陳曦，王雅梅

首都醫(yī)科大學(xué)12021級(jí)臨床醫(yī)學(xué)“5+3”一體化專業(yè)一班，2基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生化與分子生物學(xué)系，北京 1000690

膠質(zhì)瘤是發(fā)生于神經(jīng)外胚層的顱內(nèi)腫瘤，占腦部腫瘤的70%以上，其隱匿性較強(qiáng)，惡性程度、復(fù)發(fā)率及病死率均較高[1]。臨床上將膠質(zhì)瘤分為4 個(gè)級(jí)別，Ⅰ、Ⅱ級(jí)膠質(zhì)瘤稱為低級(jí)別膠質(zhì)瘤，Ⅲ、Ⅳ級(jí)膠質(zhì)瘤稱為高級(jí)別膠質(zhì)瘤，級(jí)別越高，惡性程度就越高。低級(jí)別膠質(zhì)瘤患者不常見(jiàn)，大多為年輕患者，這些患者有較好的預(yù)后，并對(duì)治療表現(xiàn)出一定的敏感性[2]。多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（glioblastoma multiforme，GBM）是Ⅳ級(jí)星形細(xì)胞腫瘤，也是病死率最高、最難治愈的腫瘤。高級(jí)別膠質(zhì)瘤的治療以手術(shù)切除為主，放化療為輔。替莫唑胺（temozolomide，TMZ）是一種口服烷基化藥物，也是唯一可以跨越血腦屏障對(duì)膠質(zhì)瘤起作用的藥物，可將細(xì)胞周期阻斷在G2/M 期，導(dǎo)致膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡[3]。鉑類藥物如順鉑、卡鉑等是一類影響細(xì)胞周期的化療藥物，也是臨床上治療膠質(zhì)瘤的常用化療藥物，其主要靶點(diǎn)是DNA，通過(guò)與DNA結(jié)合破壞其結(jié)構(gòu)，最終導(dǎo)致膠質(zhì)瘤細(xì)胞周期中斷或凋亡[4]。經(jīng)過(guò)多年研究發(fā)現(xiàn)，膠質(zhì)瘤對(duì)化療具有很強(qiáng)的耐藥性，這也導(dǎo)致患者治愈率不高，生存期較短，預(yù)后較差。越來(lái)越多的研究表明，表觀遺傳學(xué)調(diào)控因子的改變對(duì)膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展及耐藥具有重要影響。因此，研究膠質(zhì)瘤的耐藥機(jī)制，探索減少膠質(zhì)瘤產(chǎn)生耐藥的方法對(duì)提高抗腫瘤藥物的療效具有重要的臨床意義。本文從膠質(zhì)瘤耐藥的產(chǎn)生機(jī)制及表觀遺傳學(xué)調(diào)控對(duì)膠質(zhì)瘤耐藥的影響等方面進(jìn)行綜述，旨在對(duì)膠質(zhì)瘤的治療、藥物的合理使用和研發(fā)以及后續(xù)的相關(guān)研究提供參考依據(jù)。

1 表觀遺傳學(xué)調(diào)控對(duì)膠質(zhì)瘤耐藥的影響

表觀遺傳修飾參與多種生命活動(dòng)的調(diào)控過(guò)程，常見(jiàn)的修飾類型包括DNA 甲基化、組蛋白修飾、非編碼RNA 調(diào)控和染色質(zhì)重塑，表觀遺傳修飾異常可能誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展與耐藥的產(chǎn)生。

