周 鑫， 王 智， 何雪茹， 付裕豪， 荀雪姣， 李 穎， 董占軍

1 河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)院， 石家莊 050017； 2 河北省人民醫(yī)院藥學(xué)部， 石家莊 050057

肝纖維化是由非酒精性脂肪性肝炎、病毒性肝炎、過度飲酒和金屬中毒等引起的慢性肝損傷的傷口愈合的過程。不加干預(yù)的肝纖維化將會(huì)進(jìn)展為肝硬化、肝癌，最終導(dǎo)致死亡［1］。全球約75%的肝癌發(fā)生在亞洲，僅我國就承擔(dān)了全球50%的肝癌負(fù)擔(dān)［2］。大量研究［3］表明，肝纖維化是可控的，甚至是可逆的。因此，及早地干預(yù)肝纖維化將極大地減輕我國的社會(huì)負(fù)擔(dān)和醫(yī)療壓力，延緩、逆轉(zhuǎn)肝纖維化已成為治療慢性肝炎的關(guān)鍵選擇。細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）在肝臟內(nèi)的過度沉積是肝纖維化的一個(gè)標(biāo)志特征，作為其主要貢獻(xiàn)者的肝星狀細(xì)胞（HSC）在肝纖維化進(jìn)行性發(fā)展中有非常重要的作用。肝纖維化是一個(gè)動(dòng)態(tài)的過程，HSC 的活化與其他細(xì)胞之間的作用受多種信號(hào)通路之間復(fù)雜的相互作用影響［4］。同時(shí)，細(xì)胞的自噬與凋亡在HSC 的活化中也有多方面的影響。本文介紹了多條信號(hào)通路在肝纖維化進(jìn)程中的影響并綜述了非編碼RNA 在肝纖維化進(jìn)程中的不同作用，以期發(fā)現(xiàn)抗肝纖維化相關(guān)潛在候選目標(biāo)與新的治療靶點(diǎn)，為延緩、逆轉(zhuǎn)肝纖維化提供新的思路。

1 肝纖維化相關(guān)信號(hào)通路

1.1 TGF-β介導(dǎo)的信號(hào)通路 TGF-β是一種多功能細(xì)胞因子，調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞、未成熟造血細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞等多種細(xì)胞的增殖、分化、凋亡、黏附和遷移。TGF-β通過經(jīng)典（基于SMAD）和非經(jīng)典（非基于SMAD）信號(hào)通路表達(dá)信號(hào)響應(yīng)。TGF-β激活下游介質(zhì)，進(jìn)一步激活幾種細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路以調(diào)節(jié)各種細(xì)胞功能。

1.1.1 TGF-β1/SMAD 信號(hào)通路與相關(guān)活性成分及藥物 TGF-β1 通過激活下游底物（包括SMAD2 和SMAD3）發(fā)揮其生物學(xué)作用，同時(shí)受到SMAD7表達(dá)的負(fù)反饋調(diào)節(jié)［5］。在肝纖維狀態(tài)下，SMAD2和SMAD3表達(dá)增加起正向調(diào)節(jié)作用，而SMAD7表達(dá)下降進(jìn)行負(fù)調(diào)節(jié)。TGF-β/SMAD的信號(hào)傳導(dǎo)起始于一個(gè)異源傳導(dǎo)復(fù)合物，當(dāng)TGF-β1與TGF-β受體Ⅱ（TGFβRⅡ）相互作用時(shí)，異源傳導(dǎo)復(fù)合物被激活，誘導(dǎo)TGF-βRⅡ?qū)GFβRⅠ進(jìn)行磷酸化，接著磷酸化TGFβRⅠ反過來磷酸化細(xì)胞質(zhì)介質(zhì)中的SMAD2/SMAD3，并且與SMAD4 形成異源三聚體復(fù)合物，逐漸向細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)移，識(shí)別結(jié)合序列發(fā)揮轉(zhuǎn)錄因子作用［6］。

