張哲,張紅肖,2,嚴(yán)立斌,3*,孟雅寧,范妍芹
(1.河北省農(nóng)林科學(xué)院經(jīng)濟作物研究所,河北 石家莊 050051;2.河北科技師范學(xué)院園藝科技學(xué)院,河北 秦皇島 066600;3.河北省蔬菜技術(shù)創(chuàng)新中心,河北 石家莊 050051)
雞澤辣椒果實色澤紫紅、表皮光滑,形狀細長、尖上帶鉤,風(fēng)味獨特,具有皮薄、肉厚、色鮮、味香、辣度適中、Vc 含量高等特點,廣受消費者的喜愛[1]。雞澤辣椒常年栽培面積為5 333.33 hm2以上,占河北省辣椒栽培總面積的近20%[2]。雞澤縣年加工鮮椒60萬t,占河北省辣椒加工總量的78.9%;當(dāng)?shù)乩苯樊a(chǎn)業(yè)年產(chǎn)值達40 億元以上,占全省辣椒產(chǎn)業(yè)年產(chǎn)值的55.5%,在河北省辣椒產(chǎn)業(yè)中具有重要地位[2]。但由于雞澤縣辣椒地方品種混雜,且不同類型的新品種不斷增多,導(dǎo)致當(dāng)?shù)乩苯饭麑嵠焚|(zhì)參差不齊,嚴(yán)重影響雞澤縣辣椒產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。因此,建立一個科學(xué)、客觀的辣椒品質(zhì)評價方法具有重要意義。
隸屬函數(shù)值法通過將各品質(zhì)指標(biāo)轉(zhuǎn)化為無量綱數(shù)值,再求出其平均值對果實品質(zhì)進行評定,該方法能夠較客觀地反映品質(zhì)測評結(jié)果,已廣泛應(yīng)用于辣椒、獼猴桃等作物的品質(zhì)評價上[3-8]。但隸屬函數(shù)值法比較的是平均值,忽略了樣本內(nèi)指標(biāo)間的差異,這容易造成篩選的樣本綜合隸屬函數(shù)值高而樣本內(nèi)品質(zhì)指標(biāo)高低不齊,最終可能導(dǎo)致單項指標(biāo)有缺陷的品種被保留,而各指標(biāo)均衡、品質(zhì)優(yōu)異的品種被舍棄。
利用變異系數(shù)(CV)可以比較不同樣本的相對變異程度[9]。前人在進行品質(zhì)評價時,多通過計算同一指標(biāo)、不同樣本間的CV來反映品種間的遺傳多樣性[10-12],很少進行同一樣本內(nèi)不同指標(biāo)之間的CV研究。而通過對同一樣本內(nèi)不同指標(biāo)之間CV進行比較分析,可以有效鑒別樣本內(nèi)品質(zhì)指標(biāo)間的差異程度,彌補隸屬函數(shù)值法忽略樣本內(nèi)指標(biāo)間差異的缺陷。因此,結(jié)合隸屬函數(shù)值和樣本內(nèi)品質(zhì)指標(biāo)的CV,便可以篩選出綜合隸屬函數(shù)值高、樣本內(nèi)各品質(zhì)指標(biāo)均勻的個體。
本研究以收集、鑒定的53 份雞澤辣椒種質(zhì)資源為試驗群體,對其營養(yǎng)物質(zhì)含量進行測定,通過計算各品質(zhì)指標(biāo)的隸屬函數(shù)值,將各指標(biāo)進行歸一化處理,再比較同一樣本內(nèi)不同指標(biāo)之間的CV,利用隸屬函數(shù)值法和變異系數(shù)方法對樣本進行綜合評價,以篩選到各項指標(biāo)均衡、品質(zhì)優(yōu)異的雞澤辣椒資源,并建立一套科學(xué)的品質(zhì)評價方法,旨為今后辣椒品質(zhì)育種和品質(zhì)評價提供新的思路。
試驗用雞澤辣椒為河北省農(nóng)林科學(xué)院經(jīng)濟作物研究所科研人員收集、鑒定的種質(zhì)資源,共計53 份,編號為1~53。