1.1 DNA 甲基化

DNA 甲基化是一種在DNA 甲基轉(zhuǎn)移酶（DNA methyltransferase，DNMT）的催化下進(jìn)行的化學(xué)修飾過(guò)程。在這個(gè)過(guò)程中，以S-腺苷甲硫氨酸（S-adenosyl methionine，SAM）作為甲基供體，在胞嘧啶的嘧啶環(huán)上的5'位置添加一個(gè)甲基，形成5-甲基胞嘧啶，從而使基因沉默，該過(guò)程主要發(fā)生在CpG 二核苷酸上，也可見(jiàn)于非CpG 序列，但較為罕見(jiàn)[5]。DNMT 的表達(dá)與膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)TMZ 的敏感性有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，DNMT1 在對(duì)TMZ 耐藥的膠質(zhì)瘤細(xì)胞中表達(dá)下調(diào)，其表達(dá)水平越高，膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)TMZ 的敏感性越強(qiáng)[6]。DNA 甲基化異常還涉及藥物外排轉(zhuǎn)運(yùn)體的啟動(dòng)子、促凋亡基因和DNA 損傷修復(fù)基因。O6-甲基鳥(niǎo)嘌呤-DNA 甲基轉(zhuǎn)移酶（O6-methylguanine-DNA methyltransferase，MGMT）是一種關(guān)鍵的DNA 損傷修復(fù)基因，其表達(dá)產(chǎn)物負(fù)責(zé)修復(fù)TMZ 造成的DNA 損傷，當(dāng)MGMT啟動(dòng)子區(qū)域發(fā)生高度甲基化時(shí)，該基因會(huì)被沉默，從而增強(qiáng)GBM對(duì)TMZ 的臨床反應(yīng)。MGMT 表達(dá)上調(diào)可使膠質(zhì)瘤對(duì)TMZ 造成DNA 損傷的修復(fù)能力增強(qiáng)，從而使膠質(zhì)瘤產(chǎn)生耐藥性。在復(fù)發(fā)性膠質(zhì)瘤臨床樣本中，MGMT啟動(dòng)子容易建立非甲基化狀態(tài)，MGMT表達(dá)出現(xiàn)上調(diào)[7]。另一方面，即使MGMT啟動(dòng)子未發(fā)生改變，基因組重排列也可導(dǎo)致復(fù)發(fā)性膠質(zhì)瘤中MGMT 過(guò)表達(dá)[8]。Lu 等[9]研究小核仁RNA 宿主基因12（small nucleolar host gene 12，SNHG12）在GBM 耐藥中的作用，以及表觀遺傳學(xué)調(diào)控對(duì)其異常表達(dá)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在對(duì)TMZ 耐藥的膠質(zhì)瘤細(xì)胞中，SNHG12 表達(dá)顯著上調(diào)，且啟動(dòng)子處DNA甲基化水平異常低。DNA 甲基化缺失使SNHG12的啟動(dòng)子區(qū)域更容易被特異性蛋白1（specificity protein 1，SP1）接近，SP1 可激活SNHG12 并促使其表達(dá)。除上述基因外，p17、大腫瘤抑制激酶1（large tumor suppressor kinase 1，LATS1）、大腫瘤抑制激酶2（large tumor suppressor kinase 2，LATS2）等基因啟動(dòng)子區(qū)域CpG 島（基因中富含非甲基化CpG 的區(qū)域）的甲基化也與膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展和復(fù)發(fā)耐藥密不可分[10-11]。DNA 高甲基化與耐藥性有關(guān)，因此，去甲基化藥物在逆轉(zhuǎn)GBM 中與DNA高甲基化相關(guān)的耐藥性方面具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。但由于缺乏選擇性，去甲基化劑可能會(huì)產(chǎn)生廣泛的全身不良反應(yīng)，該類藥物的臨床應(yīng)用還需要進(jìn)一步的研究。

1.2 組蛋白修飾

組蛋白是一種蛋白質(zhì)，可與DNA 形成核小體。核小體是染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位，是由4 個(gè)核心組蛋白（H2A、H2B、H3 和H4）的2 個(gè)分子和147個(gè)堿基對(duì)長(zhǎng)度的DNA 形成的組蛋白八聚體。常見(jiàn)的組蛋白表觀修飾方式包括乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化和類泛素蛋白修飾等，其中對(duì)膠質(zhì)瘤耐藥影響的研究較為深入的是乙酰化[12]。

