唐渙垚,易如嵐,2,梁小玲,王 旭,冉啟鵬,周 亮,3

(1.遵義醫(yī)科大學(xué) 腦科學(xué)特色重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,貴州 遵義 563099;2.遵義醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院 麻醉科,貴州 遵義563099;3.遵義醫(yī)科大學(xué) 貴州省麻醉與器官保護(hù)基礎(chǔ)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,貴州 遵義 563099)

髓鞘為包繞于有髓神經(jīng)纖維軸突外的脂質(zhì)細(xì)胞膜,它由髓鞘生成細(xì)胞的膜構(gòu)成。中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system,CNS)髓鞘形成細(xì)胞為少突膠質(zhì)細(xì)胞而周圍神經(jīng)系統(tǒng)(peripheral nervous system ,PNS)則為施萬(wàn)細(xì)胞。髓鞘為維持神經(jīng)系統(tǒng)正常生理功能所必需,外周脫髓鞘病變主要有炎癥、遺傳介導(dǎo)的罕見病及創(chuàng)傷和毒素接觸引起外周髓鞘的直接損害,未得到及時(shí)救治可導(dǎo)致截肢和腎衰的嚴(yán)重惡果。哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)是mTOR信號(hào)通路中的核心角色,它根據(jù)多種生長(zhǎng)因子、細(xì)胞能量狀態(tài)和氨基酸水平調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)和代謝平衡。mTORC1可由結(jié)節(jié)性硬化癥復(fù)合體(tuberous sclerosis complex, TSC)蛋白、Hamartin(TSC1)和Tuberin(TSC2)形成的GTPase激活異二聚體蛋白復(fù)合物所抑制。TSC嚴(yán)重影響CNS和PNS的神經(jīng)元功能,導(dǎo)致認(rèn)知障礙、癲癇、自閉癥和白質(zhì)異常。有研究表明在少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(oligodendrocyte progenitor cells, OPCs)中TSC1或TSC2的缺失會(huì)激活 mTORC1 從而導(dǎo)致髓鞘發(fā)育不全[1],但具體機(jī)制仍有待探索。富亮氨酸膠質(zhì)瘤失活蛋白1 (leucine rich glioma inactivated 1, Lgi1)是一種神經(jīng)元分泌的蛋白,對(duì)腦的發(fā)育、維持神經(jīng)元興奮性及突觸傳遞起著至關(guān)重要的作用,并與神經(jīng)系統(tǒng)疾病關(guān)系密切。Lgi1缺失可使大腦皮層中神經(jīng)元無(wú)序分層[2]和降低胚胎期小腦外顆粒細(xì)胞層的厚度[3-4]。更重要的是,Lgi1已被證實(shí)與中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘化以及少突膠質(zhì)細(xì)胞分化有關(guān)[5]。另外,Lgi家族另一成員Lgi4作為PNS內(nèi)施萬(wàn)細(xì)胞髓鞘化的啟動(dòng)器,其功能缺失可引起小鼠爪-爪表型(claw-paw phenotype, clp),這是由于PNS中髓鞘化不全所致[6]。此外,Lgi4與人解整合素金屬蛋白酶22 (Monoclonal Antibody to A Disintegrin And Metalloprotease 22, ADAM22)相互作用加強(qiáng)了軸突與施萬(wàn)細(xì)胞的細(xì)胞間相互作用,是PNS的髓鞘化的關(guān)鍵[7-8]。既往研究顯示Lgi1可在谷氨酸突觸可塑性[8-12]和海馬中谷氨酸的傳遞[13-14]過(guò)程中起調(diào)節(jié)作用。本課題組前期研究還發(fā)現(xiàn),Lgi1能直接與Kv1.2結(jié)合參與大腦皮層錐體神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢坏恼{(diào)節(jié)[15],然而目前對(duì)Lgi1和PNS髓鞘化關(guān)系的研究還很少,本文采用免疫組織化學(xué)、蛋白質(zhì)印跡法和電鏡等手段對(duì)它們的關(guān)系進(jìn)行了研究,并對(duì)其可能信號(hào)通路進(jìn)行了分析。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 8～12周齡清潔級(jí)Lgi1+/-小鼠,體重20～25 g,Lgi1+/-小鼠由浙江大學(xué)沈穎教授提供,在遵義醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心飼養(yǎng)。小鼠可自由活動(dòng)、飲水、攝食,飼養(yǎng)房以12 h/12 h的明暗循環(huán)(08∶00 關(guān)燈,20∶00 開燈),環(huán)境溫度維持在 20～24 ℃,相對(duì)濕度維持在60 %左右。