1.2.1 田間試驗設(shè)計 田間試驗在河北省農(nóng)林科學(xué)院河北現(xiàn)代農(nóng)業(yè)試驗園區(qū)(北緯38.065°,東經(jīng)114.455°)進行。2022 年2 月21 日在育苗溫室內(nèi)播種辣椒種子,采用穴盤育苗;4 月18 日露地大小行高壟定植,大行距80 cm,小行距40 cm,株距40 cm;8 月5 日采收。試驗采用品種小區(qū),隨機區(qū)組排列,3 次重復(fù),每小區(qū)定植30 株。辣椒田間栽培管理措施同常規(guī)。
1.2.2 測定項目與方法 采收時,每小區(qū)均隨機選取3 個單株,每株均選取大小和著色均勻一致的辣椒鮮果混合留樣,室內(nèi)統(tǒng)一測定果實品質(zhì)指標(biāo),項目包括可溶性糖、Vc、可溶性蛋白、粗脂肪、纖維素和辣椒堿含量。其中,可溶性糖含量測定采用蒽酮比色法[13];Vc 含量測定采用2,6-二氯酚靛酚滴定法[14];可溶性蛋白含量測定采用考馬斯亮藍法[15];粗脂肪含量測定采用索氏抽提法[16];纖維素和辣椒堿含量測定均采用國標(biāo)法[17,18]。
1.2.3 果實品質(zhì)評價 采用隸屬函數(shù)值法、變異系數(shù)法和聚類分析方法,對辣椒種質(zhì)資源的果實品質(zhì)進行評價。首先,計算出各樣本的綜合隸屬函數(shù)值及樣本內(nèi)各品質(zhì)指標(biāo)隸屬函數(shù)值的CV(為區(qū)分某指標(biāo)樣本間的CV,將樣本內(nèi)各品質(zhì)指標(biāo)隸屬函數(shù)值的CV簡稱為“SDCV”);然后,分別對綜合隸屬函數(shù)值和SDCV進行聚類分析;最后,根據(jù)聚類分析結(jié)果劃分等級,并繪制雷達圖。具體步驟為:
1.2.3.1 指標(biāo)計算。(1)綜合隸屬函數(shù)值。首先,采用隸屬函數(shù)值法,計算果實可溶性糖含量、Vc 含量、可溶性蛋白含量、粗脂肪含量、纖維素含量和辣椒堿含量的隸屬函數(shù)值;然后,通過對雞澤辣椒各品質(zhì)指標(biāo)的隸屬函數(shù)值求平均數(shù),獲得綜合隸屬函數(shù)值。
隸屬函數(shù)值計算公式[13]為:
如果某項指標(biāo)對辣椒品質(zhì)為負影響,需利用反隸屬函數(shù)進行轉(zhuǎn)換。本研究中,纖維素含量對辣椒品質(zhì)為負影響,其隸屬函數(shù)值計算公式[13]為:
式中,D(Xij)為i樣本j指標(biāo)的隸屬函數(shù)值,Xij為i樣本j指標(biāo)的測定值,Xjmin、Xjmax分別為所有材料中j指標(biāo)的最小值和最大值。
(2)SDCV。樣本內(nèi)不同品質(zhì)指標(biāo)的單位不同,需根據(jù)公式(1)和(2)先求出各指標(biāo)的隸屬函數(shù)值,然后再計算其CV,即SDCV,計算公式[9]為:
式中,Si為i樣本各品質(zhì)指標(biāo)隸屬函數(shù)值的標(biāo)準(zhǔn)差,Di為i樣本所有品質(zhì)隸屬函數(shù)值的平均數(shù),SDCV為變異系數(shù)。
樣本內(nèi)各品質(zhì)指標(biāo)隸屬函數(shù)值的標(biāo)準(zhǔn)差(Si)計算公式[9]為:
式中,Si為i樣本內(nèi)各品質(zhì)指標(biāo)隸屬函數(shù)值的標(biāo)準(zhǔn)差,Dij為i樣本j生理指標(biāo)的隸屬函數(shù)值,Di為i樣本所有品質(zhì)生理指標(biāo)的平均隸屬函數(shù)值,n為品質(zhì)指標(biāo)的個數(shù)。
i樣本各品質(zhì)隸屬函數(shù)值的平均數(shù)計算公式[9]為:
式中,各參數(shù)含義同公式(4)。
1.2.3.2 聚類分析。為了更好地對雞澤辣椒種質(zhì)資源的果實品質(zhì)進行評價,采用SPSS v22.0 數(shù)據(jù)處理軟件,分別對綜合隸屬函數(shù)值和SDCV進行聚類分析。