柚木具有抗炎保肝解熱鎮(zhèn)痛作用。柚木葉取物以劑量依賴性降低Ⅰ型α1 膠原鏈（COL1A1）、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）、血小板衍生生長(zhǎng)因子和組織金屬蛋白酶抑制劑1（TIMP1）的基因表達(dá)，升高基質(zhì)金屬蛋白酶3（MMP3）的表達(dá)。同時(shí)柚木提取物在mRNA水平上呈劑量和時(shí)間依賴性，在蛋白水平上呈劑量依賴性，顯著下調(diào)TGF-β1 和SMAD2 表達(dá)，上調(diào)SMAD7表達(dá)，通過調(diào)節(jié)TGF-β1/SMAD2 通路和上調(diào)MMP3/TIMP1 比值逆轉(zhuǎn)肝纖維化［7］。芝麻酚是一種從芝麻中分離出的脂溶性木酚素類化合物，被證明對(duì)硫代乙酰胺（TAA）誘導(dǎo)的肝纖維化大鼠具有保護(hù)作用。芝麻酚以劑量依賴性方式顯著降低TGF-β1、SMAD3、磷酸化的SMAD3（p-SMAD3）和α-SMA mRNA的表達(dá)和蛋白質(zhì)濃度，上調(diào)SMAD7 mRNA 的表達(dá)，同時(shí)以濃度依賴性方式顯著降低溶血磷脂酸受體1（LPAR1），LPAR3和結(jié)締組織生長(zhǎng)因子mRNA 的表達(dá)，通過抑制TGF-β1/SMAD3 信號(hào)通路和下調(diào)LPAR1/3 的表達(dá)發(fā)揮抗肝纖維化作用［8］。阿司匹林在體內(nèi)外以劑量依賴性方式下調(diào)α-SMA、Ⅰ型膠原蛋白、TGF-β1、p-SMAD2/3 的蛋白質(zhì)表達(dá)水平和α-SMA、COL1A1、TGF-β1 mRNA 水平，通過抑制TGF-β1/SMAD 信號(hào)減輕肝纖維化［9］。檸檬素通過上調(diào)SMAD7，減少SMAD2/3 的c 端磷酸化（p-SMAD2/3c）和核轉(zhuǎn)位，抑制TGF-β/SMAD 信號(hào)通路來減輕肝細(xì)胞EMT 和HSC 活化，從而抑制四氯化碳（CCl4）誘導(dǎo)的小鼠肝纖維化［10］。

1.1.2 TGF-β1/其他信號(hào)通路與相關(guān)活性成分及藥物 除規(guī)范的TGF-β1/SMAD 信號(hào)通路外，還存在由其他信號(hào)通路介導(dǎo)的TGF-β信號(hào)傳導(dǎo)。例如，絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路，包括細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶、c-Jun氨基末端激酶（JNK）、p38 MAPK，以及NF-κB抑制劑（IκB）激酶（IKK）、磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）、蛋白激酶B（Akt）和Rho 家 族GTPases，這 些 受 體 激 活 的 非SMAD 轉(zhuǎn)導(dǎo)器以獨(dú)立或與SMAD 聯(lián)合的方式介導(dǎo)信號(hào)反應(yīng)，并匯聚到SMAD上以控制SMAD活動(dòng)［11］。

咖啡因阻斷了磷酸化的ERK、JNK、p38 和pSMAD3L 蛋白水平的顯著增加，通過阻斷MAPK 和TGF-β/SMAD3 信號(hào)通路，減輕實(shí)驗(yàn)性非酒精性脂肪性肝炎和TAA 誘導(dǎo)的肝纖維化進(jìn)展［12］。米糠油（RBO）富含多種生物活性植物化學(xué)物質(zhì)，具有降低膽固醇、抗炎抗氧化活性等作用。RBO 顯著下調(diào)NF-κβ 信號(hào)通路，進(jìn)而抑制一些炎癥介質(zhì)的表達(dá)，包括環(huán)氧化酶2、IL-1β和TNF-α。RBO通過抑制TGF-β1、α-SMA、Ⅰ型膠原、羥脯氨酸、結(jié)締組織生長(zhǎng)因子和黏著斑激酶（FAK）的生物學(xué)作用，通過抑制HSC 活化和調(diào)節(jié)TGF-β1 和FAK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)之間的相互作用來減少肝纖維化［13］。五味子酯甲具有抗氧化抗炎抗細(xì)胞凋亡和心肌保護(hù)等多種藥理活性，降低了磷酸化的TGF-β-活化激酶1（p-TAK1）/TAK1、p-JNK/JNK、p-p38/p38、p-IκB/IκB 和NF-κB p65 蛋白表達(dá)水平，不同程度上抑制了α-SMA 和COL1A1 mRNA的表達(dá)，通過TGF-β1介導(dǎo)的TAK1/MAPK和NF-κB通路的激活，在體內(nèi)外改善肝纖維化［14］。

