黃澤鋒 廖雅晴 王曉云 張惠光 蔡斌雍凡 崔鵬 余文華* 吳毅*

（1 廣州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，華南生物多樣性保護(hù)與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州 510006）（2 武夷山國家公園科研監(jiān)測(cè)中心，南平 353000）（3 生態(tài)環(huán)境部南京環(huán)境科學(xué)研究所，國家環(huán)境保護(hù)武夷山生態(tài)環(huán)境科學(xué)觀測(cè)研究站，國家環(huán)境保護(hù)生物多樣性與生物安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，南京 210042）

福建省位于中國東南沿海，屬中亞熱帶氣候，其優(yōu)越的自然環(huán)境為野生動(dòng)物的生存繁衍創(chuàng)造了良好條件 (丁暉等，2015)。其中，武夷山國家公園更具有“世界模式標(biāo)本產(chǎn)地”的美譽(yù)，生物多樣性資源豐富 (肖敬禹等，2021)。管鼻蝠屬 (Muri‐na) 類群為一類鼻孔呈管狀的樹棲型蝙蝠，常棲息于人類活動(dòng)較少且植被較好的森林內(nèi)，捕捉相對(duì)困難，生物學(xué)基礎(chǔ)資料匱乏 (Wilson and Mittermei‐er, 2019; Yuet al., 2020)。據(jù)文獻(xiàn)資料顯示，目前福建省記錄的翼手目種類有45 種，其中管鼻蝠有3 種，分別是中管鼻蝠 (Murina huttoni)、白腹管鼻蝠 (M. leucogaster) 和毛翼蝠 (Harpiocephalus harpia) (周冬良，1997；陳友鈴等，2009；劉少英等，2022)。本課題組于2020 年6 月及2022 年5 月利用蝙蝠豎琴網(wǎng)在武夷山國家公園捕獲8 只蝙蝠，通過形態(tài)學(xué)和分子系統(tǒng)學(xué)進(jìn)行物種鑒定，其中2 只為菲氏管鼻蝠 (GZHUfj 22011、GZHU 22233)，6 只為艾氏管鼻蝠 (GZHUfj 22004、GZHU 20042、GZHU 22201、 GZHU 22234、 GZHU 22235、GZHU 22236)，2 種管鼻蝠均為福建省翼手目分布新紀(jì)錄。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 研究方法

1.1 標(biāo)本采集

本研究于2020 年6 月及2022 年5 月在福建省武夷山國家公園開展翼手類資源本底調(diào)查，使用豎琴網(wǎng)在武夷山市X808 縣道燕子巢茶園道 (北緯27°40′17.46″，東經(jīng)117°55′43.34″，海拔254 m)、建陽區(qū)黃坑鎮(zhèn)坳頭村王壩溪林道 (北緯27°40′4.58″，東經(jīng)117°37′31.29″，海拔626 m)、光澤縣寨里鎮(zhèn)景區(qū)西門林道 (北緯27°39′53.00″，東經(jīng)117°27′19.89″，海拔327 m) 共捕獲8 只管鼻蝠。上述標(biāo)本經(jīng)過外形指標(biāo)測(cè)量后，使用75%乙醇浸泡，現(xiàn)保存于廣州大學(xué)華南生物多樣性保護(hù)與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。

1.2 標(biāo)本測(cè)量

使用電子天平 (JY-200，廣州艾瑞貿(mào)易有限公司，精確到0.1 g) 稱量標(biāo)本體重 (body weight,Wt)。參照哺乳動(dòng)物測(cè)量標(biāo)準(zhǔn) (楊奇森等，2007)，使用數(shù)顯游標(biāo)卡尺 (MNT-150，上海美耐特實(shí)業(yè)有限公司，測(cè)量精度為0.01 mm) 測(cè)量標(biāo)本外形 (精確到0.1 mm) 和頭骨 (精確到0.01 mm)。參照鐘韋凌等 (2021) 對(duì)管鼻蝠外形及頭骨指標(biāo)的選擇，測(cè)量菲氏管鼻蝠和艾氏管鼻蝠的7 項(xiàng)外形指標(biāo)和10項(xiàng)頭骨指標(biāo)。