1.2.1 組蛋白乙?；揎棇?duì)膠質(zhì)瘤耐藥的調(diào)控組蛋白乙酰化可以調(diào)節(jié)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和基因表達(dá)。在這個(gè)過(guò)程中，組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶將乙?；砑拥浇M蛋白上的賴氨酸殘基上，從而形成有利于轉(zhuǎn)錄激活的開(kāi)放染色質(zhì)狀態(tài)。組蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase，HDAC）可以從賴氨酸上去除乙?；瑥亩纬捎欣谵D(zhuǎn)錄沉默的致密染色質(zhì)[13-14]。在GBM 中，一些特殊的HDAC 表達(dá)上調(diào)，促進(jìn)了膠質(zhì)瘤細(xì)胞耐藥。研究表明，Ⅰ類HDAC的催化活性可促進(jìn)E3 泛素連接酶RAD18 表達(dá)上調(diào)，避免細(xì)胞發(fā)生TMZ 導(dǎo)致的DNA 損傷[15]。Yang 等[16]研究發(fā)現(xiàn)，GBM 細(xì)胞可以通過(guò)HDAC1/2/6 去乙酰化調(diào)控SP1的轉(zhuǎn)錄活性，使B 細(xì)胞特異性莫洛尼鼠白血病病毒插入位點(diǎn)1（B-cell-specific moloney murine leukemia virus insertion site 1，BMI1）和人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄 酶（human telomerase reverse transcriptase，hTERT）表達(dá)上調(diào)，并改變多種基因的表達(dá)，調(diào)節(jié)細(xì)胞周期G2/M 期和DNA 損傷修復(fù)，促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞自我更新，從而產(chǎn)生耐藥性。組蛋白修飾基因zeste增強(qiáng)子同源物2（enhancer of zeste homolog 2，EZH2）、zeste 12 同源物抑制因子（suppressor of zeste 12 homolog，SUZ12）和AT 豐富結(jié)構(gòu)域1A（ATrich interaction domain 1A，ARID1A）在對(duì)TMZ 耐藥膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的表達(dá)水平明顯高于對(duì)TMZ 不耐藥的膠質(zhì)瘤細(xì)胞[17]。與組蛋白修飾相關(guān)的酶，如蛋白質(zhì)精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶（protein arginine methyltransferase，PRMT）和賴氨酸去甲基化酶（lysine demethylase，KDM）均在膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展與耐藥過(guò)程中發(fā)揮重要作用，對(duì)患者的生存具有負(fù)面影響。PRMT 抑制劑目前正在開(kāi)發(fā)中，泛KDM 抑制劑以及選擇性賴氨酸去甲基化酶5A（lysine demethylase 5A，KDM5A）抑制劑等小分子抑制劑可有效抑制TMZ耐藥膠質(zhì)瘤細(xì)胞繼續(xù)生長(zhǎng)[6]。維持乙?；胶鉅顟B(tài)對(duì)于基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)至關(guān)重要。未來(lái)需要進(jìn)一步的研究確定HDAC 的最佳組合策略，以確保其在逆轉(zhuǎn)GBM耐藥治療中的有效性和安全性。

