李 蔓,陳亞楠,趙 晰△

(1.天津市北辰區(qū)中醫(yī)醫(yī)院,天津 300499;2.天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院,天津 300381)

腎間質(zhì)纖維化(RIF)是腎臟對(duì)各種類型損傷的一種非特異性反應(yīng),各種慢性和進(jìn)展性腎臟疾病最終的病理結(jié)局,也是一種不可逆性的病理改變,主要的病理特征表現(xiàn)為大量聚集的細(xì)胞外基質(zhì)沉積在腎間質(zhì)和腎小管,以及各類細(xì)胞因子的釋放、浸潤(rùn)、腎小管上皮細(xì)胞-間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、細(xì)胞外基質(zhì)(extra cellular matrixc,ECM)降解失衡等因素,加速了腎小球硬化,最終造成腎臟功能的喪失與衰竭[1],因此延緩腎臟纖維化,改善腎臟功能,對(duì)于慢性腎臟病的患者更加迫切。

近年來(lái)中藥復(fù)方在治療慢性腎臟病方面發(fā)揮著了獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),很多在西藥難以控制的腎臟疾病在運(yùn)用中醫(yī)辨證治療后,患者臨床癥狀均得到了明顯的改善。同時(shí)中醫(yī)復(fù)方還能在一定程度上減少腎病患者服用激素或者免疫抑制劑等西藥時(shí)引起的并發(fā)癥,改善了患者生活質(zhì)量,因此中醫(yī)復(fù)方越來(lái)越得到大家關(guān)注和重視,腎間質(zhì)纖維化的病名在我國(guó)古籍中并無(wú)記載,根據(jù)其特有的病理表現(xiàn),可歸屬于中醫(yī)“水腫”、“癃閉”、“關(guān)格”、“癥瘕”、“虛勞”等范疇。其總體的病機(jī)為本虛標(biāo)實(shí),本虛中的脾腎虛損和標(biāo)實(shí)中的濕熱、瘀血、濁毒是病機(jī)中的重要環(huán)節(jié),前者是導(dǎo)致疾病發(fā)生、發(fā)展的病理基礎(chǔ),后者則為疾病持續(xù)發(fā)展的重要原因。

目前中醫(yī)藥在防治腎間質(zhì)纖維化方面已有大量的實(shí)驗(yàn)研究,發(fā)現(xiàn)許多中醫(yī)復(fù)方均具有抗腎纖維化的作用?，F(xiàn)將近5年中藥復(fù)方治療腎間質(zhì)纖維化的相關(guān)重要機(jī)制簡(jiǎn)單介紹如下。

1 抑制細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)過(guò)度沉積

ECM的主要成分為膠原蛋白(collagen)、彈力蛋白(elastin)、纖維連接蛋白(FN)以及層黏連蛋白(LN),腎臟中ECM主要來(lái)源于成纖維細(xì)胞和肌成纖維細(xì)胞(MF)[2],在腎間質(zhì)纖維化的腎臟中可檢測(cè)出大量的MF。成纖維細(xì)胞生理狀態(tài)下只產(chǎn)生少量的ECM,只有在受到炎癥等細(xì)胞因子刺激后轉(zhuǎn)化為MF,MF產(chǎn)生大量的膠原以及α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA),使腎臟中ECM過(guò)度沉積,破壞正常的腎臟結(jié)構(gòu)。吳小燕等[3]以清化固腎排毒顆粒(黃芪、柴胡、白花蛇舌草、山藥、金錢(qián)草、大黃、白芥子)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究,發(fā)現(xiàn)UUO大鼠ECM沉積減少,COL4、FN陽(yáng)性表達(dá)顯著下降,腎纖維化程度緩解,證實(shí)清化固腎排毒顆?？赏ㄟ^(guò)下調(diào)COL4、FN的表達(dá)而達(dá)到改善腎纖維化的作用。朱苗蕊等[4]以HK-2細(xì)胞為研究對(duì)象,發(fā)現(xiàn)高糖誘導(dǎo)后ECM顯著增加,新加糖腎康(黃芪、生地黃等)干預(yù)后能夠通過(guò)抑制ECM成分ColⅠ、Col Ⅲ、FN的分泌而防治DN間質(zhì)纖維化。呂雁等[5]研究發(fā)現(xiàn)益腎化瘀方(黃芪、菟絲子、制大黃、丹參、莪術(shù))可明顯降低BUN、Scr,減少膠原生成,減輕腎小管損傷,證實(shí)益腎化瘀方可減少膠原生成,減緩腎間質(zhì)纖維化。

