王曉玉，李二潤(rùn)，譚頭云，楊水苗

(浙江永農(nóng)生物科學(xué)有限公司，浙江 紹興 312000)

噻蟲嗪(thiamethoxam)是一種高效、低毒的第2代煙堿類殺蟲劑，具有胃毒、觸殺和內(nèi)吸活性，常用于種子處理及葉片噴霧[1-2]，其對(duì)蚜蟲、飛虱、葉蟬、薊馬、白粉虱以及馬鈴薯甲蟲的防治效果較好，且穩(wěn)定性好，持效期長(zhǎng)[3]。氟蟲腈(fipronil)是一種高效、廣譜的新型苯基吡唑類殺蟲劑，對(duì)蚜蟲、飛虱具有較好的殺蟲活性，可用于棉花、玉米、水稻、蔬菜及果樹等多種作物的害蟲防治[4-5]。目前，關(guān)于噻蟲嗪、氟蟲腈單劑或與其他藥劑復(fù)配的液相分析方法已有報(bào)道，但2 者復(fù)配制劑產(chǎn)品分析方法未見報(bào)道?；诖?，本文采用高效液相色譜儀實(shí)現(xiàn)了37.5%噻蟲嗪·氟蟲腈懸浮劑中有效成分的分離與測(cè)定，且具有方便、快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

美國(guó)Agilent 1260型高效液相色譜儀配DAD檢測(cè)器、自動(dòng)進(jìn)樣器及Agilent 1260色譜工作站；KH7200DE型超聲波清洗器(昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司)；SQP型電子天平(賽多利斯公司)。

乙腈(色譜純，美國(guó)阿斯頓技術(shù)有限公司)；純凈水(娃哈哈水)；噻蟲嗪標(biāo)準(zhǔn)品、氟蟲腈標(biāo)準(zhǔn)品(≥98.0%，沈陽(yáng)國(guó)家農(nóng)藥質(zhì)量檢測(cè)中心)；37.5%噻蟲嗪·氟蟲腈懸浮劑(其中噻蟲嗪17.5%、氟蟲腈20.0%，永農(nóng)生物科學(xué)有限公司)。

1.2 色譜操作條件

Eclipse Plus-C18不銹鋼柱色譜柱為250 mm×4.6 mm，粒徑5μm；流動(dòng)相：乙腈∶水＝70∶30(體積比)；檢測(cè)波長(zhǎng)：280 nm；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣體積：5μL；柱溫：35 ℃。保留時(shí)間：噻蟲嗪約為3.1 min，氟蟲腈約為7.7 min。

上述色譜操作條件系典型操作條件，檢測(cè)時(shí)可根據(jù)儀器特點(diǎn)的不同，對(duì)方法中給定的操作參數(shù)做適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，以獲得最佳效果。典型的標(biāo)樣和試樣液相色譜圖見圖1。

圖1 37.5%噻蟲嗪·氟蟲腈懸浮劑標(biāo)準(zhǔn)品及樣品的高效液相色譜圖

1.3 溶液配制

1.3.1 標(biāo)樣溶液的配制

稱取噻蟲嗪標(biāo)準(zhǔn)品0.035 g、氟蟲腈標(biāo)準(zhǔn)品0.04 g(精確至0.000 1 g)，置于100 mL容量瓶中，用流動(dòng)相溶解并定容，超聲振蕩5 min使樣品充分溶解，冷卻至刻度，搖勻。

1.3.2 試樣溶液的配制

準(zhǔn)確稱取試樣0.2 g(精確至0.000 1 g)，置于100 mL容量瓶中，用流動(dòng)相溶解并定容，超聲波振蕩5 min使樣品充分溶解，冷卻至刻度，搖勻，過0.45μm有機(jī)系濾膜，備用。

1.4 測(cè)定

在上述色譜操作條件下，待儀器運(yùn)行基線穩(wěn)定后，先注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至噻蟲嗪(氟蟲腈)連續(xù)2針進(jìn)樣的峰面積相對(duì)偏差不大于1%時(shí)，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液順序進(jìn)樣。