1.1.2 儀器與試劑 激光共聚焦熒光顯微鏡(日本奧林巴斯,FV1000);Ultracut UCT(德國(guó),Leica);飛利浦CM100顯微鏡(美國(guó),FEI);髓磷脂堿性蛋白(MBP)、髓磷脂少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(MOG)、髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)、GAPDH抗體(美國(guó)Millipore公司);S6、pS6-S240/244、TSC1(美國(guó)Cell Signaling Technology公司);Lgi1、Lgi4、外周髓磷脂P0蛋白(MPZ)、整合素β1(β1-integrin)、脂肪酸合成酶(FASN,英國(guó)Abcam公司);整合素β4(β4-integrin)、筏蛋白(Flotillin,美國(guó)BD Biosciences公司);整合素α1(α1-integrin,美國(guó)Santa Cruz公司);層粘連蛋白抗體(Laminin,美國(guó)Sigma公司);HRP二抗(美國(guó)Thermo公司);Alexa Fluor二抗(美國(guó)Invitrogen公司);蛋白酶抑制劑(美國(guó)Roche公司)。

1.2 方法

1.2.1 免疫組織化學(xué) (1)樣本處理：分離出生后第14天(P14)Lgi1-/-小鼠的坐骨神經(jīng),使用4% PFA在4 ℃下進(jìn)行固定處理,過(guò)夜后在30%蔗糖中脫水;(2)用OCT冷凍組織,進(jìn)行10 μm切片;將腦片置于封閉液(10%山羊血清、1% BSA和0.3% Triton溶于PBS)中,室溫靜置2 h,用一抗孵育過(guò)夜(MBP為1∶1 000;MPZ為1∶200;Laminin為1∶100),洗滌3次后用二抗孵育2 h;(3)共聚焦顯微鏡分析：在激光共聚焦熒光顯微鏡上拍攝,隨后利用美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院開發(fā)的Image J軟件進(jìn)行分析。

1.2.2 蛋白質(zhì)印跡法(Western blot) 取P14的Lgi1-/-小鼠坐骨神經(jīng),置于含有蛋白酶抑制劑的蛋白裂解液(PBS+2 % SDS)中超聲裂解,BCA檢測(cè)蛋白質(zhì)濃度,通過(guò)10%～15%凝膠電泳后轉(zhuǎn)移至PVDF膜上,與抗體Lgi1、MAG、Laminin、β1-integrin、β4-integrin、FASN、TSC1、S6、Lgi4(稀釋度1∶1 000);α1-integrin(稀釋度1∶200);MBP、MOG、MPZ、Flotillin、pS6-S240/244、GAPDH(稀釋度1∶10 000)孵化,次日將膜與二抗在室溫下孵育1 h,化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)各蛋白信號(hào),并用ImageJ 1.42q(NIH)定量分析。

1.2.3 電鏡 經(jīng)Ultracut UCT處理后的超薄切片用2%醋酸鈾和檸檬酸鉛對(duì)坐骨神經(jīng)樣本染色,利用飛利浦CM100顯微鏡采集圖像,Image J軟件對(duì)軸突直徑/纖維直徑的比率(g-ratio)進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 在PNS發(fā)育過(guò)程中坐骨神經(jīng)Lgi1的表達(dá)情況 蛋白質(zhì)印跡法結(jié)果顯示,Lgi1在產(chǎn)后PNS發(fā)育過(guò)程中在SN中穩(wěn)定表達(dá)(圖1A、B),而既往研究結(jié)果顯示在產(chǎn)后中樞神經(jīng)髓鞘化的過(guò)程中,Lgi1與MBP的表達(dá)在大腦發(fā)育期呈正相關(guān)(圖1C、D)。因此,這些結(jié)果提示Lgi1在PNS和CNS髓鞘化中可能發(fā)揮不同的作用。

