蔣學(xué)峰,楊繼黎,呂菊芬,焦 曉,高小娜,張冰美,魏建華

慢阻肺現(xiàn)已成為繼心臟病和腦卒中后,全球人類死亡的第三大原因,我國(guó)40歲以上人群慢阻肺患病率已達(dá)到13.7%,是我國(guó)第三大慢性疾病[1]。肺結(jié)核仍然是嚴(yán)重危害人們生命健康的呼吸道傳染性疾病,也是我國(guó)發(fā)病和死亡人數(shù)最多的傳染病之一[2]。耐藥結(jié)核中耐多藥結(jié)核(MDR-TB)易造成 MDR-TB 傳染[2]。2017年,全世界利福平耐藥結(jié)核病患者55.8 萬(wàn)人,其中 82%為耐多藥結(jié)核病[3],尤其對(duì)于老年COPD患者來(lái)說(shuō)這使其結(jié)核病治愈更加困難[4]。因此,結(jié)核分枝桿菌感染患者的耐藥監(jiān)測(cè)顯得尤為關(guān)鍵[5]。本研究通過(guò)對(duì)兩組患者利福平耐藥情況進(jìn)行分析,找出其特點(diǎn),為在一線的臨床醫(yī)生提供診斷及治療的依據(jù),更好地幫助患者治療疾病,遏制結(jié)核傳播。

1 資料與方法

1.1 一般資料:選擇2022年1月1日至2023年6月30日在我院住院,經(jīng)結(jié)核分枝桿菌rpoB基因和突變檢測(cè)為陽(yáng)性患者221例,其中慢阻肺合并初治菌陽(yáng)肺結(jié)核患者共[6-7]94例,其中男性48例,女性46例,平均年齡(65.93±12.71)歲; 單純初治菌陽(yáng)肺結(jié)核患者127例,男性61例,女性66例,平均年齡(52.62±20.68)歲。本研究已通過(guò)寧夏回族自治區(qū)第四人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 結(jié)核分枝桿菌rpoB基因和其突變的檢測(cè)方法:采用GeneXpert MTB/RIF,它是一種MTB的新型檢測(cè)方法,也是世界衛(wèi)生組織推薦用于結(jié)核病早期診斷和利福平耐藥檢測(cè)的分子診斷技術(shù)[8],集樣品準(zhǔn)備、定量PCR擴(kuò)增和熒光檢測(cè)集于一身并可自動(dòng)進(jìn)行核酸分析。

1.2.2 操作方法:采集患者的晨痰作為檢測(cè)標(biāo)本,經(jīng)過(guò)處理后放入GeneXpert MTB/RIF儀檢測(cè)口開(kāi)始檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌rpoB基因?yàn)殛?yáng)性時(shí),即分子生物學(xué)確診肺結(jié)核,同時(shí)做結(jié)核分枝桿菌rpoB基因突變檢測(cè),結(jié)果分為基因突變型和野生型菌株,即分為利福平耐藥和利福平敏感菌株。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:應(yīng)用SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)軟件,計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)、Fisher確切概率法,以P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 慢阻肺合并初治菌陽(yáng)肺結(jié)核患者結(jié)核分枝桿菌rpoB基因和其突變檢測(cè)結(jié)果:突變(利福平耐藥)21例(22.3%),野生型(利福平敏感)73例(77.7%);單純初治菌陽(yáng)肺結(jié)核患者結(jié)核分枝桿菌rpoB基因突變(利福平耐藥)15例(11.8%),野生型(利福平敏感)112例(88.2%),2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表1。

表1 慢阻肺合并初治菌陽(yáng)肺結(jié)核與初治菌陽(yáng)肺結(jié)核的兩組患者結(jié)核分枝桿菌rpoB基因和突變[n(%)]

2.2 不同性別慢阻肺合并初治菌陽(yáng)肺結(jié)核患者結(jié)核分枝桿菌rpoB基因突變比較:不同性別慢阻肺合并初治菌陽(yáng)肺結(jié)核患者結(jié)核分枝桿菌rpoB基因突變比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);單純初治菌陽(yáng)肺結(jié)核患者結(jié)核分枝桿菌rpoB基因突變?cè)谛詣e方面進(jìn)行對(duì)比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見(jiàn)表2。

