曹 原

開封市疾病預(yù)防控制中心學(xué)校衛(wèi)生科 (河南 開封 475002)

沙門氏菌是臨床上較為常見的食源性致病菌，其對(duì)外界的適應(yīng)能力相對(duì)較強(qiáng)，可在人與動(dòng)物的腸道中寄生，伴有惡心、嘔吐等臨床癥狀，同時(shí)，疾病進(jìn)一步發(fā)展后可致休克等并發(fā)癥發(fā)生，嚴(yán)重時(shí)可危及生命安全，因此還需及時(shí)明確疾病，并采取治療干預(yù)[1-3]。傳統(tǒng)檢驗(yàn)方式具有操作簡(jiǎn)單等優(yōu)勢(shì)，但檢驗(yàn)準(zhǔn)確性較低，研究認(rèn)為，血清學(xué)鑒定與全面生化反應(yīng)均能提高對(duì)疾病的檢出準(zhǔn)確性，聯(lián)合檢測(cè)下更有利于臨床在疾病早期明確病情，采取更合理的治療措施，應(yīng)用價(jià)值更高[4]。對(duì)此，本文主要分析了沙門氏菌檢驗(yàn)過(guò)程中采取血清學(xué)鑒定與全面生化反應(yīng)的應(yīng)用價(jià)值，以期為臨床沙門氏菌檢驗(yàn)提供更為可靠的研究依據(jù)，詳見下文所示。

1 資料和方法

1.1 一般資料將開封某醫(yī)院近兩年(2021.1～2022.12)收治的沙門氏菌感染者30例作為本次觀察對(duì)象，在經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定后確定病型，另將同一時(shí)期接收的健康志愿者30例作為對(duì)照組觀察對(duì)象，其中觀察組男性17例，女性13例，年齡區(qū)間為23～73歲，平均51.03±3.54歲；對(duì)照組男性14例，女性16例，年齡區(qū)間為21-76歲，平均51.05±3.56歲；兩組觀察對(duì)象年齡等資料對(duì)比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：觀察組患者經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定后確定為沙門氏菌感染，出現(xiàn)嚴(yán)重程度不同的水樣腹瀉、惡心嘔吐等癥狀；患者均已知情本次研究中相關(guān)內(nèi)容且自愿加入；臨床資料完整，無(wú)其他致病菌與微生物感染；所有研究對(duì)象的血清和生化檢測(cè)標(biāo)本均送檢我中心化驗(yàn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：對(duì)照組內(nèi)合并致病菌與微生物感染；嚴(yán)重認(rèn)知障礙、精神障礙無(wú)法配合研究開展者；臨床資料不完整或研究配合依從性較差者。

1.2 方法檢測(cè)儀器：填平。滅菌平皿、溫箱、顯微鏡、均質(zhì)器、由HE瓊脂和亞硫酸鉍瓊脂等瓊脂制備成的培養(yǎng)基、由鎂C12孔雀綠增菌液和四硫酸鈉增菌液等增菌液制備成的試劑、接種棒、酒精燈、玻璃棒、鎳絡(luò)絲等。

血清學(xué)鑒定：收取患者清晨空腹?fàn)顟B(tài)下血液4mL，以每分鐘3000轉(zhuǎn)的速度離心10min后分離血清，先以A～F多價(jià)O血清凝 集，并定群血清因子(即定群6個(gè)O群因子血清)，再給予H因子血清相凝集，使第一相和第二相凝集，并將凝集結(jié)果作為判定血清型的標(biāo)準(zhǔn)。

全面生化反應(yīng)：根據(jù)患者的病情選擇尿液、嘔吐物、糞便等作為檢測(cè)標(biāo)本，應(yīng)將可疑群落先挑出來(lái)，接種到三糖鐵瓊脂中，并觀察瓊脂中發(fā)生的反應(yīng)。若瓊脂出現(xiàn)斜面產(chǎn)酸，且同時(shí)存在硫化氫陰性菌株，則將其排除。需要注意的是，接種到三糖鐵瓊脂中時(shí)，應(yīng)選取蛋白陳水，并將其接種到尿素瓊脂上，輔以拉氨酸脫羧酶等物質(zhì)進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，使周圍溫度在35℃～37℃之間，給予至少24小時(shí)的培養(yǎng)。

1.3 觀察指標(biāo)比較分析在不同檢驗(yàn)方式下的準(zhǔn)確性(靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值)：靈敏度=真陽(yáng)性例數(shù)/(真陽(yáng)性例數(shù)+假陰性例數(shù))×100%，特異度=真陰性例數(shù)/(假陽(yáng)性例數(shù)+真陰性例數(shù))×100%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值=真陽(yáng)性/(真陽(yáng)性+假陽(yáng)性)×100%，陰性預(yù)測(cè)值 -真陰性/ (真陰性+假陰性)×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法SPSS 25.0處理數(shù)據(jù)，計(jì)量數(shù)據(jù)均符合正態(tài)分布以(±s)表示，采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較，計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)以[例(%)]表示，行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 分析不同檢驗(yàn)方式下的檢驗(yàn)結(jié)果以酶聯(lián)免疫吸附作為金標(biāo)準(zhǔn)，分析檢驗(yàn)結(jié)果，研究結(jié)果表明，血清學(xué)鑒定檢出真陽(yáng)性27例，假陽(yáng)性5例，真陰性25例，假陰性3例；全面生化反應(yīng)檢出真陽(yáng)性23例，假陽(yáng)性7例，真陰性23例，假陰性7例；血清學(xué)+全面生化反應(yīng)檢出真陽(yáng)性30例，假陽(yáng)性1例，真陰性29例，假陰性0例；如表1所示。