2 促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)降解

基質(zhì)金屬蛋白酶系統(tǒng)(MMPs/TIMPs)失衡是ECM降解減少的重要原因,基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)對(duì)于ECM具有很強(qiáng)的降解力,當(dāng)MMPs被基質(zhì)金屬蛋白酶抑制物(TIMPs)阻斷活性時(shí),ECM無(wú)法被及時(shí)降解,同樣也會(huì)導(dǎo)致ECM的過(guò)度沉積,加劇腎間質(zhì)纖維化。張琳琪等[6]研究發(fā)現(xiàn)益腎化瘀方(黃芪、菟絲子、制大黃、丹參、莪術(shù))可降低UUO大鼠TIMP-1mRNA水平以及纖維化程度,可通過(guò)平衡基質(zhì)金屬蛋白酶系統(tǒng)MMP-1/TIMP-1,促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)成分的降解從而起到保護(hù)腎臟的作用。張新志等[7]研究證明抗纖靈沖劑(制大黃、桃仁、當(dāng)歸、丹參、牛膝)發(fā)揮抗腎間質(zhì)纖維化的作用可能與MMP-9下調(diào)COL4α3基因及Col-Ⅳ蛋白表達(dá),促進(jìn)ECM降解來(lái)實(shí)現(xiàn)的。

3 調(diào)控纖維化因子及信號(hào)通路表達(dá)

3.1 調(diào)控TGF-β水平及相關(guān)因子表達(dá) 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF-β)是腎間質(zhì)纖維化進(jìn)程中不可缺少的因子,TGF-β有三個(gè)亞型,其中 TGF-β1致纖維化作用最為顯著,不僅可以刺激成纖維細(xì)胞的活化,產(chǎn)生大量的膠原蛋白、FN、LN等加速ECM的沉積,同時(shí)抑制基質(zhì)金屬蛋白酶活化,減少ECM的降解,使ECM合成和降解失衡,中藥復(fù)方也常將其作為治療RIF的關(guān)鍵靶點(diǎn)。魏曉露等[8]研究發(fā)現(xiàn)扶腎降濁方(山茱萸、生黃芪、白花蛇舌草、丹參、鬼箭羽、益母草)可明顯減少BUN、SCr、24hUPr,減輕腎組織病理?yè)p傷,降低TGF-β1和ColⅠ蛋白表達(dá),升高HGF蛋白表達(dá)。證實(shí)扶腎降濁方可通過(guò)抑制TGF-β1和ColⅠ蛋白表達(dá),促進(jìn)HGF蛋白的升高,減少腎小管間質(zhì)損傷而抑制腎間質(zhì)纖維化。另有研究以阿霉素腎病大鼠為研究對(duì)象,證實(shí)補(bǔ)益脾腎方(黃芪、山茱萸、白術(shù)、三七、川芎)[9]通過(guò)調(diào)節(jié)TGF-β1和HGF表達(dá),減緩腎間質(zhì)纖維化。強(qiáng)勝等[10]研究證實(shí)固本泄?jié)犸?黃芪、蠶沙、首烏、黨參、生大黃等)可減少5/6腎切除大鼠中Scr、BUN含量,可通過(guò)下調(diào)TGF-β1,上調(diào)BMP-7蛋白表達(dá),來(lái)延緩腎衰大鼠腎間質(zhì)纖維化進(jìn)展。栗睿等[11]以腺嘌呤致腎間質(zhì)纖維化大鼠為研究對(duì)象,益腎排毒方(黃芪、土茯苓、當(dāng)歸、茯苓、大黃等)干預(yù)8周后,發(fā)現(xiàn)各治療組TGF-β1、ColⅣ較模型組降低,證實(shí)益腎排毒中藥復(fù)方具有改善及延緩腺嘌呤導(dǎo)致腎衰竭大鼠的腎間質(zhì)纖維化的作用。