1.2 Wnt/β-catenin 信號(hào)通路與相關(guān)活性成分及藥物Wnt 信號(hào)通路是一種比較保守的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，在調(diào)節(jié)細(xì)胞功能和生長(zhǎng)發(fā)育方面發(fā)揮重要作用。Wnt蛋白首先與靶細(xì)胞膜上的卷曲蛋白和輔助受體低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5/6結(jié)合，從而通過蓬亂蛋白的磷酸化將胞外信號(hào)傳遞到細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。然后細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的蓬松蛋白通過抑制糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）的激活，阻止β-catenin 的磷酸化或降解，導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)內(nèi)游離的β-catenin增加。當(dāng)細(xì)胞質(zhì)中游離的β-catenin達(dá)到一定水平時(shí)，進(jìn)入細(xì)胞核與核內(nèi)淋巴細(xì)胞增強(qiáng)因子/轉(zhuǎn)錄T淋巴細(xì)胞因子（LEF/TCF）結(jié)合，形成β-catenin-LEF/TCF復(fù)合體，導(dǎo)致經(jīng)典Wnt信號(hào)通路下游靶基因轉(zhuǎn)錄［15］。

漆黃素顯著抑制與β-catenin 下降和GSK-3β 水平升高相關(guān)的wnt3a基因表達(dá)。此外，漆黃素還能減緩肝組織纖維化的進(jìn)程，減少α-SMA和特異性周期蛋白-D1（cyclin D1）的肝臟表達(dá)，通過抑制Wnt/β-catenin 信號(hào)通路減輕TAA 誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化［16］。和厚樸酚（HNK）是從廣玉蘭中提取的一種生物活性化合物，具有潛在的抗肝纖維化作用。HNK 激活了CC-3 和GSK3β，下調(diào)了HSC 中的α-SMA、Wnt3a 和β-catenin 的表達(dá)，通過激活GSK3β 和抑制Wnt3a/β-catenin 信號(hào)通路誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和抑制肝纖維化［17］。

1.3 PI3K/Akt/哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信號(hào)通路與相關(guān)活性成分及藥物 PI3K/Akt/mTOR 信號(hào)通路是癌癥的關(guān)鍵通路之一［18］。大量的研究表明PI3K/Akt/mTOR 信號(hào)通路在肝纖維化中發(fā)揮著重要作用。不同的生長(zhǎng)因子對(duì)應(yīng)不同的受體酪氨酸激酶（RTK）。首先生長(zhǎng)因子介導(dǎo)的RTK 刺激PI3K 的活化?；罨腜I3K 使磷脂酰肌醇4，5-二磷酸（PIP2）磷酸化并將其轉(zhuǎn)化為磷脂酰肌醇3，4，5-三磷酸（PIP3）。第二個(gè)信使PIP3 是Akt 的對(duì)接位點(diǎn)，而Akt 是PI3K 通路的核心介質(zhì)。隨后磷脂酰肌醇依賴性激酶14 與Akt之間的相互作用，導(dǎo)致Akt在thr308位點(diǎn)上進(jìn)行磷酸化［19］。磷酸化的Akt通過結(jié)節(jié)性硬化癥1/2 復(fù)合體激活下游效應(yīng)蛋白mTOR，并上調(diào)各種轉(zhuǎn)錄因子，從而發(fā)揮其生物學(xué)活性作用。

