李琳 劉海燕 綜述 王立俊 審校

（山東第一醫(yī)科大學(xué)附屬省立醫(yī)院兒科，山東濟(jì)南 250000）

炎癥性腸?。╥nflammatory bowel disease, IBD）是一種免疫介導(dǎo)的慢性腸道炎癥性疾病，分為潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis, UC）、克羅恩?。–rohn's disease, CD）、 炎 癥 性 腸 病 未 定 型（inflammatory bowel disease-unclassified, IBDU）3 個類型，發(fā)病機(jī)制涉及腸道微環(huán)境穩(wěn)態(tài)失衡、免疫功能失調(diào)、環(huán)境變化和遺傳因素［1-2］。既往研究顯示T細(xì)胞及其釋放的細(xì)胞因子在IBD的發(fā)展中起重要作用［3-4］，而B細(xì)胞在IBD中的作用尚不清楚。B細(xì)胞激活因子（B-cell activating factor, BAFF）是腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor, TNF）超家族成員，因其能刺激B 細(xì)胞生長而得名。它由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞等髓系細(xì)胞產(chǎn)生，主要作用是維持B細(xì)胞存活、刺激其分化為漿細(xì)胞而產(chǎn)生抗體［5］。在許多自身免疫性疾病中已發(fā)現(xiàn)BAFF 的過量產(chǎn)生，而BAFF 抑制劑貝利尤單抗也已被批準(zhǔn)用于治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus, SLE）和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等自身免疫性疾?。?］。近年來有學(xué)者對BAFF及其靶向藥物在IBD中的作用進(jìn)行了相關(guān)研究，本文對其進(jìn)行綜述，旨在為IBD靶向治療提供思路。

1 BAFF的結(jié)構(gòu)及表達(dá)

人BAFF 是由染色體13q32.34 上一條全長約26 kb 的mRNA 編碼表達(dá)的Ⅱ型跨膜蛋白，以膜結(jié)合性和可溶性2種形式存在，前者由285個氨基酸組成，經(jīng)蛋白酶水解后，形成可溶性蛋白。在生理條件下，膜結(jié)合的BAFF在細(xì)胞表面表達(dá)為同源三聚體，可以被弗林蛋白酶水解，釋放出具有生物活性的可溶性17 kDa分子［7］。BAFF與TNF超家族成員增殖誘導(dǎo)配體（a proliferation-inducing ligand, APRIL）的蛋白序列具有33%的同源性［8］。

中性粒細(xì)胞可能是BAFF的重要來源［9］。多種細(xì)胞因子，包括干擾素（interferon, IFN）-γ、IFNα、轉(zhuǎn)化生長因子-β （transforming growth factor,TGF-β）、白細(xì)胞介素（interleukin, IL）-10 和粒細(xì)胞集落刺激因子（granulocyte colony-stimulating factor, G-CSF）能夠上調(diào)BAFF 在髓系細(xì)胞上的表達(dá)［10］。Toll 樣受體（Toll-like receptor, TLR）活化，特別是TLR4 或TLR9，也誘導(dǎo)髓系細(xì)胞產(chǎn)生BAFF［11］。T 細(xì)胞、活化B 細(xì)胞等非髓系細(xì)胞也可產(chǎn)生BAFF。此外研究發(fā)現(xiàn)腮腺上皮細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞、支氣管上皮和非霍奇金淋巴瘤惡性B細(xì)胞也可分泌BAFF［12］。

2 BAFF的受體

BAFF的生物學(xué)作用由3種受體介導(dǎo)：BAFF受體（BAFF-receptor, BAFF-R）、B 細(xì)胞成熟抗原（B-cell maturation antigen, BCMA），以及跨膜激活物、鈣調(diào)節(jié)物、親環(huán)蛋白配體相互作用物（transmembrane activator and calcium modulator and cyclophilin ligand interactor, TACI）。膜結(jié)合性及可溶性BAFF、APRIL 均能與TACI、BCMA 高親和性結(jié)合，BAFF 還能與BAFF-R 結(jié)合［12］。與BAFF 相比，BCMA 對APRIL 的親和力更強(qiáng)［8］。BAFF-R 和TACI在脾臟和外周血的成熟B細(xì)胞亞群中高表達(dá)，BCMA 在骨髓漿細(xì)胞、生發(fā)中心B 細(xì)胞中表達(dá)。BAFF與不同靶細(xì)胞上的不同受體結(jié)合可能介導(dǎo)不同的生物學(xué)功能。

