRNA-340-5p 的過(guò)表達(dá)逆轉(zhuǎn)了XIST 上調(diào)對(duì)細(xì)胞的凋亡、增殖和侵襲能力的影響，而KCNJ16 的下調(diào)可促進(jìn)miRNA-340-5p的表達(dá)增加，這提示lncRNA XIST 的上調(diào)可通過(guò)與miRNA-340-5p/KCNJ16 相互作用抑制滋養(yǎng)層細(xì)胞的增殖和侵襲[22]。在H2O2誘導(dǎo)的人滋養(yǎng)層細(xì)胞中l(wèi)ncRNA NEAT1 表達(dá)增加，miRNA-411-5p 表達(dá)降低，抑制lncRNA NEAT1 促進(jìn)細(xì)胞增殖、遷移和侵襲，miRNA-411-5p 表達(dá)升高，提示干擾lncRNA NEAT1 可通過(guò)介導(dǎo)miRNA-411 上調(diào)促進(jìn)滋養(yǎng)層細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，減緩PE的發(fā)展[23]。亦有研究表明，lncRNA TDRG1 在PE患者胎盤(pán)中可抑制miRNA-214-5p 表達(dá)，進(jìn)而影響NOTCH 信號(hào)通路激活，促進(jìn)滋養(yǎng)細(xì)胞遷移、增殖和侵襲[24]。

3.2 lncRNA聯(lián)合miRNA對(duì)表觀遺傳學(xué)的影響

在PE 動(dòng)物模型中，低氧誘導(dǎo)的miRNA-218通過(guò)靶向叉頭盒P1 轉(zhuǎn)錄因子抑制lncRNA TUG1的表達(dá)。進(jìn)一步的分析表明，?；撬嵴{(diào)節(jié)基因1（taurine up-regulated gene 1，TUG1）的沉默通過(guò)與花斑抑制因子同源物結(jié)合，增加了DNA 去甲基酶TET3 蛋白（ten-eleven translocation 3，TET3）和與增殖相關(guān)的雙特異性磷酸酶（dual specificity phosphatase，DUSP）家族DUSP2、DUSP4 和DUSP5 的表達(dá)。此外，TUG1 在體外同樣可通過(guò)TET3 介導(dǎo)的表觀遺傳學(xué)機(jī)制調(diào)控DUSP 家族[25]。

3.3 lncRNA聯(lián)合miRNA對(duì)自噬的影響

滋養(yǎng)層細(xì)胞的自噬增加與PE 的發(fā)生密切相關(guān)。在PE 小鼠模型中，lncRNASNHG5表達(dá)較低，SNHG5過(guò)表達(dá)可減少PE 小鼠胎盤(pán)組織的損傷，在人滋養(yǎng)層細(xì)胞HTR-8/SVneo 中，沉默SNHG5減少了滋養(yǎng)層細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，但增加了細(xì)胞凋亡和自噬[26]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，SNHG5可通過(guò)海綿吸附miRNA-31-5P 促進(jìn)富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白（secreted protein，acidic and rich in cysteine，SPARC）轉(zhuǎn)錄，miRNA-31-5P 基因敲除或應(yīng)用自噬抑制劑處理可逆轉(zhuǎn)SNHG5沉默對(duì)滋養(yǎng)層細(xì)胞自噬的促進(jìn)作用。這提示lncRNASNHG5通過(guò)海綿化miRNA-31-5p 和促進(jìn)SPARC轉(zhuǎn)錄來(lái)減輕PE 損傷和抑制滋養(yǎng)層細(xì)胞的自噬。

4 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，在PE 患者中l(wèi)ncRNA 和miRNA可通過(guò)獨(dú)立或相互作用，影響多個(gè)靶基因，調(diào)節(jié)胎盤(pán)滋養(yǎng)細(xì)胞的增殖、凋亡、侵襲、自噬、炎癥反應(yīng)、免疫功能、血管生成以及表觀遺傳等多種生物學(xué)過(guò)程，參與PE 的發(fā)生及發(fā)展。