1.3 DNA提取與擴(kuò)增

使用DNA 試劑盒 (DNU333-03，邁寶生物科技) 提取總DNA，參照張欣等 (2021) 對(duì)管鼻蝠COI和Rag2基因的PCR 擴(kuò)增引物及程序，擴(kuò)增菲氏管鼻蝠和艾氏管鼻蝠的COI和Rag2基因，擴(kuò)增成功的PCR 產(chǎn)物送上海生工生物工程公司進(jìn)行測(cè)序。

1.4 構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹

利用GENEIOUS v9.1.8 軟件 (Kearseet al.,2012) 對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行人工拼接與校對(duì)，從NCBInt 數(shù)據(jù)庫中下載部分管鼻蝠亞科的COI和Rag2基因序列 (表1)，同時(shí)使用云南省報(bào)道的菲氏管鼻蝠與艾氏管鼻蝠的基因序列 (張欣等，2021) 進(jìn)行排序比對(duì)。將毛翼蝠設(shè)置為外群，使用IQ-TREE v1.6.1 (Nguyeet al., 2015)，采用最大似然法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。根據(jù)貝葉斯信息準(zhǔn)則，COI和Rag2序列矩陣核苷酸最適替換模型分別為TPM2+Γ+I+G4 和HKY+Γ+I，自展1 000 次估算節(jié)點(diǎn)支持度。

表1 基于線粒體COI基因構(gòu)建的最大似然樹的序列信息Table 1 Sequence information of the maximum likelihood tree based on sequences COI

2 結(jié)果

2.1 外形與頭骨特征

2.1.1 菲氏管鼻蝠

GZHUfj 22011 和GZHU 22233 標(biāo)本前臂長分別為28.62 mm 和31.33 mm (表2)，鼻孔管狀突起，耳廓平鈍無缺刻，內(nèi)部有點(diǎn)狀結(jié)構(gòu)突起，耳屏尖長 (圖1A)。背毛灰黑色，背毛基部黑色、中部灰色、毛尖灰褐色 (圖1B)；腹毛呈灰白色，腹毛基部黑色或深灰色、毛尖銀白色，胸毛毛尖白灰淺褐色 (圖1C)。

圖1 武夷山國家公園兩種管鼻蝠的外部形態(tài)特征及頭骨特征. A ～ G：菲氏管鼻蝠 (GZHU 22233)；H ～ N：艾氏管鼻蝠 (GZHU 22236)；A、H：頭部側(cè)面觀；B、I：背毛；C、J：腹毛；D、K：頭骨正面觀；E、L：頭骨腹面觀；F、M：頭骨與下頜骨側(cè)面觀；G、N：下頜骨正面觀Fig.1 External and craniodental characteristics of two Murina species from Wuyishan National Park. A - G: Murina feae (GZHU 22233); H - N:Murina eleryi (GZHU 22236); A, H: Lateral view of head; B, I: Dorsal fur; C, J: Ventral fur; D, K: Frontal view of skulll; E, L: Ventral view of skull;F, M: Lateral view of skull and mandible; G, N: Frontal view of mandible

表2 菲氏管鼻蝠和艾氏管鼻蝠外形及頭骨測(cè)量數(shù)據(jù) (單位：g, mm)Table 2 External and skull measurements of Murina feae and Murina eleryi (Unit: g, mm)

GZHUfj 22011 和GZHU 22233 顱全長分別為15.11 mm 和15.23 mm (表2)，頭顱稍膨大，吻突不膨脹，吻側(cè)相對(duì)狹窄，頭顱中部比前部稍高，眶間中部有一明顯凹陷，矢狀嵴和人字嵴不顯著，顴弓相對(duì)發(fā)達(dá) (圖1D)。齒式為2.1.2.3/3.1.2.3 =34 (圖1E，G)。上頜門齒 (I2、I3) 緊密連接且等高；上犬齒 (C1) 略高或等高于第二上前臼齒 (P4)，但C1的基部面積小于P4基部面積；第一上前臼齒 (P2)矮小，其高度和基部面積約為P4的1/2；3 枚上臼齒 (M1、M2和M3) 均具明顯而小的中附尖 (圖1E，F(xiàn))。下犬齒 (C1) 略高于第二下前臼齒 (P4)，其基部面積等于或大于P4；第一下前臼齒 (P2) 高度約為P4的2/3，其基部面積不到P4的1/2；下臼齒均具有小且明顯的下內(nèi)尖 (圖1G)。上述外形及頭骨特征符合菲氏管鼻蝠的鑒定特征。