多沙唑嗪是一種選擇性α1 腎上腺素能受體阻斷劑，被發(fā)現(xiàn)有抗肝纖維化作用。多沙唑嗪在體內(nèi)外以濃度依賴性方式抑制HSC 的活化，上調(diào)PI3K/Akt/mTOR 信號(hào)通路中的p-mTOR 的表達(dá)從而抑制自噬來減弱肝纖維化［20］。富馬酸替諾福韋二吡呋酯主要用于慢性乙型肝炎患者的抗病毒治療，通過持續(xù)顯著降低PI3K/Akt/mTOR 信號(hào)通路的磷酸化在TAA 誘導(dǎo)的肝纖維化模型中誘導(dǎo)HSC凋亡［21］。委陵菜酸是從委陵菜中提取的一種活性成分，委陵菜酸顯著降低了α-SMA、TGF-β、半胱天冬酶-3、Bax、IL-6 和TNF-α 的表達(dá)，升高了Bcl-2 和IL-10 的表達(dá)，通過抑制甘油磷脂代謝途徑以及PI3K/Akt/mTOR 和NF-κB 信號(hào)通路，緩解體內(nèi)肝纖維化進(jìn)展［22］。

1.4 NF-κB信號(hào)通路與相關(guān)活性成分及藥物 NF-κB信號(hào)通路是一種高度保守的進(jìn)化途徑，在調(diào)節(jié)免疫和炎癥反應(yīng)方面具有相當(dāng)重要的作用。PI3K/Akt 可調(diào)控NF-κB 通路/轉(zhuǎn)錄因子家族，而NF-κB 通路/轉(zhuǎn)錄因子家族可調(diào)控炎癥、細(xì)胞應(yīng)激、先天和適應(yīng)性免疫反應(yīng)，進(jìn)而調(diào)控肝細(xì)胞、肝巨噬細(xì)胞和HSC 的生存、增殖、遷移和侵襲［23］。

NF-κB 包括RelA（p65）、RelB、c-Rel、p105/p50 和p100/p52五個(gè)家族成員。Rel蛋白作為成熟蛋白合成，p50 和p52 分別由前體p105 和p100 的蛋白體降解產(chǎn)生。這些蛋白具有保守的Rel 同源結(jié)構(gòu)域，可與目標(biāo)DNA 序列結(jié)合，形成homo/異二聚體，在沒有任何刺激的情況下，通過IκB 定位于細(xì)胞質(zhì)。NF-κB 的活化通過不同的典型和非典型途徑都可以進(jìn)行，在規(guī)范途徑中，抑制劑IκB被IKK復(fù)合物磷酸化，并受到泛素介導(dǎo)的蛋白酶體降解。游離的NF-κB 二聚體（主要是p50/p65 和p50/c-Rel）進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)、并激活靶基因轉(zhuǎn)錄。在非典型途徑中，NF-κB 誘導(dǎo)激酶被激活，隨后p100被翻譯后加工為p52 亞基，與RelB 二聚，以及核定位，從而誘導(dǎo)基因轉(zhuǎn)錄［24］。