表2 兩組不同患者結(jié)核分枝桿菌rpoB基因突變性別比較

2.3 不同年齡慢阻肺合并初治菌陽(yáng)肺結(jié)核患者結(jié)核分枝桿菌rpoB基因突變比較:不同年齡慢阻肺合并初治菌陽(yáng)肺結(jié)核患者結(jié)核分枝桿菌rpoB基因突變比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),在50～59歲及年齡≥70歲年齡段,耐利福平率偏高,分別占比33.3%、28.9%,見(jiàn)表3。

表3 不同年齡組慢阻肺合并初治菌陽(yáng)肺結(jié)核患者結(jié)核分枝桿菌rpoB基因突變[n(%)]

2.4 不同年齡單純初治菌陽(yáng)肺結(jié)核患者結(jié)核分枝桿菌rpoB基因突變比較:不同年齡單純初治菌陽(yáng)肺結(jié)核患者結(jié)核分枝桿菌rpoB基因突變對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),在年齡<20歲年齡段利福平耐藥率偏高,占比28.6%,見(jiàn)表4。

表4 不同年齡單純初治菌陽(yáng)肺結(jié)核患者結(jié)核分枝桿菌rpoB基因突變分析[n(%)]

3 討論

根據(jù)相關(guān)報(bào)道,慢阻肺合并初治肺結(jié)核患者結(jié)核分枝桿菌rpoB基因突變(利福平耐藥)率為17.42%,初治肺結(jié)核利福平耐藥率為13.04%[9]。本研究結(jié)果顯示,對(duì)慢阻肺合并初治菌陽(yáng)肺結(jié)核患者94 例菌株經(jīng)基因測(cè)序,15例發(fā)生rpoB 基因突變,突變率(利福平耐藥率)為22.3%,單純初治菌陽(yáng)肺結(jié)核127例,127例菌株經(jīng)基因測(cè)序,21 例發(fā)生 rpoB 基因突變,突變率(利福平耐藥率)為11.8%,與報(bào)道基本一致。本研究中兩組患者利福平耐藥率與性別無(wú)關(guān)。慢阻肺合并初治菌陽(yáng)肺結(jié)核患者利福平耐藥率以中老年較高,單純初治菌陽(yáng)肺結(jié)核患者利福平耐藥率以青年較高。

慢性阻塞性肺疾病患者同時(shí)在并發(fā)肺結(jié)核時(shí),其肺結(jié)核的早期癥狀容易被其他癥狀掩蓋,因此很容易被患者忽視,并且容易導(dǎo)致發(fā)生漏診和誤診,從而延誤其治療[9]。耐多藥結(jié)核病是結(jié)核分枝桿菌對(duì)異煙肼和利福平同時(shí)耐藥,這兩種藥物目前是較為有效的抗結(jié)核藥物[9]。之所以選擇利福平耐藥監(jiān)測(cè)是因?yàn)樗侵委熃Y(jié)核病最為關(guān)鍵的藥物,對(duì)生長(zhǎng)緩慢和處于靜止期的結(jié)核桿菌均有殺滅作用。有學(xué)者報(bào)道,90%以上的利福平耐藥株同時(shí)對(duì)異煙肼耐藥,結(jié)核分枝桿菌的利福平耐藥性與RNA聚合酶β亞基的rpoB基因相關(guān),rpoB 基因突變與結(jié)核分枝桿菌對(duì)利福平耐藥相關(guān)性達(dá)90%以上[10-12]。因此,對(duì)慢阻肺合并初治菌陽(yáng)肺結(jié)核患者進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌rpoB基因突變(即利福平耐藥)檢測(cè),有利于及時(shí)發(fā)現(xiàn)、快速診斷其是否為利福平耐藥病例,且有利于更好地實(shí)施治療,達(dá)到有效控制疾病的目的。