TGF-β1是強(qiáng)效的誘導(dǎo)劑,在間充質(zhì)基因表達(dá)過(guò)程中發(fā)揮重要作用,能夠促使腎小管上皮細(xì)胞向間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化(EMT),進(jìn)而增加間充質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志蛋白α-SMA的表達(dá),減少上皮細(xì)胞標(biāo)志蛋白E-cadherin的表達(dá)[12]。Zhu等[13]研究證明祛菀陳莝方(丹參、大黃、牡丹皮、茯苓等)使UUO大鼠TGF-β1、α-SMA、E-cadherin顯著降低,可通過(guò)調(diào)節(jié)TGF-β1、E-cadherin等信號(hào)的表達(dá),下調(diào)α-SMA水平,阻止腎纖維化的進(jìn)展。

TGF-β還可以活化信號(hào)通路,其中Smad 信號(hào)傳導(dǎo)與RIF聯(lián)系最為密切。TGF-β可以磷酸化Smad2和Smad3使其活化,促進(jìn)纖維化進(jìn)程,而Smad7作為抑制型信號(hào)分子可以與Smad2、Smad3競(jìng)爭(zhēng)受體,抑制纖維化進(jìn)程。近年來(lái),大量研究也證實(shí)了中藥復(fù)方可通過(guò)下調(diào)TGF-β表達(dá),抑制信號(hào)通路活化,從而減緩腎間質(zhì)纖維化。Chen等[14]實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)參芪丸(地黃、丹皮、山茱萸、茯苓、山藥、澤瀉等)可通過(guò)上調(diào) Smad7,抑制 p-Smad2/3 的 mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá),從而抑制TGF-β1/Smads信號(hào)通路,減少腺嘌呤大鼠中Scr、BUN、U-pro/24 h,減緩腎間質(zhì)纖維化。Jiang等[15]以右腎切除的SD大鼠為研究對(duì)象,發(fā)現(xiàn)抗纖靈(丹參、大棗、牛膝、桃仁、淫羊藿)可降低BUN、Scr、24 h尿蛋白、TGF-β1、Smad3、α-SMA、Col1a1、Col1a2和FN表達(dá)水平以及膠原纖維成分和間質(zhì)細(xì)胞浸潤(rùn)程度,證實(shí)抗纖靈可下調(diào)TGF-β/Smad傳導(dǎo)通路,發(fā)揮抗纖維化作用。陳宇等[16]研究發(fā)現(xiàn)清化固腎排毒方(黃芪、山藥、金錢(qián)草、大黃、白芥子)可下調(diào)Smad2/3及上調(diào)Smad7來(lái)抑制TGF-β1/Smads傳導(dǎo)通路起到延緩腎間質(zhì)纖維化的作用。程濤等[17]以高糖環(huán)境誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞為研究對(duì)象,發(fā)現(xiàn)新加糖腎康(黃芪、生地黃等)能夠顯著減少TGF-β1、TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ、Smad2、Smad3蛋白的表達(dá),證實(shí)新加糖腎康能可以下調(diào)TGF-β/Smads信號(hào)通路起到減輕DN間質(zhì)纖維化的作用。