A：蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)產(chǎn)后3～60 d坐骨神經(jīng)中Lgi1、MBP、MPZ的表達(dá);B：Lgi1和MPZ的信號(hào)強(qiáng)度曲線;C：蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)產(chǎn)后3～60 d大腦中Lgi1、MBP的表達(dá);D：Lgi1和MBP的信號(hào)強(qiáng)度曲線。圖1 Lgi1在坐骨神經(jīng)與腦中的蛋白表達(dá)

2.2 Lgi1缺失導(dǎo)致PNS低髓鞘化 為了進(jìn)一步探究Lgi1在PNS髓鞘化中的作用,首先利用蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)基因敲除Lgi1 -/-小鼠P14時(shí)SN中的蛋白表達(dá)情況,結(jié)果顯示髓鞘相關(guān)蛋白MBP、MOG和MAG與外周特異性髓鞘蛋白MPZ的表達(dá)水平較對(duì)照組減少(MBP：1.01±0.08 vs 0.63±0.08,P<0.01;MPZ：0.99±0.10 vs 0.59±0.10,P<0.01 ;MOG：1.02±0.08 vs 0.72±0.07,P<0.05;MAG：0.98±0.04 vs 0.53±0.10,P<0.05;圖2A、B);免疫熒光染色結(jié)果顯示Lgi1-/-小鼠的MBP和MPZ信號(hào)較弱,與蛋白質(zhì)印跡法結(jié)果一致(圖2C)。此外,通過(guò)電鏡觀察實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組小鼠SN的髓鞘,發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組小鼠SN中無(wú)髓鞘的軸突數(shù)量增加,且無(wú)髓鞘軸突出現(xiàn)堆積(圖2D、E),這與免疫熒光染色所觀察到擴(kuò)大的無(wú)髓鞘區(qū)域一致(圖2C箭頭所示);其次分析g-ratio結(jié)果表明比率增加,這意味著Lgi1-/-小鼠SN中髓鞘厚度減少(圖2F);以及Lgi1-/-小鼠的髓鞘呈現(xiàn)異常折疊(圖2D),這些結(jié)果提示Lgi1調(diào)節(jié)PNS髓鞘裝配過(guò)程。結(jié)合蛋白質(zhì)印跡法、免疫組織化學(xué)與電鏡結(jié)果,證明Lgi1-/-小鼠表現(xiàn)出生后PNS髓鞘發(fā)育障礙。

A：蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)P14 Lgi1-/-小鼠SN中MBP、MPZ、MOG、MAG與Lgi1的表達(dá);B：Lgi1-/-小鼠的MBP、MPZ、MOG和MAG的蛋白水平統(tǒng)計(jì)結(jié)果(n = 4; MBP, P = 0.0032; MPZ, P = 0.0033; MOG, P = 0.026; MAG, P = 0.021);C：MBP和MPZ雙染色,白色箭頭表示無(wú)髓鞘區(qū)域擴(kuò)大,標(biāo)尺=50 μm;D：電鏡觀察Lgi1-/-小鼠與對(duì)照組髓鞘變化,紅色星號(hào)表示無(wú)髓軸突,紅色箭頭表示異常折疊的髓鞘,標(biāo)尺=2 μm(左圖),1 μm(右圖);E：P14 Lgi1-/-小鼠與對(duì)照組SN橫截面有髓軸突數(shù)量統(tǒng)計(jì)結(jié)果(n = 5,P = 0.029);F：P14 Lgi1-/-小鼠與對(duì)照組軸突直徑和g-ratio的關(guān)系(n = 5,P = 0.014);*、**： P <0.05、P <0.01。圖2 Lgi1缺失導(dǎo)致周圍神經(jīng)系統(tǒng)低髓鞘化和異常的超微結(jié)構(gòu)