1.2.3.3 雷達圖繪制。根據(jù)綜合隸屬函數(shù)值和SDCV聚類分析結(jié)果,利用Excel 軟件繪制果實品質(zhì)指標(biāo)雷達圖。
參試雞澤辣椒果實的可溶性糖含量為3.02%~6.70%,平均值為5.12%,CV為16.67%;可溶性蛋白含量為8.48%~11.60%,平均值為9.87%,CV為6.50%;纖維素含量為39.33%~50.00%,平均值為44.49%,CV為4.87%;粗脂肪含量為11.02%~14.00%,平均值為12.06%,CV為5.74%;辣椒堿含量為19.9~139.7 mg/kg,平均值為71.7 mg/kg,CV為33.68%;Vc含量為931.8~1 665.3 mg/kg,平均值為1 310.9 mg/kg,CV為11.02%(表1)。前人研究認為,樣本間CV>10%即有較大差異[3]。本研究中,辣椒素、可溶性糖和Vc含量的CV均>10%,表明參試雞澤辣椒的果實品質(zhì)存在較大差異。因此,有必要對雞澤辣椒種質(zhì)資源進行品質(zhì)評價。
表1 參試雞澤辣椒的果實品質(zhì)Table 1 Fruit quality of Jize peppers tested
綜合隸屬函數(shù)值可以客觀地反映果實品質(zhì)的優(yōu)劣,而SDCV代表的是樣本內(nèi)各品質(zhì)指標(biāo)整齊度的高低。參試雞澤辣椒果實品質(zhì)的綜合隸屬函數(shù)值為0.26~0.71,SDCV為8.27%~78.23%,差異均較大(表2)。表明雞澤辣椒不僅果實綜合品質(zhì)存在較大差異,且樣本內(nèi)各品質(zhì)指標(biāo)的整齊度也存在較大差異。其中,綜合隸屬函數(shù)值>0.60 的材料有10 個,SDCV為12.33%~57.06%;綜合隸屬函數(shù)值為0.40~0.60 的材料有28 個,SDCV為8.27%~78.23%;綜合隸屬函數(shù)值<0.40 的材料有15 個,SDCV為9.05%~65.67%。可以看出,雞澤辣椒果實品質(zhì)綜合隸屬函數(shù)值分布的各個梯度內(nèi),其樣本內(nèi)各品質(zhì)指標(biāo)的整齊度也存在較大差異。因此,隸屬函數(shù)值和SDCV都需要進行分級。
表2 參試雞澤辣椒果實品質(zhì)的綜合隸屬函數(shù)值以及樣本內(nèi)各品質(zhì)指標(biāo)隸屬函數(shù)值的變異系數(shù)(SDCV)Table 2 The comprehensive membership function values of fruit quality of Jize peppers tested and the coefficient of variation of the membership function values of various quality indicators within the sample(SDCV)
為了更好地對雞澤辣椒不同種質(zhì)資源的果實品質(zhì)進行評價,分別對綜合隸屬函數(shù)值和SDCV進行聚類分析。果實品質(zhì)綜合隸屬函數(shù)值聚類分析結(jié)果(圖1)顯示,在歐氏距離5.5 處,參試的53 份雞澤辣椒種質(zhì)資源聚為三大類群:第玉類群有11 份材料,占試材總數(shù)的20.75%,綜合隸屬函數(shù)值最低為0.59;第域類群有29 份材料,占試材總數(shù)的54.72%,綜合隸屬函數(shù)值最低為0.39;第芋類群有13 份材料,占試材總數(shù)的24.53%,綜合隸屬函數(shù)值最低為0.26。SDCV聚類分析結(jié)果(圖2)顯示,在歐氏距離5.5 處,參試的53 份雞澤辣椒種質(zhì)資源聚為三大類群:第玉類群有13 份材料,占試材總數(shù)的24.53%,SDCV最低為8.27%;第域類群有28 份材料,占試材總數(shù)的52.83%,SDCV最低為27.11%;第芋類群有12 份材料,占試材總數(shù)的22.64%,SDCV最低為56.62%。
