陳靜
(遼寧省綠色農(nóng)業(yè)技術(shù)中心,遼寧沈陽 110027)
二斑葉螨(Tetranychus urticaeKoch)屬于蛛形綱、蜱螨亞綱、真螨目、葉螨科,是一種世界性分布的重要農(nóng)業(yè)害螨,寄主植物有800 余種[1]。二斑葉螨自從20 世紀80 年代末開始在我國北方落葉果樹上發(fā)生以來,迅速蔓延,并因其食性雜、繁殖率高、抗性產(chǎn)生快等特點,給防治帶來極大的困難,已成為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的重要害螨[2-3]。近年來,隨著我國北方保護地蔬菜栽培面積的不斷擴大,蔬菜二斑葉螨的危害日趨嚴重。由于化學(xué)防治仍然是目前生產(chǎn)上二斑葉螨治理的主要手段,也導(dǎo)致二斑葉螨對有機磷類、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類等多種殺蟲、殺螨劑產(chǎn)生了嚴重的抗性和交互抗性[4-5]。為了篩選出毒性低、藥效好的殺螨劑,該研究測定了4 種生物殺蟲劑對二斑葉螨的室內(nèi)活性,以期為蔬菜生產(chǎn)上二斑葉螨防治藥劑的合理選擇提供參考依據(jù),為保證優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)蔬菜的安全生產(chǎn)提供理論基礎(chǔ)。
二斑葉螨采自沈陽新民市興隆鎮(zhèn)圖顏太村蔬菜種植基地的辣椒上;將采回的雌成螨經(jīng)分離鑒定后分別挑接在室內(nèi)種植的潔凈的盆栽菜豆(Dolichos lablabL.)苗上,自然爬行到葉片上,2~3 d 后挑取健壯的雌成螨進行室內(nèi)毒力測定。
1.8 %阿維菌素乳油(山東鄒平農(nóng)藥有限公司)、0.36%苦參堿水劑(北京三浦百草綠色植物制劑有限公司)、0.5%藜蘆堿懸浮劑(楊凌馥稷生物科技有限公司)、0.3%印楝素乳油(成都綠金生物科技有限公司)。
1.3.1 室內(nèi)毒力測定方法。參照FAO 推薦的玻片浸漬法[6],根據(jù)預(yù)試驗結(jié)果,采用蒸餾水1∶2 的比例,將所配制藥劑稀釋成多個系列濃度備用。將雙面膠剪成2 cm×2 cm 方塊,粘在載玻片一端,邊緣僅留2~3 mm 寬。用0 號毛筆挑出生長3~5 d 的健壯、生長均勻的雌成螨,將其后背輕輕貼在粘有雙面膠帶的玻片一端,不要粘到螨蟲的口器、觸須和足。每個玻片上附著20~30 頭雌成螨。將附著有雌成螨的載玻片放在大培養(yǎng)皿中并放一濕棉球,蓋上玻璃板,放置于25℃條件下,2 h 后鏡檢,觀察確定有無死亡或無活性個體,如發(fā)現(xiàn)有死亡或無活性個體,則將其去除,并補充健康活螨后再進行測定。將粘貼好健康雌成螨的玻片浸入上述4 種藥劑的稀釋液中,輕輕震蕩5 s,取出后放在濾紙上,隨即用小塊濾紙輕輕吸干螨體周圍及膠帶上的多余藥液。每個梯度重復(fù)處理3 次,以清水為對照。各濃度藥劑處理完后放入原來的大培養(yǎng)皿中,在室溫條件下,48 h 后在雙目實體顯微鏡下進行檢查,0 號毛筆輕輕觸碰害螨肢體,若螨足不動,則記為死亡,記錄死螨數(shù)和活螨數(shù)。有效試驗數(shù)據(jù)為對照組的死亡率低于10%。
1.3.2 統(tǒng)計分析方法及數(shù)據(jù)處理。計算死亡率,利用Abbort校正公式進行校對。利用DPS 軟件進行數(shù)據(jù)處理,求出毒力回歸方程、卡方值、P 值、LC50及其95%置信區(qū)間、相關(guān)系數(shù)。Abbort 公式如下:
1.8%阿維菌素乳油不同稀釋倍數(shù)的藥液處理二斑葉螨雌成螨后,48 h 的死亡率見表1。利用表1 所得的數(shù)據(jù)作出1.8%阿維菌素乳油對二斑葉螨雌成螨的毒力回歸直線(圖1)。
圖1 1.8%阿維菌素乳油對二斑葉螨雌成螨的劑量對數(shù)—機率值回歸直線
表1 1.8%阿維菌素乳油對二斑葉螨雌成螨的毒力測定結(jié)果
由表1 數(shù)據(jù)求得毒力回歸方程為y=1.889 3x+3.518 5,致死中濃度對數(shù)為0.784 2,LC50=6.083 7 mg/mL,LC95=45.161 4 mg/mL,求得的卡方值為1.622 2,小于顯著標準,所得的毒力回歸直線是符合實際的。求得LC50的置信區(qū)間為4.340 8~11.196 9 mg/mL,LC95的置信區(qū)間為20.300 5~221.572 1 mg/mL。
0.36%苦參減水劑不同稀釋倍數(shù)的藥液處理二斑葉螨雌成螨后,48 h 的死亡率見表2。利用表2 中所得的數(shù)據(jù)作出0.36%苦參減水劑對二斑葉螨雌成螨的毒力回歸直線(圖2)。
圖2 0.36%苦參堿水劑對二斑葉螨雌成螨的劑量對數(shù)—機率值回歸直線
表2 0.36%苦參堿水劑對二斑葉螨雌成螨的毒力測定結(jié)果
由表2 數(shù)據(jù)求得毒力回歸方程為y=2.525 4x+3.382 4,致死中濃度對數(shù)為0.640 5,LC50=4.370 5 mg/mL,LC95=19.582 5 mg/mL,求得的卡方值為0.055 9,小于顯著標準,所得的毒力回歸直線是符合實際的。求得LC50的置信區(qū)間為3.695 8~5.522 5 mg/mL,LC95的置信區(qū)間為12.418 2~46.190 6 mg/mL。
0.5%藜蘆堿懸浮劑不同稀釋倍數(shù)的藥液處理二斑葉螨雌成螨后,48 h 的死亡率見表3。利用表3 中所得的數(shù)據(jù)作出0.5%藜蘆堿懸浮劑對二斑葉螨雌成螨的毒力回歸直線(圖3)。
圖3 0.5%藜蘆堿懸浮劑對二斑葉螨雌成螨的劑量對數(shù)—機率值回歸直線
表3 0.5%藜蘆堿懸浮劑對二斑葉螨雌成螨的毒力測定結(jié)果
由表3數(shù)據(jù)求得毒力回歸方程為y=1.191 3x+3.070 5,致死中濃度對數(shù)為1.619 6,LC50=41.652 8 mg/mL,LC95=1 000.774 0 mg/mL,求得的卡方值為1.688 4,小于顯著標準,所得的毒力回歸直線是符合實際的。求得LC50的置信區(qū)間為28.764 7~122.436 4 mg/mL,LC95的置信區(qū)間為243.786 9~48 954.205 4 mg/mL。
0.3 %印楝素乳油不同稀釋倍數(shù)的藥液處理二斑葉螨雌成螨后,48 h 的死亡率見表4。利用表4 中所得的數(shù)據(jù),作出0.3%印楝素乳油對二斑葉螨雌成螨的毒力回歸直線(圖4)。
圖4 0.3%印楝素乳油對二斑葉螨雌成螨的劑量對數(shù)—機率值回歸直線
表4 0.3%印楝素乳油對二斑葉螨雌成螨的毒力測定結(jié)果
由表4 數(shù)據(jù)求得毒力回歸方程為y=0.096 00x+3.565 3,致死中濃度對數(shù)為1.494 6,LC50=31.228 7 mg/mL,LC95=1 614.460 2 mg/mL,求得的卡方值為0.070 3,小于顯著標準,所得的毒力回歸直線是符合實際的。求得LC50的置信區(qū)間為18.327 3~210.666 3 mg/mL,LC95的置信區(qū)間為227.953 1~917 93.83 mg/mL。