2.3Lgi1通過(guò)Laminin-integrin信號(hào)系統(tǒng)調(diào)節(jié)髓鞘的組裝 Laminin與integrin是髓鞘形成過(guò)程中的關(guān)鍵因素,蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)結(jié)果顯示Laminin、integrinβ-1、integrinβ-4在Lgi1-/-小鼠SN中的表達(dá)明顯減少(Laminin：1.00±0.10 vs 0.76±0.06,P<0.05;integrinβ-1：0.98±0.09 vs 0.57±0.07,P<0.01 ;integrinβ-4：1.02±0.09 vs 0.55±0.12,P<0.01),integrin α-1表達(dá)增加(integrin α-1：1.02±0.09 vs 1.39±0.12,P<0.05),見圖3A、B。這一結(jié)果與Brain組中Laminin-integrin信號(hào)變化相似(Laminin：1.01±0.13 vs 0.69±0.08,P<0.05;integrinβ-1：0.98±0.06 vs 0.60±0.03,P<0.01;integrinβ-4：1.02±0.09 vs 0.51±0.15,P<0.05, integrin α-1：1.00±0.07 vs 1.68±0.26,P<0.01),見圖3C、D,表明Lgi1可能參與調(diào)節(jié)PNS與CNS的髓鞘裝配。與既往研究結(jié)果一致,Laminin-integrin信號(hào)系統(tǒng)的變化可影響髓鞘形成。MBP與Laminin雙重染色顯示Lgi1-/-小鼠SN中兩者重合部分減少(圖3E),表明MBP不能定位在髓鞘膜的正確位置,這可能是引起髓鞘裝配異常的原因之一(圖2D)。此外,對(duì)比了Lgi1-/-小鼠大腦中胞膜成分中髓鞘相關(guān)蛋白的變化,結(jié)果表明MBP和MAG在膜上的含量也減少(MBP：1.00±0.00 vs 0.64±0.06,P<0.01;MAG：1.00±0.00 vs 0.54±0.07,P<0.01(圖3F、G),也提示Lgi1敲除導(dǎo)致髓鞘結(jié)構(gòu)異常。

A：蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)P14 Lgi1-/-小鼠SN中Laminin、Integrin β1、Integrin β4 and Integrin α1的表達(dá);B：Lgi1-/-小鼠SN中Laminin、Integrin β1、Integrin β4 and Integrin α1的蛋白水平統(tǒng)計(jì)結(jié)果(n=4; Laminin, P =0.035; Integrin β1, P =0.0065; Integrin β4, P =0.0098; Integrin α1, P =0.026);C：MBP和Laminin雙染色,白色箭頭表示MBP與層粘連蛋白共標(biāo)的纖維,MBP未能與Laminin共標(biāo)區(qū)域增加(白色星號(hào)),標(biāo)尺=50 μm;D：蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)P14 Lgi1-/-小鼠腦中Laminin、Integrin β1、 Integrin β4 、 Integrin α1的表達(dá);E：Lgi1-/-小鼠腦中Laminin、 Integrin β1、Integrin β4、Integrin α1的蛋白水平統(tǒng)計(jì)結(jié)果(n=4; Laminin, P =0.026; Integrin β1, P =0.0041; Integrin β4, P =0.019; Integrin α1, P =0.011);F：蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)P14 Lgi1-/-小鼠大腦的總蛋白和膜蛋白中MBP、MAG、Flotillin的表達(dá);G：P14 Lgi1-/-小鼠大腦的總蛋白和膜蛋白中MBP、MAG蛋白水平統(tǒng)計(jì)結(jié)果(n = 4; MBP, P = 0.011; MAG, P = 0.0017); * 、**：P <0.05、P <0.01。圖3 Lgi1的缺失破壞了依賴Laminin-integrin信號(hào)系統(tǒng)的髓鞘裝配

