摘 要 為了探究不同質(zhì)量濃度吲哚乙酸和萘乙酸對(duì)尤加利種子萌發(fā)的影響，設(shè)置0.3、3、30、120 mg·L-1 4種生長(zhǎng)素質(zhì)量濃度，浸種時(shí)間分別為1.5、3、4.5、6 h，分別對(duì)尤加利銀元和尤加利藍(lán)寶貝浸種處理，進(jìn)行尤加利種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)和相對(duì)發(fā)芽率的研究。試驗(yàn)結(jié)果表明，0.3～120 mg·L-1質(zhì)量濃度的IAA激素浸種處理兩種尤加利種子，浸種時(shí)間為1.5～6 h，其發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)均優(yōu)于對(duì)照組，對(duì)兩種尤加利種子的萌發(fā)均表現(xiàn)為促進(jìn)作用。NAA處理?xiàng)l件下，兩種尤加利種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)受激素質(zhì)量濃度和浸種時(shí)間影響較大，表現(xiàn)為低質(zhì)量濃度促進(jìn)、高質(zhì)量濃度抑制，浸種時(shí)間短促進(jìn)、浸種時(shí)間長(zhǎng)抑制的關(guān)系。

關(guān)鍵詞 生長(zhǎng)素；尤加利；IAA；NAA；種子萌發(fā)

中圖分類號(hào)：S685 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2024.05.003

尤加利，學(xué)名桉樹（Eucalyptus robusta），屬桃金娘科桉屬，其生長(zhǎng)最適溫度為15～25 ℃。尤加利具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，2014年，尤加利切葉進(jìn)入中國(guó)市場(chǎng)并大受歡迎，成為花藝設(shè)計(jì)的主要配材，為云南、廣東、廣西及四川等地區(qū)帶來了一定的經(jīng)濟(jì)效益，成為當(dāng)?shù)刂饕慕?jīng)濟(jì)樹種之一。但長(zhǎng)期種植下，尤加利容易出現(xiàn)品種老化、品質(zhì)下滑等情況。目前國(guó)內(nèi)對(duì)于使用尤加利種子進(jìn)行催芽、育苗、育種的研究較少，且尤加利進(jìn)口種子價(jià)格較高、種子細(xì)小，不易萌發(fā)。播種育苗的過程中，可以用激素催芽，打破休眠，利于種子的出芽和后期的出苗。植物生長(zhǎng)素是一類可以調(diào)節(jié)植物細(xì)胞生長(zhǎng)分裂的植物激素，是一類重要的天然合成激素[1-5]。IAA，吲哚乙酸（indole-3-acetic acid），植物生長(zhǎng)素，可以給種子催芽，嫁接前準(zhǔn)備，扦插前浸泡促進(jìn)生根；IAA同時(shí)可以促進(jìn)性別分化[6]。NAA，萘乙酸[7-8] （1-Naphthaleneacetic acid），主要作用是促進(jìn)細(xì)胞伸長(zhǎng)，促進(jìn)生根；低質(zhì)量濃度可誘導(dǎo)形成不定根。

本試驗(yàn)使用不同質(zhì)量濃度的IAA和NAA對(duì)尤加利種子進(jìn)行不同浸種時(shí)間的處理，探究其對(duì)尤加利種子萌發(fā)特性的影響，為以后探究尤加利種子育苗育種提供理論依據(jù)。

1" 材料與方法

1.1" 試驗(yàn)材料

以2021年收獲的尤加利銀元和尤加利藍(lán)寶貝種子為材料。

1.2" 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)分別對(duì)尤加利銀元和尤加利藍(lán)寶貝種子進(jìn)行兩組正交試驗(yàn)，每個(gè)正交試驗(yàn)含有3個(gè)影響因素，即生長(zhǎng)素的種類、生長(zhǎng)素的質(zhì)量濃度和生長(zhǎng)素浸種時(shí)間。其中生長(zhǎng)素種類包含3個(gè)水平，分別為IAA、NAA和蒸餾水。生長(zhǎng)素質(zhì)量濃度包含4個(gè)水平，分別為0.3 、3 、30 、120 mg·L-1。生長(zhǎng)素處理時(shí)間包含4個(gè)水平，分別為1.5 、3、4.5 、6 h。

1.3" 試驗(yàn)過程

選取無病蟲害、顆粒飽滿、大小相似的尤加利銀元（以尤加利銀元為例，尤加利藍(lán)寶貝步驟同尤加利銀元）種子，共810粒。將其分成9份，平均每份90粒。選擇洗凈培養(yǎng)皿9個(gè)，烘干后于培養(yǎng)皿內(nèi)鋪放兩層濾紙，上面一層濾紙使用鉛筆將其平均分成3個(gè)區(qū)域。將已經(jīng)平均分好的90粒尤加利銀元種子放入培養(yǎng)皿中，每個(gè)區(qū)域放30粒，確保其生長(zhǎng)條件一致，3組重復(fù)。