表1 不同檢驗(yàn)方式下的檢驗(yàn)結(jié)果

2.2 分析不同檢驗(yàn)方式下的靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值血清學(xué)鑒定準(zhǔn)確性(靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值)更高于全面生化反應(yīng)，但兩種聯(lián)合檢驗(yàn)方式更高于單項(xiàng)檢驗(yàn)，對(duì)比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，詳見表2所示。

表2 不同檢驗(yàn)方式下的靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值對(duì)比分析[n(%)]

3 討 論

沙門氏菌是一種食源性致病菌，有較多類別，而各種類別的沙門氏菌均可引起人類、家畜、野生發(fā)生疾病，是目前我國(guó)常見的細(xì)菌性食物中毒原因之一[5]。正常情況下，沙門氏菌在水中不易被繁殖，但在冰箱等的環(huán)境下可生存長(zhǎng)達(dá)3個(gè)月之久，在正常環(huán)境中可生存1-2個(gè)月，超過(guò)20℃的環(huán)境下則能快速繁殖，導(dǎo)致疾病發(fā)生[6]。沙門氏菌在臨床中既往鑒定方式主要包括生理生化特征、抗原特征等[7]。常規(guī)檢驗(yàn)時(shí)能通過(guò)測(cè)定超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶含量等的方式判斷患者是否出現(xiàn)沙門氏菌感染，然而，常規(guī)檢驗(yàn)雖然能夠檢測(cè)出一定比例的沙射門時(shí)駿，但會(huì)受到多種外界因素的影響，因此導(dǎo)致準(zhǔn)確性較低[8]。

生化反應(yīng)主要在內(nèi)環(huán)境中發(fā)生，由酶催化，酶和反應(yīng)物溶于水中發(fā)生反應(yīng)，為體內(nèi)物質(zhì)提供載體與介質(zhì)，發(fā)生生物化學(xué)反應(yīng)，以達(dá)到檢測(cè)的目的，是識(shí)別細(xì)菌的常見方式[9]。但在檢測(cè)過(guò)程中，全面生化反應(yīng)可受到外界因素影響，且需要培養(yǎng)的時(shí)間較長(zhǎng)，有一定的局限性[10]。血清學(xué)鑒定是指利用血清與分離的方式在培養(yǎng)皿中培養(yǎng)出純種細(xì)菌進(jìn)行血清檢驗(yàn)，以確定患者病原菌種類型[11]。具有高效、省時(shí)、靈敏度高、特異度高等優(yōu)勢(shì)，能夠在大量樣品檢測(cè)中應(yīng)用，提高對(duì)疾病的診斷準(zhǔn)確率。但在檢測(cè)過(guò)程中可能出現(xiàn)假陽(yáng)性，對(duì)檢測(cè)的靈敏度罩層不良影響，另外，制備血清的時(shí)間較長(zhǎng)，且該種方式也只能檢測(cè)一種病毒[12]。

本文主要分析了沙門氏菌檢驗(yàn)過(guò)程中采取血清學(xué)鑒定與全面生化反應(yīng)的應(yīng)用價(jià)值，研究表明，血清學(xué)鑒定準(zhǔn)確性(靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值)更高于全面生化反應(yīng)，但兩種聯(lián)合檢驗(yàn)方式更高于單項(xiàng)檢驗(yàn)，由該項(xiàng)研究數(shù)據(jù)可見，血清學(xué)檢驗(yàn)在沙門氏菌的診斷中價(jià)值更高，而聯(lián)合血清學(xué)鑒定與全面生化反應(yīng)則能明顯提高對(duì)沙門氏菌的檢出率，較單項(xiàng)檢測(cè)應(yīng)用價(jià)值更高。這是由于沙門氏菌雖然屬于兼性厭氧菌，但沙門氏菌能夠在有氧或者缺氧的狀態(tài)下生存，并釋放出大量毒素，引起外膜蛋白、過(guò)氧化氫酶與超氧化物歧化酶等的表達(dá)，尤其是在缺氧狀態(tài)下，其對(duì)人體造成的損害更大[13]。全面生化反應(yīng)主要是通過(guò)培養(yǎng)可疑的菌落、觀察液面顏色確定是否存在沙門氏菌感染，而血清學(xué)則通過(guò)凝集的方式收集可疑菌落與抗體，并觀察顆粒沉淀，以此作為沙門氏菌的檢驗(yàn)方案，兩種檢驗(yàn)方式均具有操作簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)性高等優(yōu)勢(shì)，但血清學(xué)鑒定所需時(shí)間較短，且能夠受到的影響因素較少，因此，其靈敏度相對(duì)更高于全面生化反應(yīng)[14]。在聯(lián)合檢測(cè)下則能使兩種檢查方式優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，減少外界因素帶來(lái)的干擾，同時(shí)還能明顯提高疾病檢驗(yàn)的診斷準(zhǔn)確性，能夠?yàn)榕R床疾病診斷提供更可靠的檢測(cè)依據(jù)[15-16]。

綜上所述，在沙門氏菌檢驗(yàn)過(guò)程中，血清學(xué)檢驗(yàn)的診斷價(jià)值略高于全面生化反應(yīng)，而聯(lián)合檢驗(yàn)則更有利于提高疾病診斷的靈敏度與特異度，對(duì)此，臨床應(yīng)根據(jù)患者實(shí)際情況選擇更合理的檢驗(yàn)方案。