圖1 參試雞澤辣椒果實品質(zhì)綜合隸屬函數(shù)值的聚類分析Fig.1 Cluster analysis of the comprehensive membership function values of the fruit quality of Jize peppers tested
圖2 參試雞澤辣椒樣本內(nèi)不同品質(zhì)指標(biāo)隸屬函數(shù)值變異系數(shù)(SDCV)的聚類分析Fig.2 Cluster analysis of the coefficient of variation(SDCV)of membership function values for different quality indicators of Jize peppers tested
依據(jù)上述聚類分析結(jié)果,將所有材料果實品質(zhì)的綜合隸屬函數(shù)值和SDCV均劃分為3 個等級。按照綜合隸屬函數(shù)值分類,第玉類綜合隸屬函數(shù)值≥0.59,該類群總體品質(zhì)最好,品質(zhì)分級定為優(yōu);第域類綜合隸屬函數(shù)值為0.39(含)~0.59,該類群綜合品質(zhì)中等,品質(zhì)分級定為中;第芋類綜合隸屬函數(shù)值<0.39,該類群綜合品質(zhì)整體較差,品質(zhì)分級定為差。根據(jù)SDCV分類,第玉類SDCV<27.11%,樣本內(nèi)各項指標(biāo)品質(zhì)均較高或者均較低,整齊度較好,變異等級定為低;第域類SDCV為27.11%(含)~56.62%,樣本內(nèi)品質(zhì)指標(biāo)隸屬函數(shù)值之間有所差異,整齊度次之,變異等級定為中;第芋類SDCV≥56.62%,樣本內(nèi)品質(zhì)指標(biāo)的隸屬函數(shù)值之間差異較大,整齊度最差,變異等級定為高。
從上述研究可知,雞澤辣椒果實品質(zhì)的綜合隸屬函數(shù)值分布的各個梯度內(nèi),SDCV值均存在較大差異,因此,將綜合隸屬函數(shù)值依據(jù)聚類分析結(jié)果分為3 級后,每一級又根據(jù)SDCV聚類分析結(jié)果再分為3 個小級,即53 份雞澤辣椒的果實品質(zhì)共分為9 個等級(表3),并分等級繪制果實品質(zhì)指標(biāo)雷達圖(圖3)。
圖3 雞澤辣椒不同等級材料的果實品質(zhì)指標(biāo)隸屬函數(shù)值分布雷達圖Fig.3 Radar chart of the distribution of membership function values for fruit quality indicators of different grades of Jize pepper
表3 雞澤辣椒果實品質(zhì)評價標(biāo)準(zhǔn)Table 3 Fruit quality evaluation standards for Jize peppers
一、二、三等雞澤辣椒的果實品質(zhì)綜合隸屬函數(shù)值均≥0.59,其中,綜合品質(zhì)最好的一等材料有4 個,為25 號、32 號、37 號和40 號,6 個品質(zhì)指標(biāo)的隸屬函數(shù)值為0.6~0.8,SDCV<27.11%,各指標(biāo)在雷達圖上分布均勻;二等材料有6 個,為16 號、27 號、47 號、50 號、51 號和52號,6 個品質(zhì)指標(biāo)中有1~2 個品質(zhì)指標(biāo)值較高或者較低,SDCV為27.11%(含)~56.62%,各指標(biāo)在雷達圖上分布較不均勻;三等材料有1 個,為14 號,6 個品質(zhì)指標(biāo)的隸屬函數(shù)值為0.1~1.0,差異較大,SDCV≥56.62%,各指標(biāo)在雷達圖上分布極不均勻。
