摘 要：采用氣相色譜法測(cè)定黃瓜中敵敵畏殘留量，根據(jù)《測(cè)量不確定度評(píng)定與表示》（JJF 1059.1—2012）的要求對(duì)測(cè)定過程進(jìn)行分析，找出影響測(cè)量結(jié)果的不確定度因素，并對(duì)各個(gè)不確定度分量進(jìn)行合成，計(jì)算擴(kuò)展不確定度。結(jié)果表明，當(dāng)黃瓜試樣中敵敵畏殘留量為0.181 mg·kg-1時(shí)，擴(kuò)展不確定度為0.017 mg·kg-1（k=2），其中標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合引入的不確定度最大，其次為標(biāo)準(zhǔn)溶液賦值。檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)在進(jìn)行農(nóng)藥殘留檢測(cè)時(shí)應(yīng)重視儀器維護(hù)、標(biāo)物采購以及人員能力監(jiān)控、期間核查等質(zhì)量控制工作。

關(guān)鍵詞：氣相色譜法；黃瓜；敵敵畏；不確定度

Uncertainty Evaluation of Determination of Dichlorvos Residues in Cucumber by Gas Chromatography

ZHANG Yuanyuan

（Yuci District Comprehensive Inspection and Testing Center， Jinzhong 030600， China）

Abstract： The residual amount of dichlorvos in cucumber was determined by gas chromatography. The determination process was analyzed according to the requirements of JJF 1059.1—2012， and the uncertainty factors affecting the measurement results were identified. Each component of uncertainty is synthesized， and the overall extended uncertainty is computed. The results showed that when the residual amount of dichlorvos in cucumber samples was 0.181 mg·kg-1， the extended uncertainty was 0.017 mg·kg-1 （k=2）， with the highest uncertainty introduced by standard curve fitting， followed by standard solution assignment. Inspection and testing institutions should pay attention to quality control work such as instrument maintenance， standard procurement， personnel capability monitoring， and periodic verification when conducting pesticide residue testing.

Keywords： gas chromatography; cucumber; dichlorvos; uncertainty

敵敵畏是一種有機(jī)磷殺蟲劑，在蔬菜、水果等農(nóng)作物種植過程中應(yīng)用廣泛，但敵敵畏對(duì)人體健康有潛在危害[1]?；鶎訖z驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)在通過中國(guó)計(jì)量認(rèn)證/認(rèn)可和農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)證后，提升實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性非常必要。測(cè)量不確定度評(píng)定是檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)加強(qiáng)質(zhì)量控制的手段之一，不確定度評(píng)定能客觀表征被測(cè)量值的分散性，增加測(cè)量結(jié)果的可信度，還能發(fā)現(xiàn)檢測(cè)過程中對(duì)測(cè)量結(jié)果影響較大的因素，從而加強(qiáng)質(zhì)量控制[2]。本研究參照《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測(cè)定》（NY/T 761—2008）[3]第1部分方法二建立了氣相色譜法測(cè)定黃瓜中敵敵畏殘留量的方法，根據(jù)《測(cè)量不確定度評(píng)定與表示》（JJF 1059.1—2012）[4]中規(guī)定的方法程序?qū)y(cè)定過程中的不確定度進(jìn)行分析評(píng)定。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

黃瓜，購自轄區(qū)某超市；敵敵畏溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品（濃度10 μg·mL-1），北京海岸鴻蒙標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研發(fā)中心；乙腈、丙酮，均為色譜純，德國(guó)Merck公司；氯化鈉，分析純，西隴科學(xué)股份有限公司。

1.2 儀器與耗材

7890A氣相色譜儀，美國(guó)Agilent公司；ME3002E電子天平，瑞士METTLER TOLEDO公司；FA25高速勻漿機(jī)，上海FLUKO公司；HSC-B水浴氮吹儀，天津恒奧科技公司；XH-S旋渦混合器，無錫杰瑞安儀器公司。

1.3 試樣處理過程

①稱取25.00 g黃瓜試樣于高腳燒杯中，量取50.0 mL乙腈加入燒杯中，置于勻漿機(jī)中勻漿2 min。用濾紙過濾勻漿后的黃瓜試樣，使用內(nèi)裝約6 g氯化鈉的100 mL比色管收集濾液，加塞后振搖約100次，置于室溫下靜置1 h，待乙腈相與水相分層。②吸取10.0 mL分層后的乙腈相于10 mL比色管中，置于45 ℃的氮吹儀上緩緩?fù)ㄈ氲獨(dú)?，氮吹至近干，? mL丙酮復(fù)溶并轉(zhuǎn)移入5 mL容量瓶中，用少量丙酮分兩次洗滌比色管，將洗滌液全部轉(zhuǎn)入容量瓶中，定容至刻度，加塞后搖勻，得到待測(cè)液，上機(jī)測(cè)定。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