二氫楊梅素是騰茶提取物中的一種天然活性物質(zhì)，二氫楊梅素抑制了促凋亡蛋白Bax、半胱天冬酶-3/9（CC-3/9）、磷酸化蛋白及其上游炎癥調(diào)節(jié)因子p-IKKα/β和p-IκBα、TGF-β1 和α-SMA 的表達(dá)，促進(jìn)抗凋亡蛋白Bcl-2 和Bcl-XL 的表達(dá)。通過抑制NF-κB 介導(dǎo)的炎癥和TGF-β1 調(diào)節(jié)PI3K/Akt 信號(hào)通路來逆轉(zhuǎn)TAA 誘導(dǎo)的肝纖維化［25］。甲氧基丁香酚（4-烯丙基-2，6-二甲氧基苯酚）是存在于人類飲食中的成分，被廣泛用作食品工業(yè)中的添加劑，顯著降低了Col-1、α-SMA、IL-6、TNF-α、一氧化氮合成酶和IL-8 的表達(dá)，通過NF-κB/過氧化物酶體增殖物激活受體-?和NF-κB機(jī)制減弱肝纖維化和炎癥［26］。獐牙菜被用來治療包括肝臟疾病在內(nèi)的各種疾病，獐牙菜提取物顯著抑制CCl4誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化模型中TGF-β、α-SMA、SMAD2/3、Col1A1、NF-κB、TNF-α和IL-1β mRNA和蛋白的表達(dá)，恢復(fù)了肝組織中改變的鐵調(diào)素水平，通過抑制TGF-β/SMAD 和NF-κB信號(hào)通路減輕大鼠肝纖維化并恢復(fù)肝鐵調(diào)素水平［27］。西他列汀以其抗糖尿病活性而聞名，提高了Nrf2 及其靶基因的mRNA 表達(dá)，顯著降低了NF-κB 的水平和蛋白表達(dá)以及TNF-α 的蛋白表達(dá)，通過激活Nrf2和抑制NF-κB通路發(fā)揮抗肝纖維化作用［28］。

1.5 Hippo 信號(hào)通路與相關(guān)活性成分及藥物 Hippo途徑是一種進(jìn)化保守的信號(hào)通路，在傷口愈合和免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。河馬通路由一個(gè)信號(hào)網(wǎng)絡(luò)組成，這些信號(hào)最終指示轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子YES 關(guān)聯(lián)蛋白（YAP）和PDZ結(jié)合基序轉(zhuǎn)錄共激活因子（TAZ）的功能。核YAP/TAZ 直接進(jìn)行基因表達(dá)，調(diào)控細(xì)胞增殖和存活等一系列行為［29］。YAP/TAZ的消耗會(huì)阻斷TGF-β誘導(dǎo)的肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化和ECM 的產(chǎn)生，而活化的YAP/TAZ 的異位表達(dá)會(huì)促進(jìn)這些情況。YAP 與TAZ 結(jié)合直接調(diào)節(jié)TGF-β 激活的SMAD 轉(zhuǎn)錄因子，為促纖維化信號(hào)傳導(dǎo)串?dāng)_提供了一種機(jī)制。

白藜蘆醇是一種存在于葡萄花生等作物中的生物活性成分，已被證明通過多種信號(hào)通路發(fā)揮抗肝纖維化作用。白藜蘆醇顯著降低了YAP和TAZ的mRNA和蛋白水平，增強(qiáng)Bax 蛋白表達(dá)并降低Bcl-2 蛋白表達(dá)，部分通過Hippo通路抑制HSC活化［30］。N-乙酰-L-色氨酸（L-NAT）是N-乙酰色氨酸（NAT）的三種異構(gòu)體之一，以往研究發(fā)現(xiàn)其具有神經(jīng)保護(hù)抗炎保肝等作用。L-NAT 顯著降低α-SMA、Ⅰ膠原、TGF-β1、p-SMAD2/3、MMP9 和Bax 蛋白水平的表達(dá)。增加Bcl-2 和YAP1 的蛋白表達(dá)，通過調(diào)控TGF-β1/SMAD 和Hippo/YAP1 信號(hào)抑制CCl4誘導(dǎo)的肝纖維化［31］。

1.6 MAPK 信號(hào)通路與相關(guān)活性成分及藥物MAPK 途徑是最保守的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑之一，在細(xì)胞增殖、分化、死亡和胚胎發(fā)生中具有關(guān)鍵功能。MAPK信號(hào)傳導(dǎo)由三種基于激酶的反應(yīng)組成，通過這些反應(yīng)，由絲裂原激活的蛋白激酶激酶（MAPKK 或MEK）催化的上游激酶反應(yīng)激活，而上游激酶反應(yīng)又被另一種稱為MAPKKK（MAPKK 激酶）或Raf（以快速加速纖維肉瘤命名）的上游激酶磷酸化［32］。常規(guī)MAPK包括JNK、p38 MAPK 和ERK。已有研究表明MAPK 通路與肝纖維化之間有著密切關(guān)系。

