吳嶺，王偉偉，陳大明，馮福梅，何志國(guó)，張建生

0 引言

胃癌是起源于胃黏膜上皮細(xì)胞病變的消化道惡性腫瘤，具有較高的發(fā)病率與死亡率[1]?；蛲蛔儭⒉涣硷嬍辰Y(jié)構(gòu)、病菌感染及吸煙等因素均可誘發(fā)胃癌。與傳統(tǒng)開放根治手術(shù)相比，腹腔鏡胃癌根治術(shù)因具有創(chuàng)傷較小、術(shù)后恢復(fù)較快等特點(diǎn)，已成為臨床治療胃癌的主要外科手段，可有效提高患者生存質(zhì)量，延長(zhǎng)生存期，但仍有部分患者在術(shù)后出現(xiàn)復(fù)發(fā)，嚴(yán)重影響患者預(yù)后[2]。因此，積極探討影響胃癌腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)的相關(guān)因素，以指導(dǎo)臨床制定合適的防控措施，對(duì)減少患者術(shù)后復(fù)發(fā)具有重要意義。近年來，有研究顯示[3]有多種基因、細(xì)胞因子及化合物參與了腫瘤細(xì)胞的發(fā)生發(fā)展過程，其中腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子4（tumor necrosis factor receptor associated factor 4,TRAF4）和核糖體S6蛋白激酶4（ribosomal s6 protein kinase 4,RSK4）在腫瘤細(xì)胞中存在異常表達(dá)。TRAF4屬于TRAF家族類蛋白，可介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳遞，有研究指出[4]TRAF4在乳腺癌、結(jié)直腸癌等腫瘤組織中高表達(dá)。RSK4為核糖體S6蛋白激酶家族成員之一，參與絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）信號(hào)通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)，具有調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、分化的作用，有研究指出[5]RSK4蛋白在結(jié)直腸癌細(xì)胞株中低表達(dá)，可能參與了結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展。以往研究大多是對(duì)TRAF4或RSK4蛋白在癌細(xì)胞中的作用及其與患者臨床病理特征的關(guān)系進(jìn)行分析，但關(guān)于TRAF4和RSK4蛋白表達(dá)是否與胃癌患者腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)相關(guān)不甚明確。鑒于此，本研究探討了胃癌組織TRAF4和RSK4蛋白的表達(dá)與患者腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)的相關(guān)性，旨在為臨床制定合適的防控措施提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2016年1月～2019年1月收治的176例胃癌患者的臨床資料，其中男105例，女71例；年齡39～76歲，平均（53.18±10.09）歲；胃癌病變部位：胃竇80例，賁門55例，幽門28例，其他部位13例；胃癌組織類型：乳頭狀腺癌69例，管狀腺癌55例，黏液腺癌39例，其他組織類型13例；TNM分期：Ⅰ期28例，Ⅱ期85例，Ⅲ期63例；腫瘤分化程度：高分化48例，中分化63例，低分化65例。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過。

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）經(jīng)臨床病理及胃鏡檢查確診為胃癌；（2）初治，滿足腹腔鏡胃癌根治術(shù)適應(yīng)證且均接受腹腔鏡胃癌根治術(shù)治療及淋巴結(jié)清掃術(shù)；（3）患者或家屬知曉并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）既往接受過放療、靶向治療、化療或胃癌根治術(shù)者；（2）嚴(yán)重精神疾病患者；（3）既往胃癌術(shù)后出現(xiàn)復(fù)發(fā)的患者；（4）嚴(yán)重心、腎衰竭或功能不全者；（5）合并患有其他惡性腫瘤者；（6）術(shù)前已出現(xiàn)胃癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者；（7）合并患有免疫系統(tǒng)或血液系統(tǒng)疾病者；（8）術(shù)后預(yù)計(jì)生存期<3個(gè)月。