2.1 BAFF-R

BAFF-R 由腫瘤壞死因子受體超家族成員13C（tumor necrosis factor receptor superfamily member 13C,TNFRSF13C）基因編碼，主要在B 淋巴細(xì)胞上表達(dá)，在外周血單核細(xì)胞檢測到較高水平［12］。BAFF 與BAFF-R 結(jié)合在促進(jìn)過渡期B 細(xì)胞成熟、延長成熟B 細(xì)胞壽命方面具有重要意義［13］。A/WySnJ小鼠是Baffr基因天然突變小鼠，其B細(xì)胞發(fā)育過程被阻斷，導(dǎo)致脾臟濾泡區(qū)及邊緣區(qū)B細(xì)胞明顯減少。這些小鼠的成熟外周B細(xì)胞數(shù)量減少，但骨髓B細(xì)胞生成和過渡期B細(xì)胞不受影響。Baffr突變小鼠存在抗體反應(yīng)缺陷，與BAFF 缺陷小鼠相似。BAFF 過表達(dá)時誘導(dǎo)自身反應(yīng)性B 細(xì)胞克服死亡信號而延長生存也是通過BAFF/BAFF-R 通路介導(dǎo)［14］。BAFF-R也在效應(yīng)T細(xì)胞表面表達(dá)，這表明BAFF/BAFF-R 通路可能在T 細(xì)胞功能中發(fā)揮作用［15］。體內(nèi)外研究證實，BAFF與CD4+T細(xì)胞亞群表達(dá)的BAFF-R 結(jié)合，共同刺激T 細(xì)胞活化和同種異體增殖。來自Baffr突變小鼠的T細(xì)胞對BAFF的免疫刺激作用無反應(yīng)，這表明BAFF-R 是促進(jìn)1 型T輔助細(xì)胞反應(yīng)的主要受體［16］。

2.2 TACI

TACI 是一種Ⅲ型跨膜蛋白，高親和BAFF 和APRIL。TACI主要在B細(xì)胞上表達(dá)，在記憶B細(xì)胞中的表達(dá)水平高于穩(wěn)態(tài)的幼稚B細(xì)胞，可抑制B細(xì)胞擴(kuò)增、促進(jìn)漿細(xì)胞分化和存活。TACI 通過限制B細(xì)胞誘導(dǎo)成熟蛋白-1克隆擴(kuò)增B細(xì)胞、產(chǎn)生長壽命漿細(xì)胞來調(diào)節(jié)B 細(xì)胞功能。TACI基因敲除小鼠出現(xiàn)自身免疫性疾病、惡性淋巴瘤可進(jìn)一步證實這一點［17］。

TACI 也可在非T 細(xì)胞依賴性的體液免疫應(yīng)答中發(fā)揮作用。研究發(fā)現(xiàn)TACI基因敲除小鼠對Ⅱ型抗原的非T 細(xì)胞依賴性免疫應(yīng)答缺失［15］，而維持了對T細(xì)胞依賴性抗原（如鎖孔帽貝血藍(lán)蛋白）的免疫應(yīng)答［18］。

2.3 BCMA

BCMA 是由185 個氨基酸殘基組成的Ⅲ型跨膜蛋白，表達(dá)于生發(fā)中心B 細(xì)胞和骨髓漿細(xì)胞表面。BCMA基因位于16p13，編碼基因mRNA 長度為1.2 kb。BCMA 缺陷對外周B 細(xì)胞的數(shù)量、亞型分布、平均壽命沒有明顯影響。BCMA在促進(jìn)成熟B細(xì)胞的抗原呈遞和維持漿母細(xì)胞存活方面具有重要作用。BCMA在成熟B細(xì)胞分化為漿細(xì)胞階段表達(dá)，推測其可能在B細(xì)胞激活和終止分化中起重要作用。BCMA與轉(zhuǎn)接蛋白TNF受體關(guān)聯(lián)因子（TNF receptor-associated factor, TRAF） 1、 TRAF2 和TRAF3 相關(guān)，推測BCMA 通過與配體結(jié)合而介導(dǎo)靶細(xì)胞的存活和增殖。

3 BAFF與促炎信號通路的關(guān)系

核因子κB（nuclear factor kappa B, NF-κB）活化被認(rèn)為是誘導(dǎo)IBD的主要炎癥途徑［19］。NF-κB是由多種觸發(fā)因素激活的轉(zhuǎn)錄因子家族，如促炎細(xì)胞因子、病原體相關(guān)分子模式，在先天性和適應(yīng)性免疫中起關(guān)鍵作用。在IBD患者的腸黏膜上皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中檢測到活化的NF-κB，其表達(dá)水平與炎癥強(qiáng)度有關(guān)。BAFF 阻斷劑可通過抑制NF-κB信號通路和核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3, NLRP3）炎性小體激活來改善結(jié)腸炎［20］。BAFF 通過BAFF/BAFF-R 通路，作用于NF-κB信號通路非經(jīng)典途徑，NF-κB誘導(dǎo)激酶可磷酸化并激活κB 抑制激酶α（inhibitor of kappa B kinase α, IKKα），IKKα 進(jìn)一步磷酸化NF-κB2 蛋白前體p100，導(dǎo)致p100 加工并釋放活性成熟p52 亞基。核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體家族（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptors, NLRs）包括NLRP3 等，是模式識別受體家族的亞類，與多種炎性和自身免疫性疾病的發(fā)展相關(guān)，如IBD、阿爾茨海默病、哮喘等，在激活時導(dǎo)致各種促炎細(xì)胞因子（如IL-1b、IL-18等）的成熟和釋放，經(jīng)TLR 誘導(dǎo)，通過合成IL-1b 前體和NLRP3激活NF-κB［21］。