全部分配完成后，使用移液槍分別抽取4種不同質(zhì)量濃度的生長(zhǎng)素注射到相應(yīng)培養(yǎng)皿中的3個(gè)區(qū)域，每個(gè)區(qū)域2 mL，確保生長(zhǎng)素的總量一致。然后貼好標(biāo)簽放入18 ℃的恒溫箱中進(jìn)行植物生長(zhǎng)素浸種處理。

記錄好時(shí)間，分別在生長(zhǎng)素處理1.5、3、4.5、6 h時(shí)，將相應(yīng)的培養(yǎng)皿從恒溫箱中拿出來，進(jìn)行換水。使用無菌水沖洗掉培養(yǎng)皿中和種子上的生長(zhǎng)激素，并更換新的濾紙，重新劃分好3個(gè)等大區(qū)域，將沖洗好的種子放入培養(yǎng)皿中。培養(yǎng)皿中每個(gè)區(qū)域依然放置之前在同一培養(yǎng)皿、同一區(qū)域的30粒種子。然后使用移液槍在每個(gè)區(qū)域內(nèi)注射2 mL的無菌水，繼續(xù)放到18 ℃恒溫箱中培養(yǎng)。

每天早晚各換水1次，并觀察、及時(shí)記錄種子的萌發(fā)情況，持續(xù)觀察7～10 d，將萌發(fā)的種子種植到培養(yǎng)盤中，貼好標(biāo)簽進(jìn)行觀察培養(yǎng)。

1.4" 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

采用SPSS16.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行極差統(tǒng)計(jì)分析。差異顯著性分析應(yīng)用Duncan法進(jìn)行多重比較檢驗(yàn)。

發(fā)芽啟動(dòng)時(shí)間定義為從發(fā)芽試驗(yàn)開始到第1粒種子開始萌發(fā)所需天數(shù)（d）。

發(fā)芽率=（種子發(fā)芽數(shù)/試驗(yàn)種子數(shù)）×100%；

相對(duì)發(fā)芽率=（處理組發(fā)芽數(shù)/對(duì)照組發(fā)芽數(shù)）×100%；

發(fā)芽勢(shì)=（規(guī)定時(shí)間內(nèi)發(fā)芽種子總數(shù)/供試種子總數(shù)）×100%；

2" 結(jié)果與分析

2.1" 激素種類、質(zhì)量濃度和處理時(shí)間對(duì)尤加利銀元種子發(fā)芽的影響

統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)，根據(jù)SPSSAU試驗(yàn)極差分析得到尤加利銀元種子發(fā)芽率與各因子平均值關(guān)系圖（見圖1）。從數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)可知，尤加利銀元種子最快萌發(fā)的處理方法，即使用3 mg·L-1或30 mg·L-1的生長(zhǎng)素IAA對(duì)尤加利銀元進(jìn)行1.5 h的浸種，然后再換水將其放入18 ℃恒溫箱中培養(yǎng)。

在使用IAA進(jìn)行催芽處理時(shí)，其激素質(zhì)量濃度在0、0.3、3 mg·L-1時(shí)，催芽效果會(huì)隨著激素質(zhì)量濃度的升高而不斷提高（表1）。但是在種子萌發(fā)過程中，當(dāng)IAA質(zhì)量濃度高于30 mg/L時(shí)，IAA的催芽效果會(huì)隨著生長(zhǎng)素質(zhì)量濃度的提高而降低，會(huì)出現(xiàn)很明顯的抑制作用。

NAA作為一種常見的植物生長(zhǎng)激素，對(duì)于打破種子休眠、萌芽、生長(zhǎng)發(fā)育都有較大的影響，但是在本試驗(yàn)中，NAA對(duì)于尤加利銀元的催芽效果總體表現(xiàn)為抑制作用。根據(jù)試驗(yàn)數(shù)據(jù)，我們發(fā)現(xiàn)種子萌發(fā)過程中NAA在0.3 mg·L-1時(shí)，其發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)是優(yōu)于CK組（表1）。在NAA質(zhì)量濃度低于0.3 mg·L-1或者高于0.3 mg·L-1小于30 mg·L-1時(shí)，其發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)是否會(huì)更好，尤加利銀元的發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)是否會(huì)變得更高，還需要進(jìn)一步探究。