1.2 方法

1.2.1 TRAF4和RSK4蛋白表達(dá)檢測(cè) 納入研究患者均采取腹腔鏡胃癌根治術(shù)治療，并于術(shù)中留取胃癌組織及癌旁組織（距腫瘤切緣外約3 cm）。將組織經(jīng)10%甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋制備成組織蠟塊，使用免疫組織化學(xué)法測(cè)定TRAF4和RSK4蛋白表達(dá)。步驟如下：將胃癌及癌旁組織蠟塊連續(xù)切片（4 μm）3張，常規(guī)脫蠟水化，然后進(jìn)行抗原修復(fù)，再使用1%過氧化氫（H2O2）-甲醇消除內(nèi)源性過氧化物酶，室溫下靜置10 min后PBS洗3次，5%血清白蛋白（BSA）孵育20 min，分別加入兔抗人TRAF4多克隆抗體及兔抗人RSK4單克隆抗體，4℃孵育過夜。次日37℃復(fù)溫1 h，后PBS洗3次，分別加入山羊抗兔二抗抗體，室溫孵育2 h，PBS洗3次后，二氨基聯(lián)苯胺（DAB）進(jìn)行顯色，蒸餾水清洗終止顯色，蘇木精對(duì)比染色，充分水洗。脫水后，以中性樹膠封固，于顯微鏡下觀察。同時(shí)用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。

1.2.2 結(jié)果判定 在400高倍鏡視野下隨機(jī)選取5個(gè)視野，各視野均計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，記錄陽性細(xì)胞占比，其中TRAF4陽性細(xì)胞表現(xiàn)為細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒，RSK4陽性細(xì)胞表現(xiàn)為細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒。

蛋白表達(dá)情況判定標(biāo)準(zhǔn)：（1）按照染色強(qiáng)度判定：細(xì)胞未著色記為0分，呈淡棕黃色記為1分，呈棕黃色記為2分，呈明顯的棕黃色或深褐色記為3分；（2）按照陽性細(xì)胞（棕黃色）所占比例判定：陽性細(xì)胞占比<5%記為0分，5%≤陽性細(xì)胞占比<25%記為1分，25%≤陽性細(xì)胞占比<50%記為2分，50%≤陽性細(xì)胞占比<75%記為3分，陽性細(xì)胞占比≥75%記為4分；將染色強(qiáng)度與陽性細(xì)胞占比兩者得分相乘，<2分為蛋白表達(dá)陰性，≥2分為蛋白表達(dá)陽性。

術(shù)后復(fù)發(fā)判定與分組：腹腔鏡胃癌根治術(shù)后，前3個(gè)月每月對(duì)患者電話或微信隨訪一次，上門訪問一次，3個(gè)月后每隔1個(gè)月電話隨訪1次，隨訪期間囑患者定期至醫(yī)院復(fù)診，共隨訪36個(gè)月。復(fù)發(fā)判定：經(jīng)影像學(xué)檢查（CT、PET-CT、MRI）、組織病理學(xué)檢查（胃鏡活檢、穿刺或再次手術(shù)）明確，發(fā)現(xiàn)手術(shù)切除部位或附近新發(fā)腫瘤或出現(xiàn)遠(yuǎn)處組織器官轉(zhuǎn)移等。將術(shù)后復(fù)發(fā)者歸為復(fù)發(fā)組，反之歸為未復(fù)發(fā)組。

1.2.3 影響因素分析 統(tǒng)計(jì)可能影響胃癌患者腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)的影響因素，包括患者年齡、性別、最大腫瘤直徑、分化程度、TNM分期、Lauren分型、浸潤(rùn)深度、腹水、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、術(shù)后輔助化療、TRAF4蛋白表達(dá)、RSK4蛋白表達(dá)、規(guī)律飲食、家族胃癌病史、幽門螺旋桿菌感染等，將其作為自變量（X），對(duì)其進(jìn)行賦值，結(jié)果見表1；另將腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)情況作為因變量（Y），未復(fù)發(fā)記為0，復(fù)發(fā)記為1；分析因變量與自變量間的關(guān)系。

表1 胃癌患者腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)影響因素賦值情況Table 1 Assignment of independent variables influencing recurrence after laparoscopic radical gastrectomy

1.3 觀察指標(biāo)