4 種生物殺蟲劑對二斑葉螨雌成螨的毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)、LC50、LC95及其95%置信區(qū)間見表5。由表5 可知,4 種殺蟲劑對二斑葉螨雌成螨均有不同程度的毒殺作用。其中,0.36% 苦參堿水劑的毒力最高,處理后48 h 的LC50值為4.370 5 mg/mL,其次是1.8%阿維菌素乳油,LC50值為6.083 7 mg/mL,而0.5%藜蘆堿懸浮劑和0.3%印楝素乳油的LC50值分別為41.652 8 mg/mL 和31.228 7 mg/mL。4 種藥劑對二斑葉螨雌成螨毒殺作用大小的順序為:0.36%苦參堿水劑>1.8%阿維菌素乳油>0.3%印楝素乳油>0.5%藜蘆堿懸浮劑。
表5 4 種藥劑對二斑葉螨雌成螨的室內(nèi)毒力測定
二斑葉螨是葉螨科中食性最廣的物種,其環(huán)境適應(yīng)性強,極易產(chǎn)生抗藥性,是目前公認的最難防治的有害生物之一。該試驗選取的4 種生物殺蟲劑中,0.36%苦參堿水劑對蔬菜二斑葉螨的效果最好,處理48 h 后的LC50值為4.370 5 mg/mL;1.8%阿維菌素乳油、0.5%藜蘆堿懸浮劑和0.3%印楝素乳油對二斑葉螨雌成螨也具有一定的毒殺效果,LC50值分別為6.083 7、41.652 8、31.228 7 mg/mL。
該試驗所用的4 種生物殺蟲劑中,1.8%阿維菌素乳油屬于抗生素類殺蟲劑,具有廣譜、低殘留等特點,并具有良好的速效性和持效性,是當(dāng)前最受歡迎的生物農(nóng)藥品種之一[7]??鄥A是一種新型的植物源殺蟲殺螨劑,其殺蟲機制以觸殺為主,胃毒為輔。已經(jīng)有試驗證明,該藥劑不但能有效防治成螨,且持續(xù)時間較長,對蟲卵也有一定的滅殺作用,同時又能保證環(huán)保無污染,有著很好的應(yīng)用前景[8]。該試驗結(jié)果也表明沈陽地區(qū)溫室內(nèi)二斑葉螨對其敏感性較高,可推薦在蔬菜生產(chǎn)上使用。藜蘆堿是生物堿的一類,是植物避免自身受損而貯藏的一種毒素,也是植物源殺螨劑的重要活性成分,藜蘆堿具有觸殺和胃毒作用[9]。印楝素是從楝科喬木中提取出的一類具有殺蟲活性的植物源殺蟲殺螨劑,對昆蟲主要有拒食、忌避、抑制生長發(fā)育、不育等作用?,F(xiàn)階段研究成果表明印楝素對人畜毒性低、殺蟲譜廣泛、無殘留,是目前研究最廣泛的一類植物源農(nóng)藥之一[10]。
在現(xiàn)代化農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中,雖然采用化學(xué)殺蟲劑會導(dǎo)致害蟲耐藥性的產(chǎn)生、殺蟲劑殘留、環(huán)境污染等諸多問題,但是由于化學(xué)殺蟲劑制作成本低、使用簡易便捷、見效快等優(yōu)勢,化學(xué)防治一直都是防治害蟲的主要手段之一[11]。該研究從農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展觀點出發(fā),選取了4 種生物殺蟲劑對蔬菜二斑葉螨進行室內(nèi)毒力測定。結(jié)果表明,不同藥劑對二斑葉螨都具有一定的選擇性,其中0.36%苦參堿水劑對二斑葉螨的毒殺效果最佳。研究結(jié)果可為該地區(qū)蔬菜二斑葉螨的生物防治提供參考依據(jù)。