從時(shí)間維度來看，激素處理時(shí)間不宜過長(zhǎng)。對(duì)尤加利銀元的激素浸種，時(shí)間控制在1.5 h左右最好。相較于生長(zhǎng)素種類和生長(zhǎng)素質(zhì)量濃度，浸種時(shí)間對(duì)于尤加利銀元的影響相對(duì)較小。

2.2" 激素種類、質(zhì)量濃度和處理時(shí)間對(duì)尤加利藍(lán)寶貝種子發(fā)芽的影響

根據(jù)試驗(yàn)數(shù)據(jù)，對(duì)尤加利藍(lán)寶貝種子進(jìn)行SPSSAU的試驗(yàn)極差數(shù)據(jù)分析得到尤加利藍(lán)寶貝種子發(fā)芽率與各因子平均值關(guān)系（見圖2）。試驗(yàn)中用到的激素對(duì)于尤加利藍(lán)寶貝的浸種平均水平都高于CK組，其中最佳的催芽方式是使用30 mg·L-1的生長(zhǎng)激素NAA對(duì)尤加利藍(lán)寶貝進(jìn)行1.5 h的浸種處理，然后將其清洗再用無菌水對(duì)其浸種處理并放入18℃的恒溫箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

對(duì)尤加利藍(lán)寶貝種子發(fā)芽率與各因子平均值關(guān)系（圖2）分析可以得知，IAA和NAA濃度在3 mg·L-1和30 mg·L-1時(shí)，其催芽效果是隨著質(zhì)量濃度的升高而不斷變好。在生長(zhǎng)素質(zhì)量濃度高于30 mg·L-1低于120 mg·L-1時(shí)，其催芽效果隨著生長(zhǎng)素質(zhì)量濃度的升高呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)。但是在30 ～120 mg·L-1是否存在一個(gè)催芽效率更高的點(diǎn)，依然需要進(jìn)一步的試驗(yàn)分析。

分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)（表2），可以發(fā)現(xiàn)使用激素浸種時(shí)間和催芽效果的關(guān)系不是很明顯。在激素種類、激素質(zhì)量濃度和浸種時(shí)間3個(gè)水平上，浸種時(shí)間影響占到的比重最小。跟尤加利銀元一樣，使用激素浸種的最佳時(shí)間在1.5 h左右，相同激素相同質(zhì)量濃度的情況下，超過3 h的浸種時(shí)間，其浸種效果會(huì)明顯比浸種1.5 h左右的浸種效果差。

利用單因素方差分析去研究發(fā)芽率對(duì)于激素種類、激素質(zhì)量濃度、處理時(shí)間3項(xiàng)的差異性，從表3可以看出：不同發(fā)芽率樣本對(duì)于激素質(zhì)量濃度、處理時(shí)間不會(huì)表現(xiàn)出顯著性差異（pgt;0.05） ，意味著不同發(fā)芽率樣本對(duì)于激素質(zhì)量濃度和處理時(shí)間全部表現(xiàn)出一致性，并沒有顯著差異。另外發(fā)芽率樣本對(duì)于激素種類呈現(xiàn)出顯著性（plt;0.05），意味著不同發(fā)芽率樣本對(duì)于激素種類有著顯著差異性。具體分析可知：發(fā)芽率對(duì)于激素種類呈現(xiàn)出0.01水平顯著性（F=13.200，p=0.003）。

總結(jié)可知：不同發(fā)芽率樣本對(duì)于激素質(zhì)量濃度、處理時(shí)間不會(huì)表現(xiàn)出顯著性差異，另外發(fā)芽率樣本對(duì)于激素種類呈現(xiàn)出顯著性差異。

3" 結(jié)論與討論

種子萌發(fā)需要種子內(nèi)各種活性酶[9]進(jìn)行調(diào)節(jié)，人們無法去改變種子內(nèi)部已有的營(yíng)養(yǎng)組成成分和種子內(nèi)部酶的活性及成分。但是人們可以使用植物激素，如IAA和NAA等來打破種子的休眠。前人研究發(fā)現(xiàn)，使用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)浸種0～6 h是比較好的處理時(shí)長(zhǎng)。本試驗(yàn)通過設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)來探究?jī)煞N植物生長(zhǎng)激素IAA和NAA與兩種尤加利種子的浸種發(fā)芽率之間的關(guān)系。從試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析尋找兩種尤加利種子催芽最適合的植物生長(zhǎng)激素的種類、質(zhì)量濃度和浸種時(shí)間。