（1）胃癌組織與癌旁組織TRAF4和RSK4蛋白表達(dá)；（2）不同病理特征患者胃癌組織TRAF4和RSK4蛋白表達(dá)；（3）術(shù)后復(fù)發(fā)情況及復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組胃癌組織TRAF4和RSK4蛋白表達(dá)比較；（4）胃癌患者腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)的影響因素：風(fēng)險(xiǎn)比（HR）、95%CI；（5）胃癌組織TRAF4和RSK4蛋白表達(dá)對(duì)腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)作用。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS23.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用例數(shù)和百分?jǐn)?shù)（n（%））表示，采用χ2檢驗(yàn)。當(dāng)理論頻數(shù)為1～5則采用校正卡方檢驗(yàn)，當(dāng)理論頻數(shù)<1或樣本量<40則采用Fisher精確檢驗(yàn)；等級(jí)比較采用秩和檢驗(yàn)；采用單因素和多因素Cox回歸分析法分析胃癌腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)的影響因素；以術(shù)后實(shí)際復(fù)發(fā)情況為金標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算各影響因素預(yù)測(cè)術(shù)后復(fù)發(fā)的敏感度、特異性與準(zhǔn)確度，比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 胃癌組織與癌旁組織TRAF4和RSK4蛋白表達(dá)比較

胃癌組織中TRAF4蛋白陽性表達(dá)率高于癌旁組織（P<0.05），RSK4蛋白陽性表達(dá)率低于癌旁組織（P<0.05），見表2、圖1。

圖1 TRAF4和RSK4蛋白在胃癌和癌旁組織中的表達(dá) (IHC ×400,scale bar=40 μm)Figure 1 Expressions of TRAF4 and RSK4 protein in gastric cancer and paracancerous tissues(IHC ×400,scale bar=40 μm)

表2 胃癌組織與癌旁組織TRAF4和RSK4蛋白表達(dá)比較 (n(%))Table 2 Comparison of TRAF4 and RSK4 protein expression between gastric cancer tissues and adjacent tissues (n(%))

2.2 不同病理特征患者胃癌組織TRAF4和RSK4蛋白表達(dá)比較

低分化、TNM Ⅲ期、浸潤(rùn)深度T3～T4、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者胃癌組織TRAF4蛋白陽性表達(dá)率均分別高于中/高分化、TNMⅠ/Ⅱ期、浸潤(rùn)深度T1～T2、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者（P<0.05），而RSK4蛋白陽性表達(dá)率分別低于中/高分化、TNMⅠ/Ⅱ期、浸潤(rùn)深度T1～T2、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者（P<0.05），見表3。

表3 不同病理特征患者胃癌組織TRAF4和RSK4蛋白表達(dá)比較 (n(%))Table 3 Comparison of TRAF4 and RSK4 protein expression in gastric cancer tissues of patients with different pathological characteristics (n(%))

2.3 復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組胃癌組織一般資料比較

對(duì)176例行腹腔鏡根治術(shù)的胃癌患者進(jìn)行36個(gè)月的術(shù)后隨訪，隨訪率100%，其中有56例患者胃癌復(fù)發(fā)，120例患者未復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)率為31.82%（56/176）。復(fù)發(fā)組胃癌組織TRAF4蛋白陽性表達(dá)率高于未復(fù)發(fā)組（P<0.05），RSK4蛋白陽性表達(dá)率低于未復(fù)發(fā)組（P<0.05），復(fù)發(fā)組最大腫瘤直徑、分化程度、TNM分期、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、術(shù)后輔助化療、規(guī)律飲食、家族胃癌病史與未復(fù)發(fā)組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表4。

表4 復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組一般資料比較 (n(%))Table 4 Comparison of general data between recurrence group and non-recurrence group (n(%))

2.4 影響腹腔鏡胃癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的單因素Cox回歸分析

結(jié)果顯示最大腫瘤直徑>5 cm、低分化程度、TNM分期Ⅲ期、浸潤(rùn)深度T3～T4、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、術(shù)后未輔助化療、TRAF4蛋白陽性表達(dá)、家族胃癌病史均是腹腔鏡胃癌根治術(shù)后患者復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素（P<0.05），而RSK4蛋白陽性表達(dá)、規(guī)律飲食是保護(hù)因素（P<0.05），見表5。