香芹酚是一種單萜烯酚類的非選擇性TRPM7抑制劑，具有抗腫瘤、抗炎和抗肝纖維化作用，香芹酚顯著降低了CCl4誘導(dǎo)肝纖維化小鼠模型中α-SMA、Col1α1、p-ERK1/2、p-JNK1/2和p-p38的表達(dá)，通過阻斷MAPK通路發(fā)揮抗肝纖維化作用［33］。HNK是從廣玉蘭中提取的一種生物活性化合物，具有潛在的抗肝纖維化作用。HNK降低了α-SMA、COL1A1、COL3A1和SMAD2/3的表達(dá)，增加了微管相關(guān)蛋白1輕鏈3-Ⅱ（LC3-Ⅱ）和p62的表達(dá)，通過抑制TGF-β1/SMAD 信號(hào)通路和激活p38 MAPK通路分別介導(dǎo)HSC的活化與自噬，起到抗肝纖維化作用［34］。所有肝纖維化信號(hào)通路與潛在抗肝纖維化藥物及活性成分詳見表1。

2 非編碼RNA（ncRNA）介導(dǎo)的肝纖維化信號(hào)通路

人類基因組中約80%的基因被主動(dòng)轉(zhuǎn)錄為各種ncRNA，在多種疾病發(fā)病機(jī)制的重要途徑中起關(guān)鍵作用。ncRNA 包括長(zhǎng)鏈RNA（lncRNA）、微小RNA（miRNA）、環(huán)狀RNA（circRNA）、小核仁氨酸（snoRNA）和Piwi相互作用的RNA（piRNA）。大量研究［35］表明，ncRNA 可以通過調(diào)節(jié)多個(gè)下游基因靶點(diǎn)和相關(guān)途徑的表達(dá)能力，調(diào)控肝纖維化進(jìn)程（表2）。

表2 ncRNA及藥物與肝纖維化相關(guān)通路與試驗(yàn)類型總結(jié)Table 2 Summary of non-coding RNAs and drug and liver fibrosis-related pathways and trial types

2.1 miRNA 介導(dǎo)的肝纖維化信號(hào)通路及其靶點(diǎn)miRNA 是長(zhǎng)度約22 個(gè)核苷酸的內(nèi)源性ncRNA，在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)基因表達(dá)。外周髓鞘蛋白22（PMP22）首先從小鼠NIH3T3 成纖維細(xì)胞中分離出來，主要表達(dá)在周圍神經(jīng)的髓鞘化雪旺細(xì)胞中，研究［36］表明PMP22 在CCl4誘導(dǎo)的小鼠肝纖維化模型和TGF-β 激活的HSC 中顯著上調(diào)，miR-139-5p 通過靶向抑制PMP22 阻礙TGF-β 誘導(dǎo)的HSC 的激活。肽基脯氨酰異構(gòu)酶C（Ppic）在骨髓中的造血祖細(xì)胞和胸腺中的T淋巴細(xì)胞前體細(xì)胞或胸腺細(xì)胞中表達(dá)，以往研究表明Ppic 在環(huán)孢素（CsA）誘導(dǎo)的腎損傷起重要作用。在CCl4誘導(dǎo)的小鼠肝纖維化模型中，Ppic 敲低降低了TGF-β 誘導(dǎo)的小鼠HSC 活化，miR-137-3p 直接靶向并負(fù)調(diào)節(jié)Ppic 的表達(dá)調(diào)控TGF-β 引起的小鼠HSC 活化［37］。miR-497 在多種疾病過程中起到一定作用，是潛在的生物標(biāo)志物與治療靶點(diǎn)。miR-497 可以通過靶向SMAD7 增強(qiáng)TGF-β/SMAD 信號(hào)通路以促進(jìn)肝纖維化［38］。miR-34a-5p 靶向并負(fù)調(diào)節(jié)lncRNA CCAT2 的表達(dá)，通過TGF-β1/SMAD4 信號(hào)通路發(fā)揮抗肝纖維化作用［39］。三維人胚胎干細(xì)胞外泌體（3D-hESC-外泌體）中含有非編碼小RNA與蛋白質(zhì)等其他生物分子，已被證明可以增強(qiáng)組織再生并調(diào)節(jié)內(nèi)源性修復(fù)。3D-hESC-外泌體中的miR-6766-3p 通過抑制TGFβRII 表達(dá)來滅活SMAD 信號(hào)傳導(dǎo)，從而減弱HSC 活化并抑制肝纖維化［40］。miR-130b-5p 的表達(dá)在多種肝損傷模型中上調(diào)，miR-130b-5p通過AMPK/TGF-β/SMAD2/3信號(hào)通路調(diào)節(jié)SIRT4，從而促進(jìn)肝纖維化［41］。含有IQ 基序的GTP 酶激活蛋白1（IQGAP1）是一種信號(hào)支架蛋白，通過促進(jìn)細(xì)胞中的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)來調(diào)節(jié)一系列細(xì)胞活動(dòng)。研究［42］發(fā)現(xiàn)miR-124的表達(dá)在肝纖維化組織和TNF-α誘導(dǎo)的LX-2 細(xì)胞中下調(diào)，同時(shí)伴隨著IQGAP1 的上調(diào)表達(dá)，miR-124 的過表達(dá)可通過靶向IQGAP1 抑制NF-κB途徑來降低HSC 炎性細(xì)胞因子的分泌。父系表達(dá)基因3（PEG3）是一種編碼DNA結(jié)合蛋白的印記基因，是一種已知的轉(zhuǎn)錄抑制因子。miR-129-5p 可能調(diào)節(jié)纖維腺炎相關(guān)基因的表達(dá)，miR-129-5p 在CCl4誘導(dǎo)的大鼠模型肝纖維化組織中表達(dá)較低，PEG3 表達(dá)較高。研 究［43］表明miR-129-5p 可以通過降 低PEG3 抑制NF-κB信號(hào)通路發(fā)揮抗肝纖維化作用。