1.2.2 膠質(zhì)瘤的組蛋白修飾調(diào)控新機(jī)制 隨著表觀遺傳修飾研究的不斷深入，很多非乙酰化的組蛋白?；{(diào)控，如組蛋白巴豆?；揎?、棕櫚?；揎椇顽牾；揎棇?duì)膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展影響的研究取得了突破性進(jìn)展。巴豆?；揎椫饕窃诎投辊；D(zhuǎn)移酶的作用下以巴豆酰輔酶A 為底物，將巴豆?；D(zhuǎn)移到賴氨酸殘基，其修飾位點(diǎn)主要富集在基因的啟動(dòng)子區(qū)域和潛在的增強(qiáng)子區(qū)域[18]。研究表明，GBM 干細(xì)胞通過(guò)調(diào)節(jié)賴氨酸代謝產(chǎn)生大量的巴豆酰輔酶A，從而增加細(xì)胞整體巴豆?；?。組蛋白H4 的巴豆酰化修飾通過(guò)影響H3K27乙?；虷3K9 三甲基化限制免疫原性轉(zhuǎn)座因子，抑制干擾素信號(hào)，減少CD8+T 細(xì)胞浸潤(rùn)，最終減弱抗腫瘤免疫反應(yīng)并促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)[19]。琥珀酰化是指琥珀?；w在琥珀酰輔酶A 的介導(dǎo)下將琥珀酰基團(tuán)共價(jià)結(jié)合到賴氨酸殘基的過(guò)程。研究報(bào)道，α-酮戊二酸脫氫酶（α-ketoglutarate dehydrogenase，α-KGDH）通過(guò)與賴氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶2A（lysine acetyltransferase 2A，KAT2A）結(jié)合形成復(fù)合物，從而發(fā)揮琥珀酰轉(zhuǎn)移酶的功能，進(jìn)一步使組蛋白H3K79 琥珀?；?，從而促進(jìn)膠質(zhì)瘤生長(zhǎng)[20]。Zhang 等[21]研究證實(shí)了膠質(zhì)瘤內(nèi)皮細(xì)胞中轉(zhuǎn)膠蛋白2（transgelin 2，TAGLN2）基因K40 位點(diǎn)高度琥珀?；?，在體內(nèi)外均顯著促進(jìn)膠質(zhì)瘤血管生成和腫瘤轉(zhuǎn)移。棕櫚?；且环N可逆的蛋白質(zhì)翻譯后修飾，通常指棕櫚酰基團(tuán)與蛋白質(zhì)的半胱氨酸殘基共價(jià)連接，形成不穩(wěn)定的硫酯鍵。Chen 等[22]研究發(fā)現(xiàn)，與正常腦組織相比，膠質(zhì)瘤組織中棕櫚?；揎棾潭让黠@增加，如果抑制膠質(zhì)瘤組織中的棕櫚酰化修飾水平，將會(huì)激活膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡信號(hào)通路，并且引發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)，這為探索棕櫚酰化與膠質(zhì)瘤的關(guān)系提供了重要依據(jù)。八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4（octamer-binding transcription factor 4，OCT4）基因多在腫瘤組織和細(xì)胞系中表達(dá)，在腫瘤干細(xì)胞維持和自我更新過(guò)程中發(fā)揮重要作用?；熌退幮允悄[瘤干細(xì)胞的重要特征之一，研究表明，OCT4 表達(dá)水平與化療耐藥呈正相關(guān)，OCT4能夠作為化療耐藥和預(yù)后預(yù)測(cè)標(biāo)志物[23-24]。研究發(fā)現(xiàn)，棕櫚?；疧CT4 易與性別決定區(qū)Y 框蛋白4（sex determining region Y-box 4，SOX4）結(jié)合，共同維持膠質(zhì)瘤干細(xì)胞持續(xù)增殖，促進(jìn)膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展[25]。目前已經(jīng)證實(shí)巴豆?；揎棥⒆貦磅；揎椇顽牾；揎椃绞娇赡芘c膠質(zhì)瘤的進(jìn)展有關(guān)，并且為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)修飾相關(guān)的腫瘤治療藥物提供了可能，然而這些修飾方式對(duì)膠質(zhì)瘤耐藥的調(diào)控尚未見(jiàn)報(bào)道，還有待于進(jìn)一步的研究加以證實(shí)。