采用逐級(jí)稀釋法，使用丙酮先將10 μg·mL-1的敵敵畏標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋成1.00 μg·mL-1的敵敵畏標(biāo)準(zhǔn)工作液。再將敵敵畏標(biāo)準(zhǔn)工作液稀釋成濃度為0.01 μg·mL-1、0.02 μg·mL-1、0.05 μg·mL-1、0.10 μg·mL-1、0.20 μg·mL-1和0.50 μg·mL-1的敵敵畏標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。

1.5 氣相工作條件

色譜柱：DB-1701毛細(xì)管色譜柱（30 m×0.53 mm，1.0 μm）；進(jìn)樣量：1 μL，不分流進(jìn)樣；載氣：高純氮?dú)?，流速? mL·min-1；柱箱溫度：130 ℃保持2 min，以8 ℃·min-1程序升溫至230 ℃，保持10 min；進(jìn)樣口溫度：220 ℃；FPD檢測(cè)器溫度：250 ℃；燃?xì)釮2流速：75 mL·min-1；助燃?xì)釧ir流速：100 mL·min-1；尾吹氣N2流量：10 mL·min-1。

2 結(jié)果與分析

2.1 不確定度來源分析

2.1.1 建立數(shù)學(xué)模型

黃瓜中敵敵畏殘留量的計(jì)算公式為

（1）

式中：X為黃瓜中敵敵畏殘留量，mg·kg-1；C為由標(biāo)準(zhǔn)工作曲線獲得的供試液中敵敵畏的濃度，μg·mL-1；V1為提取試劑乙腈體積，mL；V2為分層后吸取乙腈層的體積，mL；V3為待測(cè)液的定容體積，mL；m為黃瓜稱樣量，g。

2.1.2 不確定度來源

根據(jù)測(cè)定過程和數(shù)學(xué)模型可知，測(cè)量不確定度來源包括黃瓜試樣稱量引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel（m）、敵敵畏標(biāo)準(zhǔn)溶液賦值引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel（cb）、試液移取定容體積引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel（V）、標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel（q）以及測(cè)量重復(fù)性引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel（s）。

2.2 測(cè)量不確定度評(píng)定

2.2.1 試樣稱量引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度

使用ME3002E電子天平稱量6次黃瓜試樣，平均質(zhì)量為25.03 g，由該天平的檢定證書查得，示值誤差為0 g，偏載誤差為0.01 g，重復(fù)性誤差為0.01 g，按正態(tài)分布考慮，k值取3，故黃瓜試樣稱量引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度為

g

則黃瓜試樣稱量引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液賦值引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度

敵敵畏溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品編號(hào)為GBW（E）081409，由其標(biāo)物證書可知，其相對(duì)擴(kuò)展不確定度為Ub=6%（k=2），則標(biāo)準(zhǔn)溶液賦值引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為

2.2.3 試液移取定容引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度

提取加入50.0 mL乙腈時(shí)使用50 mL單標(biāo)線吸量管（A級(jí)），分層后移取10.00 mL乙腈層使用10 mL單標(biāo)線吸量管（A級(jí)），供試液定容使用5 mL單標(biāo)線容量瓶（A級(jí)），根據(jù)《常用玻璃量器》（JJG 196—2006）[5]查得，20 ℃時(shí)上述3種玻璃量器的容量允差分別為±0.05 mL、±0.020 mL、±0.020 mL，假設(shè)玻璃量器引入的不確定度服從均勻分布，k取；實(shí)驗(yàn)過程中環(huán)境溫度為20～25 ℃，假設(shè)溫度變化引入的不確定度也服從均勻分布，水膨脹系數(shù)為2.10×10-4 ℃-1，計(jì)算公式及結(jié)果見表1，則該過程引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為