2次平行測(cè)定結(jié)果之差，噻蟲嗪、氟蟲腈分別應(yīng)不大于0.5%，取其算術(shù)平均值，作為測(cè)定結(jié)果。

1.5 計(jì)算

將2針試樣溶液及試樣溶液前后2針標(biāo)樣溶液噻蟲嗪和氟蟲腈的峰面積分別進(jìn)行平均，試樣中噻蟲嗪(氟蟲腈)質(zhì)量分?jǐn)?shù)X1按下式計(jì)算：

式中：A1為標(biāo)樣溶液中，噻蟲嗪或氟蟲腈峰面積的平均值；A2為試樣溶液中，噻蟲嗪或氟蟲腈峰面積的平均值；m1為噻蟲嗪或氟蟲腈標(biāo)樣的質(zhì)量(g)；m2為試樣的質(zhì)量(g)；P為標(biāo)樣中噻蟲嗪或氟蟲腈的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(%)。

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

通過Agilent 1260高效液相色譜儀DAD檢測(cè)器的光譜數(shù)據(jù)采集功能，于190～400 nm的波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，見圖2?？梢?，在280 nm處，噻蟲嗪或氟蟲腈的峰面積和峰高的差距最小，且無明顯雜質(zhì)和助劑干擾。

圖2 噻蟲嗪和氟蟲腈的DAD掃描圖

2.2 流動(dòng)相的選擇

試驗(yàn)選擇Eclipse Plus-C18色譜柱，選用不同比例的乙腈+水、甲醇+水、甲醇+乙腈+水作為流動(dòng)相進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)以乙腈∶水=70∶30(體積比)作為流動(dòng)相、流速1.0 mL/min時(shí)，出峰時(shí)間短，分離效果好，峰形尖銳，且無其他雜質(zhì)的干擾。

2.3 分析方法的線性關(guān)系曲線

分別配制5個(gè)不同質(zhì)量濃度的噻蟲嗪(或氟蟲腈)標(biāo)準(zhǔn)溶液，在上述條件下對(duì)噻蟲嗪(或氟蟲腈)進(jìn)行分析，取2次測(cè)定的峰面積平均值作為測(cè)定結(jié)果。以噻蟲嗪(或氟蟲腈)質(zhì)量濃度(mg/mL)為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖3。噻蟲嗪(或氟蟲腈)質(zhì)量濃度與其響應(yīng)值之間呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系，其回歸方程分別為：噻蟲嗪y=5 629.6x+42.829，R2=0.999 4；氟蟲腈y=4 792.1x+42.616，R2=0.999 3。

圖3 噻蟲嗪、氟蟲腈質(zhì)量濃度與其響應(yīng)值之間的線性關(guān)系圖

2.4 分析方法的精密度

對(duì)同一樣品稱取10個(gè)試樣在上述色譜操作條件下進(jìn)行平行測(cè)定，結(jié)果見表1。噻蟲嗪和氟蟲腈的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.06和0.05；變異系數(shù)分別為0.36%和0.25%，說明此方法的精密度良好。

表1 37.5%噻蟲嗪·氟蟲腈懸浮劑精密度測(cè)定

2.5 分析方法的準(zhǔn)確度

在已知含量的試樣中加入一定量的噻蟲嗪、氟蟲腈的標(biāo)樣，按上述色譜操作條件進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算每個(gè)樣品的回收率并計(jì)算其平均回收率，結(jié)果見表2。噻蟲嗪的回收率為99.68%～100.35%，平均回收率為99.94%；氟蟲腈的回收率為99.65%～100.15%，平均回收率為99.84%，說明該方法具有較高的準(zhǔn)確度，滿足定量分析要求。

表2 37.5%噻蟲嗪·氟蟲腈懸浮劑準(zhǔn)確度測(cè)定

3 結(jié)論

本文采用高效液相色譜法建立了37.5%噻蟲嗪·氟蟲腈懸浮劑有效成分的定性定量分析方法，具有分離效果好、精密度和準(zhǔn)確度較高以及省時(shí)、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確等特點(diǎn)，可以滿足生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)中該產(chǎn)品的質(zhì)量控制要求。