四、五、六等雞澤辣椒的果實品質(zhì)綜合隸屬函數(shù)值為0.39~0.59,其中,四等材料有5 個,為20 號、24 號、33 號、34 號和53 號,6 個品質(zhì)指標(biāo)的隸屬函數(shù)值為0.4~0.6,SDCV<27.11%,各指標(biāo)在雷達圖上分布均勻;五等材料有17 個,為6 號、10 號、11 號、13 號、15 號、18 號、22 號、23 號、26 號、29 號、30 號、35 號、39 號、42 號、43 號、45 號和48 號,6個品質(zhì)指標(biāo)中有3~4 個品質(zhì)指標(biāo)隸屬函數(shù)值較高,1 ~2 個品質(zhì)指標(biāo)較低,SDCV為27.11%(含)~56.62%,各指標(biāo)在雷達圖上分布較不均勻;六等材料有7 個,為3 號、8 號、19 號、21 號、36 號、38 號和41 號,6 個品質(zhì)指標(biāo)中有2~3 個品質(zhì)指標(biāo)隸屬函數(shù)值較高,同時有1~2 個隸屬函數(shù)值較低,極差較大,SDCV≥56.62%,各品質(zhì)指標(biāo)在雷達圖上分布不均勻。
七、八、九等雞澤辣椒果實品質(zhì)的綜合隸屬函數(shù)值<0.39,其中,七等材料有4 個,為4 號、7 號、31 號和44號,6 個品質(zhì)指標(biāo)中有1~2 個品質(zhì)指標(biāo)值較高,同時有2~3 個品質(zhì)指標(biāo)隸屬函數(shù)值很低,極差較大,SDCV≥56.62%,可以根據(jù)實際需求篩選有特異性狀的種質(zhì)資源;八等、九等材料分別有5 個和4 個,這2 個等級的辣椒綜合品質(zhì)和單項品質(zhì)都較低,利用價值較小。
雞澤辣椒為河北省特色加工型辣椒,在河北省辣椒產(chǎn)業(yè)中占有重要地位[1,2],但截至目前,有關(guān)雞澤辣椒品質(zhì)的研究較少。本研究結(jié)果表明,樣本間辣椒素、可溶性糖和Vc 含量的CV分別為33.68%、16.67%和11.02%,均>10%,不同雞澤辣椒種質(zhì)的品質(zhì)存在較大差異。因此,有必要建立一套雞澤辣椒果實品質(zhì)評價方法,以篩選優(yōu)質(zhì)種質(zhì)資源。
綜合隸屬函數(shù)值法通過將所有數(shù)據(jù)進行歸一化處理,利用平均值對品種進行綜合評價,是一項較為客觀的評價方法,目前已在多種作物的品質(zhì)和抗逆性評價上得到應(yīng)用[3,7,10,11,19,20]。CV是樣本變量的相對變異量,用CV可以比較不同樣本相對變異程度的大小[8],但是樣本內(nèi)不同品質(zhì)指標(biāo)單位不同,無法直接計算比較,因此需要先求出樣本內(nèi)各品質(zhì)指標(biāo)的隸屬函數(shù)值,再計算CV,以確定樣本內(nèi)各品質(zhì)指標(biāo)的整齊度。本研究雞澤辣椒種質(zhì)資源中,果實品質(zhì)綜合隸屬函數(shù)值>0.60 的材料有10 個,其樣本內(nèi)各品質(zhì)指標(biāo)隸屬函數(shù)值的CV(SDCV)為12.33%~57.06%;綜合隸屬函數(shù)值為0.40~0.60 的材料有28 個,其SDCV為8.27%~78.23%;綜合隸屬函數(shù)值<0.40 的材料有15 個,其SDCV為9.05%~65.67%。說明綜合隸屬函數(shù)值無論高低,其SDCV變化幅度均較大。因此,在進行品質(zhì)評價時,需同時考慮果實品質(zhì)綜合隸屬函數(shù)值和SDCV。