3.2 調(diào)控 Wnt信號(hào)通路 有研究表明[18-20],很多不同的腎損傷類型都能發(fā)現(xiàn)Wnt/β-catenin 信號(hào)通路的表達(dá),是引發(fā)腎損傷的重要信號(hào)通路。Wnt/β-catenin 信號(hào)通路可持續(xù)激活成纖維細(xì)胞,刺激多種炎癥因子表達(dá),從而導(dǎo)致ECM大量沉積以及EMT,中藥復(fù)方可通過(guò)阻斷該信號(hào)通路因子的表達(dá),緩解RIF。林文博等[21]研究發(fā)現(xiàn)腎病I號(hào)方(柴胡、黃芩、半夏、白芍、土茯苓、半枝蓮等)可使UUO大鼠24hUP、Scr、BUN以及wnt4、β-catenin表達(dá)減少,膠原組織減少,證實(shí)腎病I號(hào)方發(fā)揮抗腎間質(zhì)纖維化的作用可通過(guò)下調(diào)Wnt4和β-catenin的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)。馬飛等[22]以UUO大鼠為研究對(duì)象,證實(shí)腎衰寧片可降低血CREA、BUN、尿mAlb水平,通過(guò)降低Wnt4和β-catenin表達(dá)減輕腎損傷,延緩腎間質(zhì)纖維化。劉武[23]研究證實(shí)補(bǔ)腎消癥湯(黃芪、菟絲子、炒杜仲、淫羊藿、土鱉蟲(chóng)、酒大黃等)可明顯降低UUO大鼠β-catenin、PAI-1蛋白表達(dá),促進(jìn)miRNA-139,MMP-7蛋白表達(dá),證實(shí)建中補(bǔ)腎消癥湯可減緩腎間質(zhì)纖維化,可能與干預(yù)miRNA-139表達(dá)從而調(diào)控Wnt/β-catenin信號(hào)通路相關(guān)。還有研究[24]證實(shí)健脾益腎方可在大鼠5/6 腎切除模型中上調(diào)E-cadherin的表達(dá),并下調(diào)Wnt3a、α-SMA、β-catenin的表達(dá),提供了健脾益腎中藥復(fù)方可以通過(guò)抑制Wnt3a/β-catenin來(lái)調(diào)控上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化發(fā)揮抗纖維化作用。

3.3 調(diào)控PI3K/Akt信號(hào)通路 PI3K/Akt信號(hào)通路與轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF-β)、結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)等促纖維化因子聯(lián)系密切[25],且PI3K/Akt信號(hào)通路可誘導(dǎo)單核/巨噬細(xì)胞浸潤(rùn),促進(jìn)炎性因子的表達(dá)。有研究表明,PI3K/Akt信號(hào)通路的激活本身即可介導(dǎo)足細(xì)胞的損傷,即腎小球臟層上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能破壞,進(jìn)而導(dǎo)致蛋白尿的出現(xiàn)[26]。楊婧等[27]以5/6腎切除大鼠為研究對(duì)象,腎衰Ⅱ號(hào)方(大黃、桃仁、川芎、黨參、丹參等)干預(yù)60天后發(fā)現(xiàn)用藥組大鼠Scr、BUN顯著減少,Ccr、Hb明顯增多,纖維化明顯減輕,p-Akt/pan Akt比值明顯降低,證實(shí)腎衰Ⅱ號(hào)方可通過(guò)下調(diào)PI3K/Akt信號(hào)通路的表達(dá)而減輕腎間質(zhì)纖維化。張藝偉等[28]研究表明參地補(bǔ)腎膠囊(人參、熟地、大黃、白術(shù)、茯苓、甘草等)可通過(guò)降低UUO大鼠PI3K/AKT信號(hào)通路的表達(dá),從而延緩腎間質(zhì)纖維化進(jìn)程。Luo等[29]研究證明,大黃黃芪湯(大黃、黃芪)可顯著降低UUO大鼠Scr、BUN以及PI3K、Akt、TGF-β1、α-SMA、IL-6的表達(dá),腎小管萎縮和壞死、間質(zhì)纖維化、細(xì)胞外基質(zhì)增生和異常沉積明顯減輕,證實(shí)大黃黃芪湯可以潛在地調(diào)節(jié)PI3K/Akt信號(hào)通路,減少膠原沉積,延緩腎間質(zhì)纖維化進(jìn)一步加重。