BAFF 也參與其他炎癥途徑，如BAFF 通過BCMA 和TACI 可觸發(fā)MAPK 信號通路。BAFF 誘導(dǎo)的B 細(xì)胞激活實際上不依賴于ERK1/2 激活，但需要ERK5 激活。在B 細(xì)胞中ERK5 缺失導(dǎo)致成熟B細(xì)胞數(shù)量明顯減少，BAFF 上調(diào)Bcl-2 家族的Mcl-1和Bcl-2a1 需要ERK5 參與，但ERK5 缺失不影響B(tài)AFF 參與促進(jìn)成熟B 細(xì)胞存活的PI3K-Akt 及NFκB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的激活［22-23］。

4 BAFF與IBD

近期研究表明，UC患兒與正常健康兒童相比，外周血和腸道組織中調(diào)節(jié)性B 細(xì)胞數(shù)量顯著降低，同時血清IL-10水平降低，Mayo評分、C反應(yīng)蛋白、紅細(xì)胞沉降率與調(diào)節(jié)性B 細(xì)胞數(shù)量和IL-10 濃度呈負(fù)相關(guān)［24］。結(jié)腸組織活檢結(jié)果證實，UC 和CD 患兒結(jié)腸中BAFF mRNA 和蛋白表達(dá)均高于對照組。BAFF 上調(diào)主要存在于UC 黏膜炎癥部位的腸黏膜固有層單核細(xì)胞中。

UC、CD 患兒血清和糞便中的BAFF 水平高于應(yīng)激性潰瘍和健康對照組，與糞便鈣衛(wèi)蛋白表達(dá)水平顯著相關(guān)［24］。研究表明，與對照組相比，IBD患者血清、糞便和結(jié)腸黏膜中的BAFF 表達(dá)增加［25］。同時，血清BAFF 可用于監(jiān)測疾病活動度。與腸易激綜合征患者相比，無論疾病活動度如何，IBD 患者的血清和糞便BAFF 濃度都顯著增高，均高于325 pg/mL的臨界值，活動性IBD患者對BAFF濃度升高具有更高的敏感性，隨著疾病活動性的降低，BAFF血清水平迅速恢復(fù)到與健康受試者相似的水平［25］。BAFF血清水平與疾病活動性和炎癥生物標(biāo)志物呈正相關(guān)，表明BAFF 在IBD 中的作用主要是促進(jìn)炎性反應(yīng)。

5 BAFF和其他免疫性疾病的關(guān)系

多種自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展與BAFF過表達(dá)有關(guān)。SLE 患者的血BAFF 顯著升高，活動性患者的水平高于非活動性患者，SLE 患者BAFF 的高表達(dá)和不良預(yù)后密切相關(guān)［26］。研究表明，與健康對照相比，自身免疫性肝炎患者的血清BAFF水平顯著升高，與谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅素和可溶性CD30 呈正相關(guān)，這表明BAFF 與自身免疫性肝炎的肝損傷、疾病發(fā)展密切相關(guān)［27］。BAFF很可能是一種影響自身免疫性肝炎患者循環(huán)B 細(xì)胞的活性細(xì)胞因子［28］。在慢性阻塞性肺疾病患者和慢性香煙煙霧暴露小鼠的肺中BAFF表達(dá)顯著增加，預(yù)防性和治療性施用BAFFR-Fc后小鼠肺B細(xì)胞數(shù)量降低，慢性香煙煙霧誘導(dǎo)的淋巴濾泡形成減少、免疫球蛋白水平降低，顯著減輕肺部炎癥和肺泡壁破壞。吸煙患者的BAFF濃度高于非吸煙患者，表明BAFF與慢性阻塞性肺疾病患者的肺功能受損、缺氧嚴(yán)重程度相關(guān)［29］。