綜合隸屬函數(shù)值是各品質(zhì)指標(biāo)隸屬函數(shù)值的平均值,數(shù)值越大,代表樣本的綜合品質(zhì)越高;而SDCV代表的是樣本內(nèi)各品質(zhì)指標(biāo)的變異程度,數(shù)值越小,代表樣本內(nèi)各品質(zhì)指標(biāo)的整齊度越高[8]。本研究中分別對綜合隸屬函數(shù)值和SDCV進行了系統(tǒng)聚類分析,依據(jù)聚類分析結(jié)果將雞澤辣椒分為了9 個等級,并分等級繪制了指標(biāo)分布雷達圖。其中,一等雞澤辣椒品質(zhì)最好,共有4 個,分別為25 號、32 號、37 號和40號,其綜合隸屬函數(shù)值≥0.59,SDCV<27.11%,各品質(zhì)指標(biāo)在雷達圖上分布均勻;七等雞澤辣椒綜合隸屬函數(shù)值較低,SDCV≥56.62%,有1~2 個品質(zhì)性狀較為突出,可以根據(jù)育種目標(biāo)對該等級的種質(zhì)材料進行選擇;而綜合隸屬函數(shù)值和SDCV均低的樣本,雖然各品質(zhì)指標(biāo)表現(xiàn)均勻,但由于各項指標(biāo)值均較低,應(yīng)用價值較小,因此將其劃分為第九等。前人在對作物品質(zhì)評價時,僅比較了品質(zhì)綜合隸屬函數(shù)值[3-7],而忽略了SDCV,這可能會篩選出綜合評分高、單項品質(zhì)差的個體,淘汰各品質(zhì)指標(biāo)均衡的樣本。而通過利用綜合隸屬函數(shù)值和SDCV對樣本進行二維評價的方法則可以篩選出綜合隸屬函數(shù)值高、各品質(zhì)指標(biāo)分布均勻的雞澤辣椒,結(jié)合品質(zhì)雷達圖,可以更為直觀地篩選出目標(biāo)樣本,避免指標(biāo)表現(xiàn)突出的個體被忽略,這為今后種質(zhì)資源的選擇和應(yīng)用以及新品種的選育提供了一個參考思路。本研究中,由于資源有限、樣本量較小,因此,各等級的劃分標(biāo)準(zhǔn)尚有待于進一步優(yōu)化。
其他作物的品質(zhì)評價也需要運用多個指標(biāo)進行綜合評判,而不同作物品質(zhì)指標(biāo)的隸屬函數(shù)值、SDCV以及聚類分析的計算方法一致,因此,該方法在其他作物的品質(zhì)評價上具有一定的適用性。由于不同種類作物的主要品質(zhì)特征不同,對應(yīng)的一些特異性指標(biāo)可能需要賦以權(quán)重,但截至目前尚無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)確定權(quán)重的比例[7,21],因此,關(guān)于賦權(quán)重對果實品質(zhì)評價的影響有待于進一步研究。
本研究建立了雞澤辣椒品質(zhì)評價方法:先求出各待測樣本的綜合隸屬函數(shù)值及SDCV,然后對綜合隸屬函數(shù)值和SDCV分別進行聚類分析,再根據(jù)聚類結(jié)果來劃分等級并繪制雷達圖。采用該評價方法,利用可溶性糖、可溶性蛋白、粗脂肪、辣椒堿、Vc 和纖維素含量6 個果實品質(zhì)指標(biāo),對河北省農(nóng)林科學(xué)院經(jīng)濟作物研究所科研人員收集、鑒定的53 份雞澤辣椒種質(zhì)資源進行綜合品質(zhì)評價,共篩選出一等雞澤辣椒種質(zhì)資源4 份,分別為25 號、32 號、37 號和40 號,其品質(zhì)綜合隸屬函數(shù)值≥0.59,SDCV<27.11%,各品質(zhì)指標(biāo)在雷達圖上分布均勻,綜合品質(zhì)最好。