表5 影響腹腔鏡胃癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的單因素Cox回歸分析Table 5 Cox regression analysis of single factor influencing recurrence after laparoscopic radical gastrectomy

2.5 影響腹腔鏡胃癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的多因素分析

以單因素Cox回歸分析中P<0.10的因素為自變量，進(jìn)行多因素Cox回歸分析，結(jié)果顯示最大腫瘤直徑>5 cm、低分化程度、TNM分期Ⅲ期、浸潤(rùn)深度T3～T4、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、術(shù)后未輔助化療、TRAF4蛋白陽性表達(dá)均是胃癌患者腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素（P<0.05），而RSK4蛋白陽性表達(dá)、規(guī)律飲食均是保護(hù)因素（P<0.05），見表6。

表6 影響腹腔鏡胃癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)的多因素Cox回歸分析Table 6 Cox regression analysis of multiple factors influencing recurrence after laparoscopic radical gastrectomy

2.6 TRAF4和RSK4蛋白表達(dá)對(duì)胃癌腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)作用

胃癌組織TRAF4和RSK4蛋白表達(dá)聯(lián)合預(yù)測(cè)胃癌腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)的準(zhǔn)確度高于各蛋白單獨(dú)預(yù)測(cè)（χ2=34.566、47.239,P<0.001），且高于最大腫瘤直徑>5 cm、低分化、TNMⅢ期、浸潤(rùn)深度T3～T4、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、術(shù)后未輔助化療、未規(guī)律飲食（χ2=18.810、4.380、15.286、17.902、6.588、10.570、20.682，P=0.000、0.036、0.000、0.000、0.010、0.001、0.000），而與TRAF4、RSK4蛋白表達(dá)聯(lián)合其他七項(xiàng)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=2.982,P=0.084），見表7。

表7 TRAF4和RSK4蛋白表達(dá)對(duì)胃癌腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)作用Table 7 Predictive effect of TRAF4 and RSK4 protein expression on recurrence of gastric cancer after laparoscopic radical surgery

3 討論

胃癌是臨床常見的消化道惡性腫瘤之一，近年來，我國(guó)胃癌發(fā)病率逐漸上升且呈年輕化趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅患者的身心健康[6]。腹腔鏡根治術(shù)是目前臨床治療胃癌較為廣泛的微創(chuàng)術(shù)式，但術(shù)后復(fù)發(fā)仍是不容忽視的問題[7]。本研究中，胃癌患者腹腔鏡根治術(shù)后3年的復(fù)發(fā)率為31.82%，稍低于趙車冬等[8]研究顯示的胃癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)率（術(shù)后隨訪3年，復(fù)發(fā)率41.67%），可能與所選樣本間的個(gè)體差異性、具體手術(shù)方式、術(shù)后干預(yù)措施等差異有關(guān)，但均表明胃癌根治術(shù)后有較高的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)，嚴(yán)重影響患者預(yù)后。因此，對(duì)影響胃癌腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)的因素進(jìn)行探索分析很重要。