從試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)表和試驗(yàn)極差數(shù)據(jù)分析圖來看，使用IAA激素對(duì)兩種尤加利種子進(jìn)行催芽浸種更加合適。這與李小飛等[5]的結(jié)論相一致，即植物激素處理對(duì)薄殼山核桃種子萌發(fā)具有一定的促進(jìn)作用；然而浸種時(shí)間對(duì)其種子萌發(fā)無顯著影響；不同質(zhì)量濃度的激素組處理薄殼山核桃種子之間的發(fā)芽率差異極顯著，不同的激素種類對(duì)其發(fā)芽率的影響相對(duì)較小。

與IAA相比，植物生長(zhǎng)激素NAA對(duì)兩種尤加利種子的催芽效果不顯著，而且受激素質(zhì)量濃度影響較大。在對(duì)尤加利銀元和尤加利藍(lán)寶貝催芽試驗(yàn)中，使用120 mg·L-1的植物生長(zhǎng)激素NAA浸種處理，并不能有效地打破兩種尤加利種子的休眠狀態(tài)。在尤加利藍(lán)寶貝的催芽試驗(yàn)中，甚至還出現(xiàn)了比較嚴(yán)重的出芽抑制情況。這與陳雪等[2]在月季雜交種子快速催芽方法初探中得到的結(jié)論一致，即NAA的催芽效果具有兩重性，既可促進(jìn)發(fā)芽，也可抑制發(fā)芽。

另外，使用NAA對(duì)兩種尤加利種子進(jìn)行浸種還特別需要注意激素浸種時(shí)間。在尤加利銀元的催芽試驗(yàn)中，使用3 mg·L-1的NAA對(duì)尤加利銀元種子進(jìn)行6 h浸種處理，后續(xù)的生長(zhǎng)狀況極差，發(fā)芽率明顯低于CK組。楊運(yùn)英等[10]認(rèn)為，NAA對(duì)飛燕草種子的發(fā)芽有明顯促進(jìn)作用，可以提高種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)，縮短發(fā)芽進(jìn)程，有利于幼苗的生長(zhǎng)，同時(shí)NAA的質(zhì)量濃度過高不利于種子的萌發(fā)[11-12]。其中，以0.5 mg·L-1 NAA處理種子效果最好。這與本試驗(yàn)中NAA的最佳質(zhì)量濃度應(yīng)該在0.3 ～30 mg·L-1相一致。

在曼陀羅種子的發(fā)芽及幼苗的生長(zhǎng)研究中，NAA處理后，也表現(xiàn)出低質(zhì)量濃度時(shí)促進(jìn)，高質(zhì)量濃度時(shí)抑制的現(xiàn)象。而IAA處理后野生種和栽培種曼陀羅種子的發(fā)芽率和幼苗各項(xiàng)指標(biāo)在質(zhì)量濃度為25 mg·L-1時(shí)達(dá)到最大值，與本試驗(yàn)30 mg·L-1的IAA最佳質(zhì)量濃度基本相一致。同時(shí)吲哚乙酸、吲哚丁酸是影響云南松種子發(fā)芽期胚軸與根長(zhǎng)的主要激素。在對(duì)仙客來種子發(fā)芽與生長(zhǎng)的影響研究中，IAA與NAA的理想質(zhì)量濃度分別為25 、17 mg·L-1。

綜合以上試驗(yàn)數(shù)據(jù)，可以得出結(jié)論，本試驗(yàn)中的4種IAA質(zhì)量濃度，對(duì)打破尤加利銀元和尤加利藍(lán)寶貝的休眠狀態(tài)都有較大的促進(jìn)作用，本試驗(yàn)中得到的激素催芽尤加利種子最合適的質(zhì)量濃度都是30 mg·L-1，IAA的催芽作用在浸種時(shí)間為1.5～6 h比較穩(wěn)定，并且方便試驗(yàn)操作和日常使用。植物生長(zhǎng)激素NAA則需要選擇較合適的激素質(zhì)量濃度，在0.3 ～30 mg·L-1之間最佳，浸種時(shí)間為1.5～4.5 h最佳。但是其催芽效果對(duì)于尤加利藍(lán)寶貝和尤加利銀元兩種材料都不是特別顯著，所以在日常的試驗(yàn)和生產(chǎn)實(shí)踐中不建議使用。

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（責(zé)任編輯：易" 婧）

收稿日期：2023-5-17

基金項(xiàng)目：江蘇高?！扒嗨{(lán)工程”骨干教師培養(yǎng)項(xiàng)目南通市科技項(xiàng)目（MS22021069）；淮北師范大學(xué)博士科研啟動(dòng)費(fèi)（03106152）；淮北師范大學(xué)實(shí)驗(yàn)室開放項(xiàng)目（2022sykf040）。

作者簡(jiǎn)介：張偉艷（1982—），碩士，講師，主要從事園林植物與觀賞園藝研究。E-mail： zhangweiyan412@sina.com。