2.2 lncRNA 介導(dǎo)的肝纖維化信號(hào)通路及其靶點(diǎn)lncRNA 是一類長(zhǎng)度大于200 個(gè)核苷酸且不具有蛋白質(zhì)編碼能力的ncRNA。lncRNA-ENST00000519726（HEIM）是一種新鑒定的lncRNA。lncRNA-HEIM 的表達(dá)在HBV 感染后上調(diào)，導(dǎo)致TGF-β 和SMAD4 的表達(dá)增加，并進(jìn)一步促進(jìn)HSC 的纖維化［44］。lnc-MBI-52在體內(nèi)和體外肝纖維化過程中均增加，lnc-MBI-52 可以通過抑制miR-466g表達(dá)來抑制SMAD4 表達(dá)發(fā)揮抗肝纖維化作用［45］。lnc-LFAR1 在HSC 中特異性上調(diào)，通過激活TGFβR1/SMAD2/3 和Notch 信號(hào)通路促進(jìn)肝纖維化［46］。小鼠Anxa6 敲低部分在TGF-β1 刺激的HSC 中 抑 制 了TGF-β1 誘 導(dǎo) 的HSC 活 化 并 阻 斷 了PI3K/Akt 信號(hào)激活，小鼠Anxa6/miR-9-5p/Anxa2 軸和PI3K/Akt 通路可能參與了lncRNA ANXA2P2（mouse Anxa6）對(duì) 肝 纖 維 化 的 作 用［47］。 lncRNA-Met 與lncRNA-Nox4是兩種新型lncRNA，共表達(dá)可以通過氧化還原過程和PI3K/Akt信號(hào)通路激活HSC，增加ECM的產(chǎn)生，并調(diào)節(jié)肝纖維化的過程［48］。lncRNA-MIAT的表達(dá)與miR-3085-5p 水平在肝硬化患者和活化的HSC 中呈負(fù)相關(guān)，lncRNA-MIAT 至少部分通過miR-3085-5p/YAP/EMT 信 號(hào) 通 路 增 強(qiáng)HSC 的 活 化［49］。lncRNA-HSER 在肝細(xì)胞中特異性表達(dá)，通過C5AR1-Hippo-YAP 和Notch 信號(hào)通路分別抑制肝細(xì)胞凋亡和肝細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化［50］。