3.4 調(diào)控SHH信號(hào)通路 SHH信號(hào)通路在RIF進(jìn)程中發(fā)揮著重要作用,可誘導(dǎo)TGF-β1釋放,且SHH信號(hào)通路上調(diào) Glil、Snaill 的表達(dá),可促進(jìn)EMT。Li等[30]以UUO大鼠為研究對(duì)象,發(fā)現(xiàn)腎衰靈方(大黃、龍骨、牡蠣、黨參、丹參、蒲公英等)可顯著降低UUO大鼠SCr、BUN,下調(diào)Gli1、snail1、Collagen I、α-SMA表達(dá)。證實(shí)腎衰靈方可抑制SHH-Gli1-snail1 信號(hào)通路的激活,降低纖維化細(xì)胞增殖,延緩腎間質(zhì)進(jìn)一步纖維化。

4 抑制血管緊張素系統(tǒng)活性

AngⅡ在RIF腎間質(zhì)中的濃度高于血漿濃度幾十倍,AngⅡ可通過(guò)誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞向MF轉(zhuǎn)化以及增加促纖維化因子(TGF-β1、CTGF等)表達(dá),產(chǎn)生大量的ECM,促進(jìn)間質(zhì)細(xì)胞增生,同時(shí)還可以通過(guò)RASS系統(tǒng)影響水、電解質(zhì)平衡以及腎臟血流動(dòng)力造成不可逆的腎損傷。郭兆安等[31]實(shí)驗(yàn)研究以切除右腎聯(lián)合注射鏈脲佐菌素的糖尿病腎臟病大鼠為研究對(duì)象,芪蛭降糖膠囊(黃芪、水蛭、黃精、黃芪、生地黃)干預(yù)12周后發(fā)現(xiàn),芪蛭降糖膠囊用藥組Scr、24hUPQ、α1-MG、β2-MG、AngⅡ、ET-1BS、GSI、IF、TGF-β1明顯減少,NO顯著增高,證實(shí)芪蛭降糖膠囊可以通過(guò)抑制血管緊張素Ⅱ的分泌,從而減少TGF-β1表達(dá),改善腎小球硬化,發(fā)揮抗纖維化作用。

5 抑制炎癥細(xì)胞相關(guān)因子表達(dá)

在受到炎性因子刺激時(shí),上皮細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞可產(chǎn)生大量的腫瘤壞死因子-α(TNF-α),TNF-α能促進(jìn)巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)至受損的腎間質(zhì),并誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞的促纖維化因子釋放增加,加劇腎間質(zhì)的炎癥反應(yīng),引起成纖維細(xì)胞增殖及膠原的沉積[32]。張喜奎等[33]以桃核承氣湯(桃仁、大黃、桂枝、炙甘草、芒硝)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究,干預(yù)8周后,證實(shí)桃核承氣湯改善腎間質(zhì)纖維化與抑制炎癥因子CRP、TNF-α、IL-6表達(dá)有關(guān)。祝婷婷等[34]研究發(fā)現(xiàn)腎衰Ⅱ號(hào)方(大黃、桃仁、川芎、黨參、丹參等)可顯著降低5/6腎切除大鼠SCr、BUN、TNF-α的表達(dá),減輕纖維化程度,減少炎性細(xì)胞的浸潤(rùn),證實(shí)腎衰Ⅱ號(hào)方可抑制促炎癥細(xì)胞因子TNF-α的表達(dá),改善腎功能,減緩腎間質(zhì)纖維化。強(qiáng)勝等[35]研究證實(shí)益氣養(yǎng)陰通絡(luò)方(太子參、海風(fēng)藤、雞血藤、炙黃芪、熟地等)發(fā)揮抗腎間質(zhì)纖維化作用與抑制IgA腎病大鼠TNF-α表達(dá)有關(guān),可減少血尿、蛋白尿,減輕腎小球系膜基質(zhì)增生。

