摘 要：目的：分析檢測(cè)姬松茸干制品中苯甲酸天然本底值，為科學(xué)有效監(jiān)督苯甲酸使用情況及制定相關(guān)的國(guó)家或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。方法：采集不同地區(qū)的姬松茸干制品50批次，依據(jù)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測(cè)定》（GB 5009.28—2016）采用液相色譜法檢測(cè)苯甲酸含量。結(jié)果：41批次姬松茸干制品檢出苯甲酸，檢測(cè)值在0.084～0.718 g·kg-1，平均值為0.408 g·kg-1。結(jié)論：檢出苯甲酸的姬松茸干制品在生產(chǎn)流通過(guò)程均未人為主動(dòng)添加苯甲酸，證明了姬松茸干制品中存在天然苯甲酸。

關(guān)鍵詞：姬松茸干制品；苯甲酸；天然本底值；食品添加劑；高效液相色譜

Abstract： Objective： To analyze and detect the natural background value of benzoic acid in dried Agaricus blazei， so as to provide a basis for scientific and effective supervision of the use of benzoic acid and the formulation of relevant national or industry standards. Method： Fifty batches of dried Agaricus blazei from different regions were collected， and the benzoic acid content was detected by liquid chromatography according to the GB 5009.28—2016. Result： Benzoic acid was detected in 41 batches of dried Agaricus blazei， with the detection values ranging from 0.084 g·kg-1 to 0.718 g·kg-1， and the average value was 0.408 g·kg-1. Conclusion： The dried Agaricus blazei with benzoic acid detected were not artificially added with benzoic acid during the production and circulation process， which proved that natural benzoic acid existed in dried Agaricus blazei.

Keywords： dried Agaricus blazei; benzoic acid; natural background value; food additive; high performance liquid chromatography

苯甲酸是一種芳香族羧酸，分子式為C7H6O2，具有芳香性及羧酸的性質(zhì)[1]。在食品領(lǐng)域，苯甲酸是一種常見(jiàn)的防腐劑，依據(jù)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》（GB 2760—2014），苯甲酸被允許限量應(yīng)用在20余種食品類(lèi)別中，姬松茸干制品并未列入其中，說(shuō)明不允許在姬松茸干制品中添加苯甲酸[2]。然而，實(shí)際生產(chǎn)中，紅棗、蜂蜜、牛乳、豆豉和黃酒等多類(lèi)食品中含有天然苯甲酸的情況已被行業(yè)熟知[3-6]。姬松茸干制品中可能存在天然苯甲酸的情況卻鮮為人知，亦有部分企業(yè)生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)的姬松茸干制品在監(jiān)督抽檢中檢出苯甲酸，被誤認(rèn)為人為添加而遭到處罰。因此，只有準(zhǔn)確檢測(cè)姬松茸干制品中天然苯甲酸的含量，才能進(jìn)一步判斷與辨別姬松茸干制品中的苯甲酸是人為添加還是天然含有，為國(guó)家或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的修改和制定提供科學(xué)依據(jù)，促進(jìn)姬松茸產(chǎn)業(yè)鏈條的高質(zhì)量發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 樣本采集

對(duì)我國(guó)姬松茸主產(chǎn)區(qū)進(jìn)行調(diào)查，從福建、云南、貴州、河南和廣西等產(chǎn)量較高的幾個(gè)地區(qū)采購(gòu)姬松茸樣本50批次，每批次至少500 g。采購(gòu)的樣品覆蓋不同品質(zhì)和價(jià)位，確保不含任何添加物，使樣品具有代表性。

1.2 儀器與試劑

1200高效液相色譜儀，配二極管陣列檢測(cè)器，安捷倫；BSA223S分析天平，北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司；MS200渦旋振蕩器，杭州瑞誠(chéng)儀器有限公司；GT10-1離心機(jī)，河北醫(yī)眾醫(yī)療器械有限公司；KH-500SP超聲儀，昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司；亞鐵氰化鉀、乙酸鋅、甲醇、乙酸銨，均為色譜純。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 樣品處理

樣品制備、試樣提取均參考《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測(cè)定》（GB 5009.28—2016）第一法高效液相色譜法[7]。

1.3.2 色譜條件

色譜柱：Agilent Eclipse Plus C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：甲醇+0.77 g·L-1乙酸銨（10+90，V/V）；流速：1.000 mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)：230 nm；進(jìn)樣量：5 μL。

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制

參考《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測(cè)定》（GB 5009.28—2016）第一法高效液相色譜法，取苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，配制成濃度分別為1.0 mg·L-1、5.0 mg·L-1、10.0 mg·L-1、20.0 mg·L-1、50.0 mg·L-1、100.0 mg·L-1和200.0 mg·L-1的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液[7]。在波長(zhǎng)230 nm處測(cè)定，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 方法驗(yàn)證