2.4Lgi1通過(guò)TSC1-mTORC1信號(hào)通路影響PNS的脂質(zhì)合成 脂質(zhì)合成為髓鞘的多層膜結(jié)構(gòu)提供了物質(zhì)基礎(chǔ)。在Lgi1-/-小鼠SN中觀察到g-ratio和異常折疊的髓鞘增加(圖2),因此進(jìn)一步探索Lgi1的缺失是否會(huì)影響SN脂質(zhì)合成。蛋白質(zhì)印跡法結(jié)果顯示與對(duì)照組相比,Lgi1-/-小鼠中FASN蛋白表達(dá)量較少(0.99±0.12 vs 0.57±0.07,P<0.05,圖4A、B),與之前發(fā)現(xiàn)的Lgi1-/-小鼠大腦中FASN表達(dá)降低一致(0.99±0.12 vs 0.57±0.07,P<0.05,圖4C、D)。這些結(jié)果表明,Lgi1-/-小鼠SN中受損的髓鞘層可能是由PNS中的脂質(zhì)合成障礙引起的。據(jù)報(bào)道,TSC1-mTOR信號(hào)是CNS和PNS髓鞘化的重要影響因素,mTOR影響各種細(xì)胞系的脂質(zhì)合成,包括少突膠質(zhì)細(xì)胞。利用蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)TSC1-mTORC1信號(hào),在Lgi1-/-小鼠SN中,mTORC1信號(hào)被激活,表現(xiàn)為pS6水平增加和TSC1表達(dá)減少(1.00±0.12 vs 2.43±0.17,P<0.01;1.03±0.08 vs 0.50±0.12,P<0.01,圖4A、B),證明了Lgi1基因敲除會(huì)激活mTORC1信號(hào),抑制FASN表達(dá)與脂類合成從而阻止髓鞘的形成并導(dǎo)致PNS低髓鞘化。

A：蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)P14 Lgi1-/-小鼠SN中FASN、pS6、S6和TSC1的表達(dá);B：Lgi1-/-小鼠SN中FASN、pS6、S6和TSC1的蛋白水平統(tǒng)計(jì)結(jié)果(n = 4;FASN,P = 0.037;pS6/S6,P = 0.0078;TSC1,P = 0.0085);C：蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)P14 Lgi1-/-小鼠腦中FASN、pS6、S6和TSC1的表達(dá);D：Lgi1-/-小鼠腦中FASN、pS6、S6和TSC1的蛋白水平統(tǒng)計(jì)結(jié)果(n = 4;FASN,P = 0.0057;pS6/S6,P = 0.0063;TSC1,P = 0.017);*、** ：P <0.05, P <0.01。圖4 Lgi1的缺失降低脂肪酸合成酶的表達(dá)并激活mTORC1信號(hào)通路

3 討論

本課題組之前的研究揭示了Lgi1在中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘化中的作用[3],有研究表明,Lgi1缺失會(huì)損害PNS和CNS形成髓鞘的過(guò)程[16]。然而,Lgi1在PNS髓鞘化的作用機(jī)制仍是未知的。本研究證明Lgi1的缺失會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)后PNS的低髓鞘化和髓鞘超微結(jié)構(gòu)的改變且可能通過(guò)兩種方式影響PNS髓鞘化：一種是通過(guò)Laminin-integrin信號(hào)系統(tǒng)調(diào)節(jié)髓鞘的裝配;另一種是通過(guò)改變TSC1-mTORC1的信號(hào)傳導(dǎo)來(lái)控制脂質(zhì)的生物合成。

據(jù)報(bào)道,在CNS中Lgi1與MBP的表達(dá)呈正相關(guān)[4],然而本實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明了Lgi1可能以不同的方式調(diào)控PNS和CNS的髓鞘化,Lgi1敲除小鼠的PNS和CNS的髓鞘結(jié)構(gòu)存在差異。其中的原因可能是Lgi1與Lingo-1結(jié)合以介導(dǎo)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的髓鞘化,且Lingo-1只在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中表達(dá),并對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的髓鞘化進(jìn)行負(fù)向調(diào)節(jié)[4,17-19];而另一種解釋則是Lgi家族的另一個(gè)成員Lgi4,其被確定為PNS中施萬(wàn)細(xì)胞髓鞘化的一個(gè)關(guān)鍵因子[5,20]。據(jù)報(bào)道,Lgi4主要在PNS膠質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)[20],結(jié)合我們的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),PNS髓鞘化可能由Lgi1和Lgi4共同控制。