1.3 非編碼RNA 調(diào)控

1.3.1 長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）對(duì)膠質(zhì)瘤耐藥的調(diào)控 lncRNA 是長(zhǎng)度＞200 個(gè)核苷酸的異質(zhì)RNA，可以影響細(xì)胞增殖、分化、凋亡，在誘導(dǎo)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲、遷移等生物學(xué)行為方面發(fā)揮著重要作用。lncRNA 沒(méi)有編碼蛋白質(zhì)的能力，但是可以調(diào)節(jié)基因的表達(dá)。其中，肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄本1（metastasis associated lung adenocarcinoma transcript 1，MALAT1）和H19在膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)TMZ 耐藥中的作用得到了充分研究。MALAT1 又稱核富集豐富轉(zhuǎn)錄本2（nuclear enriched abundant transcript 2，NEAT2），是膠質(zhì)瘤組織中高表達(dá)的一種致癌lncRNA。研究表明，在TMZ 耐藥GBM 患者的GBM 組織中，MALAT1 表達(dá)顯著上調(diào)，其通過(guò)抑制微小RNA（microRNA，miRNA）-203 的表達(dá)，導(dǎo)致GBM 對(duì)多種藥物產(chǎn)生耐藥性[25]。Li 等[26]研究表明，下調(diào)MALAT1 的表達(dá)可抑制多藥耐藥蛋白1（multidrug resistance protein 1，MDR1）和多藥耐藥相關(guān)蛋白5（multidrug resistance association protein 5，MPR5）等多藥耐藥相關(guān)基因的表達(dá)，從而達(dá)到使膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)TMZ 增敏的目的。MALAT1 過(guò)表達(dá)可通過(guò)上調(diào)鋅指E 盒結(jié)合同源框1（zinc finger E-box binding homeobox 1，ZEB1）等E-鈣黏蛋白（E-cadherin）的表達(dá)，促進(jìn)上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition，EMT），提高膠質(zhì)瘤的耐藥性。另一項(xiàng)研究表明，MALAT1 表達(dá)下調(diào)可導(dǎo)致耐藥的膠質(zhì)瘤細(xì)胞中miRNA-101 表達(dá)上調(diào)，糖原合成酶激酶（glycogen synthase kinase，GSK）-3β表達(dá)下調(diào)，克服膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)TMZ 耐藥[27]。H19 是另一種常見(jiàn)的致癌lncRNA，常在膠質(zhì)瘤組織和細(xì)胞中過(guò)表達(dá)，尤其在TMZ 耐藥的膠質(zhì)瘤U251 和M059J 細(xì)胞中表達(dá)高度上調(diào)[28]。H19 可使細(xì)胞周期蛋白（cyclin）D1 基因表達(dá)上調(diào)，影響細(xì)胞周期轉(zhuǎn)變，促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖，并防止膠質(zhì)瘤細(xì)胞周期停留在G2/M 期，從而抑制TMZ 誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡[3]。抑制H19 的表達(dá)可使耐藥基因MDR、MRP、三磷酸腺苷結(jié)合盒亞家族G成員2（adenosine triphosphate binding cassette subfamily G member 2，ABCG2）表達(dá)明顯降低，也可通過(guò)上調(diào)E-cadherin 的表達(dá)，降低波形蛋白（vimentin）和ZEB1 的表達(dá)水平，從而抑制EMT 過(guò)程，使膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)TMZ 更加敏感[29]。除上述兩種lncRNA 外，還有一系列其他lncRNA 以多種不同途徑參與調(diào)控膠質(zhì)瘤耐藥[30-46]（表1），這些lncRNA 可以作為克服TMZ 耐藥性的有希望的治療靶點(diǎn)，從而提高TMZ 化療的臨床療效。

表1 lncRNA 對(duì)膠質(zhì)瘤耐藥的調(diào)控

1.3.2 miRNA 對(duì)膠質(zhì)瘤耐藥的調(diào)控 基因翻譯水平可影響各種細(xì)胞進(jìn)程[47]。單個(gè)miRNA 可以同時(shí)影響GBM 中多個(gè)mRNA，而GBM 的單個(gè)mRNA也可被一個(gè)或多個(gè)miRNA 調(diào)節(jié)[48]。近年來(lái)的研究表明，miRNA 異常表達(dá)與膠質(zhì)瘤耐藥密切相關(guān)，且其調(diào)控機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜，常見(jiàn)的調(diào)控方式主要包括介導(dǎo)細(xì)胞凋亡、MGMT 對(duì)DNA 損傷的修復(fù)以及EMT 等[49]。例如，miRNA-221 通過(guò)使其靶點(diǎn)磷酸酶張力蛋白同源物（phosphatase and tensin homolog，PTEN）表達(dá)下調(diào)，激活磷脂酰肌醇-3-羥激酶（phosphatidylinositol 3-hydroxy kinase，PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B，PKB，又稱AKT）信號(hào)通路，并調(diào)控EMT 相關(guān)基因的表達(dá)，促進(jìn)膠質(zhì)瘤耐藥[50]。研究表明，靶向動(dòng)力蛋白3（dynamin 3，DNM3）可誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展及對(duì)TMZ 耐藥[51]。Areeb 等[52]研究表明，miRNA-221 還可以通過(guò)下調(diào)表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）的表達(dá)增強(qiáng)膠質(zhì)瘤對(duì)TMZ 和放療的耐受性。其他多種miRNA 也可通過(guò)靶向不同的mRNA 以多種不同途徑參與膠質(zhì)瘤耐藥[53-62]（表2）。miRNA 表達(dá)與膠質(zhì)瘤化療耐藥密切相關(guān)，目前的研究表明，利用miRNA 抑制劑或類似物降低因miRNA 表達(dá)失調(diào)引起的耐藥，有望成為逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤耐藥的有效方法。