有研究表明[36-38]阻斷NLPR3炎癥小體活化,可明顯緩解腎臟炎癥的發(fā)展。NLPR3炎癥小體活化后,可激活白細(xì)胞介素IL-1β、IL-18,進(jìn)而加重炎癥反應(yīng),加快RIF進(jìn)程。Wang等[39]研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)歸補(bǔ)血湯(黃芪、當(dāng)歸)可顯著減少UUO大鼠α-SMA、NLRP3、pro-caspase-1、白細(xì)胞介素-1β的前體、白細(xì)胞介素-1β,小管中間質(zhì)損傷明顯減輕,間質(zhì)膠原沉積明顯減少。證實(shí)當(dāng)歸補(bǔ)血湯在UUO模型大鼠中起到了延緩間質(zhì)纖維化的作用,與抑制NLRP3炎性體表達(dá)和減少細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-1β的分泌有關(guān)。

6 抗氧化應(yīng)激

氧化應(yīng)激反應(yīng)在RIF發(fā)生發(fā)展過(guò)程中占據(jù)重要地位,氧化應(yīng)激是機(jī)體氧化/抗氧化系統(tǒng)失衡,導(dǎo)致活性氧(ROS)大量產(chǎn)生,引起組織產(chǎn)生不同程度的損傷。ROS的異常增多,可以促進(jìn)TGF-β1等促纖維化因子表達(dá),產(chǎn)生大量的ECM,同時(shí)可以直接攻擊腎臟各類細(xì)胞,造成細(xì)胞的壞死、凋亡。ROS也可以活化NF-κB 等信號(hào)通路,從而誘導(dǎo)纖維化以及炎癥等相關(guān)細(xì)胞、因子大量表達(dá),加劇RIF的進(jìn)展。Jin等[40]研究表明清腎顆粒(白花蛇舌草、薏苡仁、黃連、黃連、大黃、益母草等)干預(yù)4周后,可明顯降低UUO大鼠Scr、ROS、MDA、α-SMA,NF-κB 信號(hào)通路相關(guān)蛋白ICAM-1、MCP-1、NF-KBp65、p-IKBα、IKKα的表達(dá)減少,腎間質(zhì)纖維化得到明顯延緩,腎小管損傷明顯減輕,表明氧化應(yīng)激NF-κB信號(hào)通路有助于U腎間質(zhì)纖維化的形成。證實(shí)清腎顆粒可通過(guò)抑制氧化應(yīng)激NF-κB信號(hào)通路、減少炎癥來(lái)預(yù)防RIF。Yuan等[41]以氯化汞誘導(dǎo)的SD大鼠為研究對(duì)象,扶正化瘀方(天花粉、絞股藍(lán)、桃仁等)可減少Hyp含量和膠原沉積,顯著增加GSH含量,降低NF-κB活性、MMP-2活性、p-IκB、TNF-α、MDA及α-SMA表達(dá),證實(shí)了扶正化瘀方可以改善氯化汞誘導(dǎo)的腎間質(zhì)纖維化的氧化損傷,并通過(guò)抑制IκB磷酸化拮抗氧化應(yīng)激刺激的NF-κB活性,從而起到延緩腎間質(zhì)纖維化的作用。Yang等[42]以缺氧誘導(dǎo)的大鼠腎小管上皮細(xì)胞(NRK-52E)進(jìn)行體外分析,發(fā)現(xiàn)腎衰Ⅱ號(hào)方可減少FN 和 COL-I的表達(dá),證實(shí)腎衰Ⅱ號(hào)方對(duì)腎臟保護(hù)作用可能與抑制缺氧有關(guān),可以安全有效地減少細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生以減緩腎間質(zhì)纖維化。還有研究[43]證實(shí)通絡(luò)益腎湯(丹參、柴胡、紅花、菊花)通過(guò)抑制NLRP3介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡來(lái)減輕缺氧誘導(dǎo)的NRK-52E細(xì)胞損傷,可以起到阻斷腎纖維化進(jìn)一步進(jìn)展的結(jié)果。