在PNS中,基底膜(basement membranes,BMs)通過(guò)促進(jìn)徑向軸突排序,在施萬(wàn)細(xì)胞成熟過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用[21-23]。這一過(guò)程依賴于層粘連蛋白和整合素與BM配體的結(jié)合,從而介導(dǎo)施萬(wàn)細(xì)胞髓鞘化[24-28]。層粘連蛋白通過(guò)在施萬(wàn)細(xì)胞表面組裝BMs,導(dǎo)致整合素β1和其他受體的激活,促進(jìn)PNS早期髓鞘化。本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示,Lgi1-/-小鼠SN中層粘連蛋白水平下降,整合素表達(dá)改變,證明Lgi1可能通過(guò)Laminin-integrin信號(hào)系統(tǒng)動(dòng)態(tài)地參與調(diào)節(jié)髓鞘化。此外,Lgi1-/-小鼠坐骨神經(jīng)的電鏡圖像顯示了髓鞘層的缺失和g-ratio的增加,再加上MBP信號(hào)未能與膜上的層粘連蛋白定位,認(rèn)為L(zhǎng)gi1可能通過(guò)層粘連蛋白-整合素的方式調(diào)節(jié)髓鞘的裝配。一種可能的機(jī)制是Lgi1與Adam22結(jié)合從而調(diào)節(jié)與整合素相關(guān)的功能,如癲癇和軸突排序[10,29]。在PNS中,Lgi4也與Adam22相互作用,介導(dǎo)其在施萬(wàn)細(xì)胞髓鞘化中的作用。而Adam22的缺失表現(xiàn)為PNS的低髓鞘化,因此假設(shè)Lgi1通過(guò)調(diào)控層粘連蛋白-整合素介導(dǎo)的髓鞘裝配來(lái)控制PNS的髓鞘化。

PNS和CNS髓鞘化都需要mTORC1的參與[30-38]。Zou等[30]報(bào)道,TSC1-mTORC1信號(hào)以時(shí)間特異性的方式控制施萬(wàn)細(xì)胞的髓鞘化：在施萬(wàn)細(xì)胞前體細(xì)胞中特異性敲除TSC1會(huì)引起mTOR的激活,從而導(dǎo)致髓鞘缺陷。相反,成熟施萬(wàn)細(xì)胞中的TSC1缺失會(huì)導(dǎo)致成年小鼠的高髓鞘化。目前的研究表明,Lgi1的缺乏激活了mTORC1,并降低了TSC1的表達(dá),Lgi1-/-小鼠表現(xiàn)出脂質(zhì)合成減弱和異常折疊髓鞘增加,證實(shí)了TSC1-mTORC1通路在PNS髓鞘化中的重要性[35-36]。另一方面,本課題組以前的研究結(jié)果顯示,Lgi1也通過(guò)TSC1-mTORC1介導(dǎo)脂質(zhì)合成以控制中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘化[4]。綜上所述,除了上述可能的不同調(diào)控,Lgi1在PNS和CNS髓鞘化中至少有部分共同機(jī)制。同樣,細(xì)胞特異性的Lgi1敲除模型對(duì)于闡明Lgi1在PNS和CNS髓鞘化中的精確機(jī)制至關(guān)重要。

總之,本研究明確了Lgi1參與調(diào)控PNS髓鞘化,特異性敲除Lgi1會(huì)引起髓鞘相關(guān)蛋白表達(dá)下降與髓鞘超微結(jié)構(gòu)異常,從而引起SN低髓鞘化,并明確了Lgi1可能通過(guò)Laminin-integrin信號(hào)介導(dǎo)的髓鞘裝配以及TSC1-mTORC1依賴的脂類合成參與調(diào)控PNS髓鞘化,為深入研究Lgi1在PNS和CNS髓鞘化中的作用提供一種全新思路。