2.1.2 艾氏管鼻蝠

該批標(biāo)本前臂長為 (28.90 ± 0.68) mm (n＝ 6)(表2)，鼻孔管狀突起，耳廓鈍圓，耳屏尖長 (圖1H)。背毛呈棕色，毛基灰黑色，毛中到毛尖從灰黃色逐漸加深到橙棕色，頭部、頸背部分毛尖帶有金屬光澤 (圖1H，I)；腹毛灰白色，毛基灰黑色，毛尖灰白色，上胸部和腹部兩側(cè)毛淺橘棕色(圖1J)。

顱全長為 (14.92 ± 0.32) mm (n＝ 6) (表2)，腦顱前部及中部膨大，眶間中部有一明顯凹陷，矢狀嵴缺失，人字嵴不發(fā)達(dá)，顴弓纖細(xì)不發(fā)達(dá) (圖1K)。齒式為2.1.2.3/3.1.2.3 = 34 (圖1L，N)。上犬齒 (C1) 明顯大于第二上前臼齒 (P4) 高度；第一上前臼齒 (P2) 矮小，其齒冠是P4的1/2，基部面積不到P4的1/2；上臼齒 (M1、M2) 具發(fā)達(dá)中附尖 (圖1L，M)。下犬齒 (C1) 高于第二下前臼齒 (P4)，其基部面積等于或稍大于P4；第一下前臼齒 (P2) 較小，其齒冠面積約為P4的1/2，高度約為P4的2/3(圖1M，N)。上述外形及頭骨特征符合艾氏管鼻蝠的鑒定特征。

2.2 分子鑒定

基于Rag2基因序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹顯示，GZHU 20042、 GZHU 22201、 GZHU 22234、GZHU 22235、GZHU 22236、GZHUfj 22004 與貴州及云南記錄的艾氏管鼻蝠序列聚為高支持度的一支 (支持度99；圖2A)；GZHU 22233、GZHUfj 22011 與老撾及中國云南記錄的菲氏管鼻蝠序列聚為高支持度的一支 (支持度97；圖2A)?；贑OI序列構(gòu)建的ML 樹顯示本研究的6 號(hào)艾氏管鼻蝠序列與老撾、越南及中國廣西和云南記錄的艾氏管鼻蝠序列聚為高支持度的一支 (支持度100；圖2B)，2 號(hào)菲氏管鼻蝠序列與老撾、泰國及中國江西和云南記錄的菲氏管鼻蝠序列聚為高支持度的一支 (支持度100；圖2B)。

圖2 基于Rag2序列 (A) 和COI序列 (B) 構(gòu)建的管鼻蝠亞科系統(tǒng)發(fā)生樹. 僅展示自展支持率大于85的支持度，加粗序列為本研究標(biāo)本Fig. 2 Maximum likelihood phylogenetic trees based on partial gene segments of Rag2 (A) and COI (B) of Murina. Values of branches indicate bootstrap values (BS). Only BS ＞ 85 are illustrated. Bold sequences are from the specimens for this study