在1.0～200.0 mg·L-1，苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度與峰面積的線(xiàn)性關(guān)系良好，線(xiàn)性回歸方程為y=3 763.6x+0.698，R2=0.999 9。苯甲酸的檢出限為0.005 g·kg-1；在0.010 g·kg-1、0.050 g·kg-1、0.200 g·kg-1加標(biāo)水平下的回收率在96%～98%，滿(mǎn)足《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測(cè)》（GB/T 27404—2008）回收率的要求[8]。

2.2 姬松茸干制品中苯甲酸的結(jié)果分布

2.2.1 姬松茸干制品中苯甲酸含量分布

對(duì)50批次姬松茸干制品進(jìn)行檢測(cè)，以每0.1 g·kg-1為一個(gè)區(qū)間，分析樣品苯甲酸含量數(shù)據(jù)分布，見(jiàn)圖3。在50批次姬松茸干制品樣本中，天然苯甲酸含量最高值為0.718 mg·kg-1，最低值為0.084 mg·kg-1；有31份樣本天然苯甲酸含量在0.2～0.5 g·kg-1，占檢測(cè)總樣本量的62%；有9份樣本未檢出苯甲酸，或者是低于檢出限0.00 5 g·kg-1，占檢測(cè)總樣本量的18%。

2.2.2 不同地區(qū)姬松茸干制品檢出苯甲酸情況

采購(gòu)的50批次樣本分別來(lái)自福建、云南、貴州、河南、廣西5個(gè)姬松茸主產(chǎn)省份（自治區(qū)），每個(gè)產(chǎn)地采購(gòu)10批次，檢出率分別為90%、90%、70%、80%、80%，見(jiàn)圖4。

2.2.3 不同地區(qū)姬松茸干制品中苯甲酸含量分布

福建姬松茸干制品苯甲酸檢出值在0.278～0.711 g·kg-1，平均值為0.461 g·kg-1；云南姬松茸干制品苯甲酸檢出值在0.366～0.718 g·kg-1，平均值最高，為0.503 g·kg-1；貴州姬松茸干制品苯甲酸檢出值在0.233～0.491 g·kg-1，平均值為0.411 g·kg-1；河南姬松茸干制品苯甲酸檢出值在0.084～0.194 g·kg-1，平均值最低，為0.318 g·kg-1；廣西姬松茸干制品苯甲酸檢出值在0.242～0.472 g·kg-1，平均值為0.328 g·kg-1。具體數(shù)值分布見(jiàn)表1。

2.3 姬松茸干制品中苯甲酸來(lái)源分析

調(diào)研中了解到姬松茸種植使用的原料為玉米芯、秸稈、蔗渣、牛糞、石膏和石灰，姬松茸生產(chǎn)工藝為原料有氧發(fā)酵→二次發(fā)酵→播種→發(fā)菌→覆土→出菇→采收→切腳→清洗→烘干→分選包裝→陰涼干燥儲(chǔ)存[9]。原料發(fā)酵、種植、采收、干燥和貯存過(guò)程均未使用苯甲酸及其鈉鹽，故姬松茸干制品中檢出苯甲酸可能是內(nèi)源性因素造成的。研究發(fā)現(xiàn)，天然苯甲酸主要有兩種來(lái)源：植物生長(zhǎng)過(guò)程中，次級(jí)代謝反應(yīng)生成苯甲酸[10]；微生物代謝反應(yīng)生成苯甲酸[11]。例如，馬尿酸水解、苯丙氨酸經(jīng)微生物降解、苯甲醛氧化均可形成苯甲酸。

對(duì)于苯甲酸及其衍生物在植物體內(nèi)的合成方法，科學(xué)界如今還沒(méi)有明確一致的結(jié)論。目前，主要有兩種推測(cè)：苯丙氨酸經(jīng)一系列酶催化形成苯甲酸及其衍生物；莽草酸轉(zhuǎn)化成苯甲酸及其衍生物。雖然發(fā)現(xiàn)姬松茸干制品中存在天然苯甲酸，但是苯甲酸的生成方式和作用機(jī)理還未知，尚待進(jìn)一步研究與開(kāi)發(fā)。

3 結(jié)論

本文采集產(chǎn)自5個(gè)省份（自治區(qū)）的50批次姬松茸干制品樣本，檢測(cè)苯甲酸含量，結(jié)合實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、2024年版《全國(guó)食品安全監(jiān)督抽檢實(shí)施細(xì)則》（以姬松茸為主要原料的產(chǎn)品不檢測(cè)苯甲酸）以及相關(guān)參考文獻(xiàn)資料得出姬松茸干制品中檢出的苯甲酸為天然生成，排除了人為添加苯甲酸的可能。50批次姬松茸干制品中檢出天然苯甲酸的本底值均小于1.0 g·kg-1。其中，云南省生產(chǎn)的姬松茸干制品苯甲酸平均含量最高，為0.503 g·kg-1，檢出率也最高，為90%。姬松茸干制品檢出的苯甲酸本底值普遍在0.2～0.5 g·kg-1。本研究結(jié)果為姬松茸干制品中苯甲酸限量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供了參考依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

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