6 BAFF靶向治療藥物

基于BAFF在自身免疫性疾病發(fā)病機(jī)制中的重要作用，目前已有多種BAFF靶向治療藥物進(jìn)入臨床試驗階段。

6.1 貝利尤單抗

貝利尤單抗是針對BAFF的單克隆抗體。這一中和抗體能以高親和力形式與可溶性BAFF 結(jié)合，從而有效阻斷BAFF 與BAFF-R、TACI、BCMA 結(jié)合，其機(jī)制是特異性識別并抑制BAFF 生物活性，能顯著降低循環(huán)中B細(xì)胞水平。但是貝利尤單抗不能與膜結(jié)合性BAFF結(jié)合，也不能與TNF家族成員（如TNF-α、TNF-13、APRIL、IL-4 和IL-8 等）結(jié)合［13］。2019年7月，貝利尤單抗在我國獲批上市。

6.2 泰它西普

泰它西普是一種由TACI 胞外區(qū)及人IgG Fc 域構(gòu)成的TACI-Fc融合蛋白，其中TACI可以與BAFF和APRIL 結(jié)合，F(xiàn)c 片段可提高分子穩(wěn)定性。泰它西普靶向?qū) 淋巴細(xì)胞發(fā)育至關(guān)重要的BAFF 和APRIL，能夠有效降低B 細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫應(yīng)答，達(dá)到治療自身免疫性疾病的目的［30］。2021 年3月，泰它西普正式獲得中國國家藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)上市，用于治療SLE［31］。

6.3 阿塞西普

阿塞西普由Merck Serono 公司開發(fā)，也是由TACI 胞外區(qū)和人IgG Fc 段組成的可溶性重組融合蛋白，可選擇性地殺傷成熟B細(xì)胞和漿細(xì)胞，但對原始B細(xì)胞和記憶性B細(xì)胞影響不大［32］。

6.4 Blisibimod

Blisibimod是一種由4個高親和力BAFF結(jié)合結(jié)構(gòu)域與人IgG Fc片段組成的融合蛋白，是由二硫鍵連接的2 條多肽鏈。Blisibimod 能選擇性地與膜結(jié)合性和可溶性BAFF 結(jié)合，以抑制BAFF 與其受體的結(jié)合，從而減少B細(xì)胞存活和增殖［33］。

6.5 他巴尤單抗

他巴尤單抗與貝利尤單抗類似，是一種針對BAFF的全人源單克隆抗體［32］，能與膜結(jié)合性和可溶性BAFF 結(jié)合，從而抑制BAFF 介導(dǎo)的B 細(xì)胞增殖［34］。

6.6 放射性BAFF蛋白

非霍奇金淋巴瘤、B細(xì)胞慢性淋巴細(xì)胞白血病和多發(fā)性骨髓瘤等都是B系淋巴瘤，B細(xì)胞處于不受調(diào)控的惡性增殖狀態(tài)，對放射性物質(zhì)很敏感，可根據(jù)B 細(xì)胞表面分布的特異性BAFF 受體，以BAFF負(fù)載放射原對B細(xì)胞系淋巴瘤進(jìn)行靶向治療。用于靶向治療的放射性BAFF蛋白，特異性強(qiáng)、殺傷力?。?5］。

6.7 BAFF重組抑制性短肽

利用噬菌體隨機(jī)肽庫技術(shù)，針對特異性配體BAFF構(gòu)建重組的BAFF肽段，可競爭性抑制BAFF與淋巴細(xì)胞上受體的結(jié)合，達(dá)到抑制BAFF、活化淋巴細(xì)胞的目的，從而阻斷刺激單個核細(xì)胞增殖的活性，以及因T細(xì)胞、B細(xì)胞過度激活而誘導(dǎo)的自身免疫反應(yīng)［36］。

6.8 BAFF類似物及BAFF-R阻滯劑

BAFF 類似物可與BAFF-R 競爭性結(jié)合，從而阻斷信號轉(zhuǎn)導(dǎo)來抑制BAFF 的生物學(xué)功能。BAFFR 阻滯劑與BAFF-R 選擇性結(jié)合，同樣以阻斷BAFF-R與BAFF結(jié)合，達(dá)到臨床治療作用［37］。

7 總結(jié)與展望

BAFF 是B 細(xì)胞成熟、維持存活和激活的關(guān)鍵參與者，可能將參與IBD 的各種B 細(xì)胞、T 細(xì)胞、骨髓細(xì)胞和其他細(xì)胞相關(guān)機(jī)制聯(lián)系起來。BAFF通過對免疫系統(tǒng)的多重影響可以促進(jìn)腸道炎癥，在BAFF 抑制劑成功治療SLE、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的推動下，靶向BAFF 可能是治療IBD 中一種新穎且有前景的治療策略。

作者貢獻(xiàn)聲明：李琳負(fù)責(zé)收集、分析文獻(xiàn)和文章撰寫；劉海燕負(fù)責(zé)收集、分析文獻(xiàn)和文章修改；王立俊負(fù)責(zé)確定選題及文章審閱。

利益沖突聲明：所有作者均聲明不存在利益沖突。