本研究顯示，胃癌組織中TRAF4蛋白陽性表達(dá)率較癌旁組織高，RSK4蛋白陽性表達(dá)率較癌旁組織低，提示TRAF4、RSK4蛋白在胃癌組織中均異常表達(dá)，可能與胃癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。TRAF家族蛋白主要參與細(xì)胞的增殖、分化及凋亡的調(diào)控，在多種生命活動(dòng)中發(fā)揮重要的作用，其中TRAF4通過間接作用或形成復(fù)合體的方式在細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜和細(xì)胞核中遷移而發(fā)揮作用[9]。TRAF4與絲裂原活化蛋白激酶激酶4結(jié)合可激活c-Jun氨基酸末端激酶（JNK）途徑，而JNK途徑與腫瘤發(fā)生密切相關(guān)[10]。有研究表明[11]，結(jié)直腸癌組織中TRAF4蛋白陽性表達(dá)率顯著高于癌旁組織，與本研究結(jié)果相似。RSK4作為細(xì)胞內(nèi)重要的調(diào)控因子，可以調(diào)節(jié)細(xì)胞周期（G0/S期、G1/S期）細(xì)胞比例，對(duì)癌細(xì)胞的過度增殖具有抑制作用[12]。有研究顯示[13]RSK4蛋白在多種腫瘤細(xì)胞中如乳腺癌、結(jié)直腸癌等低表達(dá)，表明RSK4蛋白可能具有類似抑癌基因的作用。因而胃癌組織中RSK4蛋白陽性表達(dá)率較癌旁組織低，且RSK4蛋白陽性表達(dá)率下降會(huì)降低機(jī)體對(duì)腫瘤發(fā)生的調(diào)控作用，增加腫瘤發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。另本研究結(jié)果顯示，低分化、TNMⅢ期、浸潤(rùn)深度T3～T4、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者胃癌組織TRAF4蛋白陽性表達(dá)率較中/高分化、TNMⅠ/Ⅱ期、浸潤(rùn)深度T1～T2、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者高，而RSK4蛋白陽性表達(dá)率較中/高分化、TNMⅠ/Ⅱ期、浸潤(rùn)深度T1～T2、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者低，提示TRAF4和RSK4蛋白表達(dá)可能與胃癌患者分化程度、TNM分期、浸潤(rùn)深度以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況存在一定的關(guān)聯(lián)。TRAF4可通過調(diào)控PI3K/AKT/Oct4、Wnt/β-catenin等多條信號(hào)通路促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖、侵襲、遷移以及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化[14-15]。RSK4表達(dá)下降可促使其阻礙細(xì)胞蛋白合成的作用減弱，喪失保護(hù)腫瘤細(xì)胞分化調(diào)控作用，抑制腫瘤生長(zhǎng)的功能減退，導(dǎo)致腫瘤進(jìn)展，其過表達(dá)可能通過抑制PI3K/AKT信號(hào)通路而抑制腫瘤細(xì)胞遷移、侵襲與生長(zhǎng)[16]。

本研究結(jié)果還顯示，復(fù)發(fā)組胃癌組織TRAF4蛋白陽性表達(dá)率高于未復(fù)發(fā)組，RSK4蛋白陽性表達(dá)率低于未復(fù)發(fā)組，且多因素分析表明TRAF4蛋白陽性表達(dá)是胃癌患者腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素，RSK4蛋白陽性表達(dá)是其保護(hù)因素，提示胃癌組織TRAF4和RSK4蛋白表達(dá)情況與患者根治術(shù)后復(fù)發(fā)密切相關(guān)。TRAF4是一種定位于細(xì)胞核內(nèi)的重要信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白，已被證實(shí)參與了多種腫瘤細(xì)胞的發(fā)生發(fā)展過程。相關(guān)研究報(bào)道[17]顯示，TRAF4表達(dá)上調(diào)可以誘導(dǎo)G1/S-特異性周期蛋白-D1、調(diào)節(jié)基因、癌基因、聚ADP核糖聚合酶1等靶分子的表達(dá)，還具有激活Wnt/β-catenin信號(hào)通路促進(jìn)癌細(xì)胞生長(zhǎng)、遷移的作用。因此，TRAF4蛋白高表達(dá)可促進(jìn)腫瘤進(jìn)一步生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移，增加胃癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。RSK4是位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的一種核糖體修飾因子，可以通過對(duì)核糖體羧基末端進(jìn)行修飾而降低染色體DNA配對(duì)的錯(cuò)配風(fēng)險(xiǎn)，還可以提高錯(cuò)配修復(fù)因子半胱氨酸的活性[18]。另RSK4對(duì)癌細(xì)胞低分化具有重要的抑制作用，可降低癌細(xì)胞黏附血管內(nèi)皮或淋巴管內(nèi)皮的能力，抑制癌癥進(jìn)展[19]。有研究表明[20]，過表達(dá)RSK4能夠抑制乳腺癌細(xì)胞的侵襲與轉(zhuǎn)移。當(dāng)RSK4蛋白表達(dá)降低時(shí)，其抑制癌細(xì)胞低分化、侵襲與轉(zhuǎn)移等的能力減弱，則腫瘤進(jìn)展的風(fēng)險(xiǎn)增加，患者術(shù)后復(fù)發(fā)的概率升高。因此，RSK4蛋白陽性表達(dá)可以及時(shí)監(jiān)控腫瘤的發(fā)生，抑制癌細(xì)胞低分化，為胃癌患者腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)的保護(hù)因素。本研究結(jié)果顯示，TRAF4和RSK4蛋白表達(dá)聯(lián)合用于預(yù)測(cè)胃癌腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)中具有較高的準(zhǔn)確度，提示臨床可根據(jù)此兩種蛋白表達(dá)情況而對(duì)胃癌患者根治術(shù)后復(fù)發(fā)進(jìn)行評(píng)估，盡可能及早地給予針對(duì)性干預(yù)對(duì)策以減少術(shù)后復(fù)發(fā)。