7 調(diào)節(jié)線粒體功能

線粒體是細(xì)胞生成三磷酸腺苷(ATP)的場(chǎng)所,是機(jī)體供能的來(lái)源所在。眾多研究表明[44-45],線粒體功能障礙是腎小管上皮細(xì)胞損傷的主要特征,在腎臟損傷持續(xù)進(jìn)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用。RIF進(jìn)程中伴隨著水、電解質(zhì)、酸堿平衡紊亂,線粒體結(jié)構(gòu)和功能受到細(xì)胞環(huán)境影響,融合與裂變的平衡被打破,生成ATP減少,釋放大量的炎性因子,合成過(guò)量的ROS不僅會(huì)增加氧化應(yīng)激反應(yīng),也會(huì)直接攻擊線粒體的核酸、酶類等,導(dǎo)致線粒體功能障礙加劇,生成更多的ROS,加重腎損傷,加速ECM沉積。隨著的發(fā)生發(fā)展RIF,腎單位也隨之遭到越來(lái)越多的破壞,機(jī)體則需要更多的ATP提供能量。線粒體功能障礙,ATP合成不足會(huì)加劇纖維化進(jìn)程,中藥復(fù)方可通過(guò)恢復(fù)線粒體裂變/融合平衡,改善線粒體功能以緩解RIF患者病情。Liu等[46]研究發(fā)現(xiàn)健脾益腎方(黃芪、白術(shù)、肉蓯蓉、白豆蔻、丹參、大黃、甘草等)可明顯減少5/6腎切除大鼠Scr、BUN、尿蛋白及纖維標(biāo)志物纖連蛋白、IV型膠原蛋白α-SMA,上調(diào)線粒體呼吸復(fù)合物的亞單位,增加PGC-1α(線粒體生物發(fā)生的主要調(diào)節(jié)因子)及其下游信號(hào) NRF-1 和 TFAM的表達(dá),從而恢復(fù)PINK1/Parkin介導(dǎo)的線粒體自噬,從而抑制Drp-1 的上調(diào)和 Mfn-2 和 OPA-1 的下調(diào)來(lái)增加線粒體的融合、減少裂變,腎小球肥大、腎間質(zhì)纖維化在病理結(jié)果中顯現(xiàn)明顯減輕。證實(shí)健脾益腎方可通過(guò)調(diào)節(jié)線粒體質(zhì)量控制網(wǎng)絡(luò)減輕腎結(jié)構(gòu)損傷,保護(hù)腎功能,減緩間質(zhì)纖維化。Liu等[47]另一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)治療健脾益腎方可降低Scr、BUN 以及FN、Col-IV、α-SMA蛋白表達(dá),促進(jìn) QPRT/NAD+/SIRT3 信號(hào)并恢復(fù)線粒體裂變/融合平衡,減輕腎間質(zhì)纖維化水平。黃芪丹參湯(黃芪、丹參)在實(shí)驗(yàn)研究[48]中也被證實(shí)可減少線粒體分裂的主要調(diào)節(jié)因子Drp-1、Mid 51和Mid 49表達(dá),促進(jìn)Mfn-2表達(dá)和抑制OPA-1水解來(lái)恢復(fù)線粒體動(dòng)力學(xué),調(diào)節(jié)線粒體裂變/融合平衡,從而改善腎小管萎縮和間質(zhì)纖維化。Wang等[49]實(shí)驗(yàn)研究也證實(shí)了腎衰Ⅱ號(hào)方上調(diào)PGC-1α蛋白表達(dá),改善線粒體形態(tài)和功能,抑制mtROS的產(chǎn)生以保護(hù)腎功能,延緩纖維化。