表2 miRNA 對(duì)膠質(zhì)瘤耐藥的調(diào)控

1.4 染色質(zhì)重塑

染色質(zhì)重塑是由三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）供給能量，在染色質(zhì)重塑復(fù)合體的介導(dǎo)下，使得核小體移動(dòng)或解離的過(guò)程。染色質(zhì)重塑復(fù)合體具有ATP 酶活性，根據(jù)發(fā)揮催化作用的ATP 酶亞基的不同，可以將復(fù)合體分為4 類：交配型轉(zhuǎn)換（mating type switching，SWI）/蔗糖不發(fā)酵（sucrose non-fermenting，SNF）復(fù)合體、模擬開(kāi)關(guān)（imitation switch，ISWI）、染色質(zhì)域-解旋酶-DNA 結(jié)合蛋白（chromodomain helicase DNA binding protein，CHD）、INO80。這些復(fù)合體及其相關(guān)蛋白與細(xì)胞周期的激活和抑制、DNA 修復(fù)、DNA 甲基化及DNA 轉(zhuǎn)錄有關(guān)[12]。染色質(zhì)重塑復(fù)合體關(guān)鍵基因的突變可使核小體無(wú)法定位，導(dǎo)致染色質(zhì)重塑失敗，基因表達(dá)異常，最終可能導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生發(fā)展及耐藥的產(chǎn)生[47]。其中，SWI/SNF 復(fù)合體得到了較為充分的研究，SWI/SNF 復(fù)合體的Brahma 相關(guān)基因1（Brahma-related gene 1，BRG1）催化亞基可促進(jìn)GBM 細(xì)胞的惡性表型及對(duì)TMZ 耐藥。研究顯示，敲除BRG1增加了GBM 細(xì)胞對(duì)TMZ 和順鉑的敏感性，BRG1 表達(dá)下調(diào)也增加了GBM 干細(xì)胞在體外對(duì)TMZ 的敏感性。含BRG1 的SWI/SNF 復(fù)合體可調(diào)控多種DNA 修復(fù)途徑，包括通過(guò)同源重組修復(fù)DNA 雙鏈斷裂[63]。Ganguly 等[64]敲低膠質(zhì)瘤起始細(xì)胞（glioma-initiating cell，GIC）X16 中的BRG1，并采用TMZ 處理，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，敲低BRG1后，GIC X16 中MGMT 表達(dá)降低，且對(duì)TMZ 的敏感性顯著提高。由于染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性，靶向染色質(zhì)重塑研究GBM 的化療耐藥是一項(xiàng)艱巨的挑戰(zhàn)，目前的研究集中在利用抗染色質(zhì)重塑劑防止動(dòng)態(tài)染色質(zhì)重排來(lái)克服GBM 的耐藥性。