2.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度

將配制的敵敵畏標(biāo)準(zhǔn)工作系列溶液轉(zhuǎn)入進(jìn)樣瓶中，在氣相色譜法儀上測(cè)定，記錄峰面積分別為70.794 pA·s、138.341 pA·s、341.959 pA·s、646.410 pA·s、1 274.002 pA·s和3 511.800 pA·s。以標(biāo)準(zhǔn)工作系列中敵敵畏濃度C為橫坐標(biāo)，測(cè)得的色譜峰面積A為縱坐標(biāo)，經(jīng)Chemstation工作站自動(dòng)擬合線性回歸曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為A=6 917.229 62C，其中斜率b=6 917.229 62，截距a=0。對(duì)黃瓜樣品進(jìn)行6次重復(fù)測(cè)定，得黃瓜樣品中敵敵畏的平均值為0.181 mg·kg-1，代入數(shù)據(jù)模型中計(jì)算得對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線中的敵敵畏濃度C=0.181 μg·mL-1。

由標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度為

式中：SR為敵敵畏標(biāo)準(zhǔn)工作系列溶液峰面積殘差的標(biāo)準(zhǔn)差；P為黃瓜試樣測(cè)定次數(shù)，P=6，C為敵敵畏樣品中的平均濃度，C=0.181 μg·mL-1；為標(biāo)準(zhǔn)工作系列中6個(gè)校準(zhǔn)點(diǎn)敵敵畏濃度的平均值，=0.146 7 μg·mL-1；Ci為標(biāo)準(zhǔn)系列中各校準(zhǔn)點(diǎn)敵敵畏的濃度值。

由標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為

2.2.5 測(cè)量重復(fù)性引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度

對(duì)某黃瓜試樣中敵敵畏殘留量進(jìn)行6次測(cè)定，結(jié)果分別為0.181 mg·kg-1、0.183 mg·kg-1、0.175 mg·kg-1、0.178 mg·kg-1、0.184 mg·kg-1和0.185 mg·kg-1，平均值為0.181 mg·kg-1，標(biāo)準(zhǔn)偏差（s）為0.003 847 mg·kg-1，由此，測(cè)量重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度為

mg·kg-1

則測(cè)量重復(fù)性引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為

2.3 合成和擴(kuò)展不確定度評(píng)定

2.3.1 合成不確定度

綜上，計(jì)算得合成相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為

則合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度為

u（X）=urel（X）×=0.047 0×0.181=0.008 5 mg·kg-1

2.3.2 擴(kuò)展不確定度

近似95%置信概率時(shí)，包含因子k=2，計(jì)算得黃瓜試樣中敵敵畏殘留量測(cè)定的擴(kuò)展不確定度為

U=ku（X）=2×0.008 5=0.017 mg·kg-1

2.4 測(cè)量不確定度結(jié)果

氣相色譜法測(cè)定黃瓜試樣中敵敵畏殘留量的測(cè)量結(jié)果為（0.181±0.017）mg·kg-1，k=2，P=95%。

3 結(jié)論

通過分析評(píng)定氣相色譜法測(cè)定黃瓜中敵敵畏殘留量的測(cè)量不確定度，發(fā)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合引入的不確定度最大，其次為標(biāo)準(zhǔn)溶液賦值，測(cè)量重復(fù)性、試液移取定容及試樣稱量對(duì)標(biāo)準(zhǔn)合成不確定度貢獻(xiàn)較小，因此檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)在采用氣相色譜法檢測(cè)農(nóng)藥殘留時(shí)要重視氣相色譜儀的定期維護(hù)與期間核查等工作，在標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)采購過程中也應(yīng)選擇購買擴(kuò)展不確定度較小的有證標(biāo)物并做好期間核查，此外對(duì)于基層檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)而言，檢驗(yàn)人員的專業(yè)技能提升及持續(xù)能力監(jiān)控也十分重要，只有加強(qiáng)對(duì)檢測(cè)過程中“人、機(jī)、料、法、環(huán)”等5個(gè)要素的質(zhì)量控制，才能降低測(cè)量不確定度，提升檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

參考文獻(xiàn)

[1]鄧榮嬌，李曉敏，胡鵬燕，等.氣相色譜法測(cè)定果蔬中敵敵畏加標(biāo)含量的不確定度評(píng)定[J].家電科技，2022（增刊1）：769-773.

[2]翟洪穩(wěn)，范素芳，王娟，等.測(cè)量不確定度在食品檢驗(yàn)中的應(yīng)用及進(jìn)展[J].食品科學(xué)，2021，42（5）：314-320.

[3]中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部.蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測(cè)定：NY/T 761—2008[S].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2008.

[4]國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.測(cè)量不確定度評(píng)定與表示：JJF 1059.1—2012[S].北京：中國(guó)質(zhì)檢出版社，2012.

[5]國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.常用玻璃量器：JJG 196—2006[S].北京：中國(guó)計(jì)量出版社，2006.