8 小結(jié)

綜上所述,不難發(fā)現(xiàn)中藥復(fù)方對(duì)于抗腎間質(zhì)纖維化的實(shí)驗(yàn)研究機(jī)制多集中于抑制ECM過(guò)度沉積、抑制炎性因子表達(dá)、抗氧化應(yīng)激以及近年新興熱點(diǎn)——調(diào)節(jié)線粒體的相關(guān)功能,對(duì)于信號(hào)通路多集中于TGF-β1所介導(dǎo)的信號(hào)通路及因子表達(dá)。RIF是多種因素共同影響的動(dòng)態(tài)病理改變,除了本文所涉及的TGF-β1、Wnt、NF-κB、PI3K/Akt以及SHH信號(hào)通路外,還有Notch、JAK/STAT多種信號(hào)通路和分子相互作用、協(xié)同調(diào)控RIF。因此,RIF的影響機(jī)制是中藥復(fù)方治療RIF,保護(hù)腎功能的重要靶點(diǎn)。上述研究發(fā)現(xiàn),中藥復(fù)方在防治RIF的多環(huán)節(jié)都發(fā)揮了重要作用,中醫(yī)認(rèn)為RIF的病機(jī)不外乎脾腎虧虛為本,濕熱、瘀血、濁毒為標(biāo),中藥復(fù)方在組方時(shí)也本著補(bǔ)腎健脾、利濕泄?jié)?、活血通絡(luò)的治療原則,多使用黃芪、茯苓、枸杞、川芎、大黃、丹參等中藥進(jìn)行組方配伍。大量的研究表明[50],這些中藥具有抗炎、抗氧化、抗凋亡、抗纖維化等現(xiàn)代藥理學(xué)作用,這恰好與RIF的發(fā)病機(jī)制相符。在上述研究中,同一中藥復(fù)方在治療RIF具有多種作用靶點(diǎn),不同的中藥復(fù)方也可以抑制同一種機(jī)制,例如:腎衰Ⅱ號(hào)方可通過(guò)抑制PI3K/AKT信號(hào)通路活化[26]、下調(diào)促炎癥細(xì)胞因子TNF-α的表達(dá)[34]、抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)[42]以及改善線粒體形態(tài)和功能[49]等多條途徑延緩RIF進(jìn)程,參芪丸[14]、抗纖靈[15]、清化固腎排毒方[16]以及新加糖腎康[17]等多個(gè)中藥復(fù)方都可抑制TGF-β/Smad信號(hào)傳導(dǎo)通路活化,從而發(fā)揮抗纖維化的作用。這與中醫(yī)辨證論治以及各中藥相配伍,發(fā)揮其有效成分的作用息息相關(guān)。然而目前中藥復(fù)方對(duì)于單一機(jī)制之間尚缺乏串聯(lián)整合,在阻斷發(fā)病機(jī)制方面的各項(xiàng)研究尚且不夠深入[51]。雖然大量的實(shí)驗(yàn)研究已經(jīng)表明,中藥復(fù)方在組織、細(xì)胞、蛋白、基因等水平防治腎間質(zhì)纖維化具有良好的效果,但由于中藥成分的復(fù)雜性,多種中藥配伍而成的中藥復(fù)方其成分更為復(fù)雜。因此,對(duì)于中藥復(fù)方及單味藥有效成分進(jìn)行深入研究,剖析中藥復(fù)方如何多靶點(diǎn)、多層次、多環(huán)節(jié)的發(fā)揮抗腎間質(zhì)纖維化作用,同時(shí)與現(xiàn)代科學(xué)相融合,為中藥復(fù)方在藥物、藥量等配伍組方提供更明確的依據(jù),以期研發(fā)更多具有針對(duì)性、療效明確的臨床中藥制劑。