2 逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤耐藥的表觀遺傳學(xué)方法及前景

隨著對(duì)表觀遺傳學(xué)與膠質(zhì)瘤耐藥機(jī)制關(guān)系研究的不斷深入，從表觀遺傳的角度治療膠質(zhì)瘤，逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤耐藥的前景變得更為明朗。如前所述，MGMT 表達(dá)上調(diào)可促進(jìn)膠質(zhì)瘤對(duì)TMZ 耐藥，抑制MGMT 的表達(dá)為逆轉(zhuǎn)TMZ 耐藥提供了一種可能。β干擾素可通過(guò)下調(diào)MGMT 的表達(dá)抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)TMZ 耐藥，與TMZ 聯(lián)合治療膠質(zhì)瘤為未來(lái)的臨床應(yīng)用提供了廣闊的前景[65]。一氧化氮供體S-亞硝基-N-乙酰青霉胺（S-nitroso-N-acetyl penicillamine，SNAP）也可通過(guò)下調(diào)MGMT 的表達(dá)抑制TMZ 耐藥[66]。另有研究表明，白藜蘆醇可通過(guò)抑制WNT 信號(hào)通路激活、下調(diào)MGMT 的表達(dá)增加膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)TMZ 的敏感性[67]。高選擇性磷酸甘油酸脫氫酶抑制劑NCT503 能夠抑制絲氨酸合成途徑，可能通過(guò)干擾WNT/β-聯(lián)蛋白（β-catenin）通路和活性氧介導(dǎo)的DNA 損傷，降低MGMT 的表達(dá)。因此，NCT503 和TMZ 聯(lián)合治療可能是一種新的治療策略[68]。小分子抑制劑EPIC-0412 可通過(guò)影響p21-E2F 轉(zhuǎn)錄因子1（E2F transcription factor 1，E2F1）軸抑制GBM 細(xì)胞的DNA 損傷修復(fù)，還可以通過(guò)與MGMT啟動(dòng)子區(qū)域的激活轉(zhuǎn)錄因子3（activating transcription factor 3，ATF3）-p-p65-HDAC1軸相互作用使MGMT基因沉默，以增強(qiáng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)TMZ 的敏感性[69]。在膠質(zhì)瘤中，一些特殊的HDAC 也可促進(jìn)膠質(zhì)瘤耐藥。Yelton 和Ray[70]的研究顯示，HDAC 抑制劑可引起組蛋白或非組蛋白乙?；黾樱鼓z質(zhì)瘤細(xì)胞染色質(zhì)構(gòu)象更為開(kāi)放，更易于TMZ 破壞DNA，這也提供了一種繞開(kāi)TMZ 耐藥治療膠質(zhì)瘤的方法。妥巴他汀A 是一種HDAC抑制劑，可以逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤EMT 進(jìn)程，進(jìn)而增強(qiáng)TMZ 誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡[71]。NBM-BMX 是一種HDAC8 抑制劑，可通過(guò)下調(diào)β-catenin/c-Myc/SOX2信號(hào)通路促進(jìn)細(xì)胞凋亡，這種抑制劑也可以抑制MGMT 的表達(dá)，使膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)TMZ 增敏[72]。下調(diào)SWI/SNF 復(fù)合體的BRG1 催化亞基的表達(dá)也為逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤耐藥提供了一種可能，BRG1 溴結(jié)構(gòu)域抑制劑PFI-3 增強(qiáng)了TMZ 在GBM 細(xì)胞中的抗腫瘤活性，也可達(dá)到克服耐藥的目的[73]。研究表明，仿生納米聲敏劑系統(tǒng)與無(wú)創(chuàng)超聲驅(qū)動(dòng)相結(jié)合，可有效穿過(guò)血腦屏障，靶向遞送化療藥物，產(chǎn)生的活性氧不僅可以誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡，還可以下調(diào)耐藥相關(guān)因子的表達(dá)，增強(qiáng)化療敏感性[74]。另外，一系列非編碼RNA 也為逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤耐藥提供了可能的位點(diǎn)，這有待于進(jìn)一步的研究。

3 小結(jié)與展望

近年來(lái)，研究者對(duì)表觀遺傳學(xué)在膠質(zhì)瘤耐藥中調(diào)控機(jī)制的不斷深入研究，為未來(lái)膠質(zhì)瘤的治療提供了新的方向，為逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤耐藥提供了新的可能。MGMT、HDAC等基因表達(dá)上調(diào)、SWI/SNF復(fù)合體的BRG1 催化亞基以及一系列非編碼RNA都可以促進(jìn)膠質(zhì)瘤耐藥，同時(shí)也為逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤耐藥提供了可能。MGMT、BRG1 以及一些特定的HDAC 抑制劑對(duì)逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤耐藥、提高治愈率具有重要作用。TMZ 與抑制劑聯(lián)合治療可更好地發(fā)揮TMZ 的療效，達(dá)到治療膠質(zhì)瘤的目的。然而膠質(zhì)瘤的耐藥機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜，在表觀遺傳學(xué)的影響下膠質(zhì)瘤的發(fā)展及預(yù)后更加難以預(yù)測(cè)，未發(fā)現(xiàn)的耐藥機(jī)制以及各種機(jī)制間的補(bǔ)償作用也導(dǎo)致目前解決膠質(zhì)瘤耐藥的效果不是很理想。因此今后的研究可以著手于目前尚不明確的耐藥機(jī)制以及耐藥機(jī)制間的補(bǔ)償作用，為逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤耐藥提供更多可能，并開(kāi)發(fā)更多可逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤耐藥的藥物或其他化療藥物。希望未來(lái)能夠早日突破膠質(zhì)瘤耐藥難題，改善患者預(yù)后。