3 討論

菲氏管鼻蝠由Thomas (1891) 在緬甸發(fā)現(xiàn)并描述為新種，F(xiàn)rancis 和Eger (2012) 通過對(duì)老撾管鼻蝠標(biāo)本的物種厘定，認(rèn)為Murina feae和M. cinera‐cea為同物異名。在越南、老撾、中國等區(qū)域都有菲氏管鼻蝠的分布報(bào)道 (Francis and Eger, 2012;Nguyenet al., 2015; Wilson and Mittermeier, 2019)，其國內(nèi)分布地有廣西、貴州、廣東、江西和云南(吳夢(mèng)柳等，2017；張欣等，2021；魏輔文等，2022)。而艾氏管鼻蝠是Furey 等 (2009) 在越南北干省發(fā)現(xiàn)并命名的新種，在老撾、越南及中國的廣西、貴州、湖南、廣東、海南和云南均有記錄(Eger and Lim, 2011；魏輔文等，2022)。艾氏管鼻蝠與金毛管鼻蝠 (M. chrysochaetes) 和金管鼻蝠(M. aurata) 毛色及形態(tài)相近，在物種識(shí)別時(shí)容易出現(xiàn)誤判的情況。徐忠鮮等 (2014) 通過系統(tǒng)發(fā)育學(xué)的方法對(duì)艾氏管鼻蝠的種群遺傳結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)BOLD數(shù)據(jù)庫中18個(gè)金管鼻蝠以及NCBI數(shù)據(jù)庫中部分金管鼻蝠的COI序列存在物種鑒定的錯(cuò)誤，故相關(guān)序列后續(xù)分析中須謹(jǐn)慎使用。對(duì)比上述3種管鼻蝠的特征可知，金毛管鼻蝠背毛的金黃色毛尖多于艾氏管鼻蝠和金管鼻蝠，其背毛和腹毛毛基顏色更深，為黑色。艾氏管鼻蝠上犬齒高于第二上前臼齒，而金管鼻蝠的上犬齒等高或矮于第二上前臼齒 (Maeda, 1980；鐘韋凌等，2021)?；谏鲜鲂螒B(tài)學(xué)特征可進(jìn)行初步的物種鑒定，但準(zhǔn)確的鑒定仍需借助分子生物學(xué)方法。

福建武夷山國家公園屬于森林生態(tài)系統(tǒng)類型，生物多樣性豐富 (任婕等，2015)。本次新紀(jì)錄使得福建省記錄的管鼻蝠種類由3 種增加到5 種，在該類群區(qū)分上：毛翼蝠體型較大，前臂長44.0 ～54.9 mm，后肢、翼膜與尾膜均覆蓋棕色絨毛，牙齒均粗壯短鈍，可明顯區(qū)分。在其余4 種管鼻蝠中，白腹管鼻蝠體型最大，前臂長37 ～ 47 mm，腹毛白色，背毛紅棕色；中管鼻蝠體型次之，中等體型，前臂長32 ～ 36 mm，其腹毛灰白色，背毛灰棕色，背毛毛基深灰色，毛中部到毛尖顏色由黃棕色過渡到棕褐色；而本研究發(fā)現(xiàn)的菲氏管鼻蝠和艾氏管鼻蝠均體型較小，但菲氏管鼻蝠背毛呈灰黑色，背毛毛基黑色、中部灰色、毛尖灰褐色；艾氏管鼻蝠背毛呈棕色，背毛毛基灰黑色，毛中部到毛尖從灰黃色逐漸加深到橙棕色，頭部、頸背部分毛尖帶有金屬光澤 (周全等，2011；岳陽等，2019; Wilson and Mittermeier, 2019；劉少英等，2022)。因此，除了分子系統(tǒng)學(xué)證據(jù)外，亦可根據(jù)體型大小及毛色等特征對(duì)福建省現(xiàn)記錄的5種管鼻蝠予以分辨。

武夷山國家公園部分區(qū)域是對(duì)外開放的景區(qū)，且公園內(nèi)尚保留有茶園及村落，人類活動(dòng)相對(duì)頻繁，會(huì)對(duì)翼手目等野生動(dòng)物的棲息造成影響。建議相關(guān)部門加大宣傳和科普力度，讓游客對(duì)野生動(dòng)物的生態(tài)價(jià)值有深刻的認(rèn)知，同時(shí)要保護(hù)好當(dāng)?shù)氐纳鷳B(tài)環(huán)境，嚴(yán)禁非法捕捉、偷獵野生動(dòng)物等行為。

致謝：廣州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院謝慧嫻和梁曉玲、海峽書局出版社曲利明、武夷山國家公園詹麗英和劉達(dá)友等對(duì)本研究提供幫助，在此表示誠摯的謝意。