此外，本研究結(jié)果顯示，最大腫瘤直徑>5 cm、低分化程度、TNMⅢ期、浸潤(rùn)深度T3～T4、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、術(shù)后未輔助化療亦均是胃癌患者腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素，而規(guī)律飲食是其保護(hù)因素。淋巴管壁較薄且管徑較細(xì)，常與靜脈或血管伴行，當(dāng)腫瘤直徑越大，侵犯周圍淋巴結(jié)的程度就越深，當(dāng)淋巴管壁被腫瘤細(xì)胞逐步浸潤(rùn)后，進(jìn)入淋巴管隨淋巴液被帶至淋巴結(jié)，并以此為中心長(zhǎng)出同樣腫瘤，最終引起腫瘤轉(zhuǎn)移至淋巴結(jié)[21]。有研究顯示[22]，術(shù)前出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤患者術(shù)后復(fù)發(fā)率超50%，與本研究結(jié)果一致，表明淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移可能在腫瘤復(fù)發(fā)中起重要作用，成為術(shù)后評(píng)估腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的重要預(yù)測(cè)指標(biāo)；與此同時(shí)，腫瘤直徑越大，浸潤(rùn)程度越深，就會(huì)越容易突破漿膜層對(duì)周圍組織或肝、腎器官產(chǎn)生侵犯，可能會(huì)導(dǎo)致腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移，引起局部復(fù)發(fā)[23]。分化程度越低，TNM分期越高，表示惡性程度越高，出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的可能性越大，術(shù)后復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)越高[24]。行根治性手術(shù)治療時(shí)，可能存在微小或潛在癌灶沒有發(fā)現(xiàn)而未能完全被清除，術(shù)后實(shí)施一定周期的輔助化療可殺滅癌細(xì)胞，控制腫瘤進(jìn)展，但若未進(jìn)行化療干預(yù)，殘留的病灶則可逐漸發(fā)展甚或轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致術(shù)后復(fù)發(fā)。有研究表明[25]，術(shù)后化療>3周期的患者相較于未化療或化療≤3周期的患者具有更低的術(shù)后復(fù)發(fā)率。另規(guī)律飲食可以保證機(jī)體營(yíng)養(yǎng)的正常供應(yīng)，提高患者免疫力，降低術(shù)后復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。

綜上所述，TRAF4蛋白在胃癌組織異常高表達(dá)，而RSK4蛋白則異常低表達(dá)，二者異常表達(dá)均與胃癌患者腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)密切相關(guān)，可對(duì)術(shù)后復(fù)發(fā)進(jìn)行較好地預(yù)測(cè)。最大腫瘤直徑>5 cm、低分化程度、TNMⅢ期、浸潤(rùn)深度T3～T4、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、術(shù)后化療情況、是否規(guī)律飲食等是胃癌腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)的影響因素，臨床中可據(jù)此加強(qiáng)對(duì)胃癌患者的監(jiān)督與管理，制定針對(duì)性干預(yù)方案，以促進(jìn)患者預(yù)后改善。本研究通過對(duì)胃癌組織中TRAF4和RSK4蛋白表達(dá)情況與患者腹腔鏡根治術(shù)后復(fù)發(fā)的關(guān)系分析，而為臨床術(shù)后及時(shí)制定合理的防控方案提供了指導(dǎo)依據(jù)，同時(shí)亦為胃癌的治療研究提供了一個(gè)新方向，但本研究納入復(fù)發(fā)的樣本量較小，且未對(duì)深層作用機(jī)制進(jìn)行探討，后續(xù)需擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步探索。