2.3 circRNA 介導(dǎo)的肝纖維化信號(hào)通路及其靶點(diǎn)circRNA 是由前體mRNA 反向剪接產(chǎn)生的一類內(nèi)源性ncRNA。circUbe2k 在CCl4誘導(dǎo)的肝纖維化小鼠和TGF-β1 刺激的LX-2 細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)，抑制其表達(dá)可以通過miR-149-5p/TGF-β2 軸抑制HSC 的活化和增殖［51］。circDIDO1 通 過 靶 向miR-141-3p 上 調(diào) 升 高PTEN 蛋白水平，降低LX2 細(xì)胞中p-AKT/AKT 的比例抑制HSC的活化［52］。

2.4 ncRNA 相關(guān)藥物與活性成分及其靶點(diǎn) 中藥生物堿單體川芎嗪在體內(nèi)和體外上調(diào)miR-145表達(dá)并抑制TGF-β/SMAD 信號(hào)通路發(fā)揮抗肝纖維化作用［53］。達(dá)沙替尼是第二代口服多靶點(diǎn)RTK抑制劑，上調(diào)miR-378-3p的表達(dá)抑制Wnt-10a，下調(diào)miR-17-5p升高WiF-1和SMAD-7 的表達(dá)，通過抑制Wnt/β-catenin 和TGF-β/SMAD 通路抑制TAA 誘導(dǎo)的小鼠肝纖維化［54］。艾代拉里斯（Idelalisib）是首個(gè)高選擇性口服磷脂酰肌醇3-激酶δ（PI3K-δ）抑制劑，用于治療復(fù)發(fā)性慢性淋巴細(xì)胞白血病、復(fù)發(fā)性濾泡性淋巴瘤、復(fù)發(fā)性小淋巴細(xì)胞淋巴瘤。艾代拉里斯顯著降低了COL1和α-SMA 基因及蛋白水平的表達(dá)，通過抑制TGF-β/SMAD3信號(hào)通路的活化抑制了HSC的活化，同時(shí)艾代拉里斯上調(diào)miR-124-3p的表達(dá)抑制PI3K/AKT通路促進(jìn)細(xì)胞凋亡［55］。

3 小結(jié)

肝纖維化的進(jìn)展涉及HSC、肝巨噬細(xì)胞在內(nèi)的多種細(xì)胞，通過多通路相互交聯(lián)作用，調(diào)節(jié)細(xì)胞活化、細(xì)胞自噬和細(xì)胞凋亡等多種形式。上文中提到的潛在活性成分及靶標(biāo)大多數(shù)處于前瞻性研究階段。近年來，隨著人們對(duì)肝纖維化認(rèn)識(shí)的逐步加深，已經(jīng)有越來越多的藥物及活性成分發(fā)現(xiàn)具有抗肝纖維化的潛力，新的肝纖維化調(diào)節(jié)方式也在逐漸被發(fā)現(xiàn)。目前，藥物治療仍是肝纖維化的主要治療方式。ACC 抑制劑Aramchol Meglumine、THR-β 激動(dòng)劑Resmetirom、小分子半乳糖凝集素-3 抑制劑Belapectin 和GB1211、脂質(zhì)納米顆粒BMS-986263 等一批新藥已步入Ⅱ/Ⅲ期臨床研究，相信隨著對(duì)以往機(jī)制及新發(fā)現(xiàn)機(jī)制的深入剖析，一定能給藥物抗肝纖維化治療提供新的助力。

利益沖突聲明：本文不存在任何利益沖突。

作者貢獻(xiàn)聲明：周鑫負(fù)責(zé)文獻(xiàn)檢索，撰寫論文；王智、何雪茹、付裕豪、荀雪姣負(fù)責(zé)資料分析；李穎、董占軍負(fù)責(zé)指導(dǎo)撰寫文章并最終定稿。