Study on improvement effect of hydrogen free radical water on depression?like behavior induced by chronic unpredictable mild stress

LI Xiaole1， HAN Shifan2，3，4，5，6，7*， CHENG Junxiang2，8， ZHU Ruifang2， PAN Mengyi8， YOU Kaiqi8， WU Jing1， ZHANG Hong1， ZHANG Xiaohui1， ZHANG Qian1， ZHAO Yu1，8， SONG Jie1，8， FENG Yaoqing9， DONG Wenjing8， LIU Qia8

1.Shanxi Bethune Hospital， Shanxi Academy of Medical Sciences， Tongji Shanxi Hospital， Third Hospital of Shanxi Medical University， Shanxi 030032 China；2.First Hospital of Shanxi Medical University；3.Shanxi Quanneng Family Nurse Pharmaceutical Technology Co.， Ltd；4.Shanxi Medical Periodical Press Co.， Ltd；5.Shanxi Province Dietary Therapy and Agricultural Product Prescription Industry Technology Innovation Strategic Alliance；6.Shanxi Province's Major Platform Carrier and Training Base for the Integration of Health Education and Industry；7.Shanxi Medical University Dietary Therapy Technology Research Center；8.Nursing College of Shanxi Medical University；9.Nursing College of Inner Mongolia Medical University

*Corresponding Author" HAN Shifan， E?mail： shifan.han@sxmu.edu.cn

Abstract" Objective：To observe the safety of hydrogen free radical water and its improvement effect on depression?like behavior in rats.Methods：20 Sprague Dawley（SD） rats of 6 weeks of age in which half was male and half was female were randomly divided into the experimental group and the control group based on body weight.During the experiment，high concentration hydrogen" free" radical" water and equal amount of distilled water were given gavage，respectively.After gavage，the general conditions and body weight changes of the rats in each group were observed and recorded，and related pathological examinations were carried out.32 male SD rats of 4 weeks of age were randomly divided into the normal control group，model group，low concentration group，high concentration group based on body weight.Chronic unpredictable mild stress intervention was carried out for 6 weeks in the model group，low concentration group，high concentration group.Chronic unpredictable mild stress rat depression model was constructed.The effects of hydrogen free radical water on depressed rats was evaluated by observing the behavioral indexes and serum corticosterone.The short?term safety of hydrogen free radical water was preliminarily evaluated by comparing the results of blood routine，blood biochemistry and pathological sections of each group.Results：When the rats were of the same sex，there were no significant differences in the growth rate" of" body" weight at the same time point and" organ" index of vital" organs between experimental group and control group（Pgt;0.05）.After 6?week CUMS，rats showed depression?like behavior，which could be effectively alleviated in low concentration group and high concentration group.The blood routine results of each group were within the normal range.Although the level of alkaline phosphatase in low concentration group and high concentration group was lower than that in normal control group（Plt;0.05），there was no significant difference compared with model group（Pgt;0.05）.There were no significant differences in the comparison of γ?glutamyltransferase，urea，creatinine，aspartate aminotransferase，and serum albumin among normal control group，model group，low concentration group，high concentration group（all Pgt;0.05）.Microscopically，it was found that the degeneration and necrosis of renal tubular epithelial cells in the model group was more serious than that in the high concentration group.Minor inflammatory cell infiltration was observed locally in the submucosa of the bladder in the model group，but not in the high concentration group.No significant abnormalities were observed in the other organ tissues in the high concentration group compared with the normal control group.Conclusion：Under the experimental conditions，the results of this study don't indicate any acute or short?term toxic effects or toxicological profiles of hydrogen free radical water，and suggest that it may have a protective effect against chronic unpredictable mild stress?induced depressive?like behaviors，possibly with a dose?dependent effect.

Keywords" " hydrogen free radical water； chronic unpredictable mild stress， CUMS； depression?like behavior； security； corticosterone； animal experimentation

摘要" 目的：觀察氫自由基水的安全性及其對(duì)大鼠抑郁樣行為的改善效果。方法：將20只雌雄各半的6周齡Sprague?Dawley（SD）大鼠基于體重隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)期間分別給予高濃度氫自由基水和等量蒸餾水灌胃，觀察并記錄各組大鼠的一般情況、體重變化并進(jìn)行相關(guān)病理學(xué)檢查。將32只雄性4周齡SD大鼠基于體重隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、低濃度組、高濃度組，對(duì)模型組、低濃度組、高濃度組大鼠進(jìn)行慢性不可預(yù)測(cè)輕度應(yīng)激干預(yù)6周，構(gòu)建慢性不可預(yù)測(cè)輕度應(yīng)激大鼠抑郁模型，通過(guò)觀察各組大鼠行為學(xué)指標(biāo)、血清皮質(zhì)酮水平評(píng)估氫自由基水對(duì)抑郁大鼠的影響；通過(guò)比較各組大鼠血常規(guī)、血生化及病理切片結(jié)果初步評(píng)價(jià)氫自由基水的短期安全性。結(jié)果：相同性別時(shí)，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組同期體重增長(zhǎng)率、重要器官臟器指數(shù)比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Pgt;0.05）。為期6周的慢性不可預(yù)測(cè)輕度應(yīng)激干預(yù)大鼠呈現(xiàn)了抑郁樣行為，低濃度組、高濃度組能有效緩解；各組血常規(guī)結(jié)果均在正常范圍內(nèi)；低濃度組、高濃度組堿性磷酸酶水平雖低于正常對(duì)照組（均Plt;0.05），但與模型組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05）；正常對(duì)照組、模型組、低濃度組、高濃度組γ?谷氨酰氨基轉(zhuǎn)移酶、尿素、肌酐、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、血清白蛋白比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Pgt;0.05）；鏡下發(fā)現(xiàn)，模型組腎小管上皮細(xì)胞變性壞死程度較高濃度組更嚴(yán)重，模型組膀胱黏膜下層局部可見輕微炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，而高濃度組未見，其余臟器組織高濃度組與正常對(duì)照組比較均未見明顯異常。結(jié)論：在本實(shí)驗(yàn)條件下，實(shí)驗(yàn)結(jié)果未顯示出氫自由基水有急性和短期毒性效應(yīng)及毒作用特征，并發(fā)現(xiàn)其對(duì)慢性不可預(yù)測(cè)輕度應(yīng)激誘導(dǎo)的抑郁樣行為有一定保護(hù)作用，可能具有劑量效應(yīng)。

關(guān)鍵詞" 氫自由基水；慢性不可預(yù)測(cè)輕度應(yīng)激（CUMS）；抑郁樣行為；安全性；皮質(zhì)酮；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

doi：10.12102/j.issn.1009-6493.2024.22.010

2021年世界衛(wèi)生組織（WHO）報(bào)告顯示，全球約有2.8億例抑郁癥病人，每年有超過(guò)70萬(wàn)人因自殺而死亡，自殺是15～29歲人群的第四大死亡原因[1]。預(yù)計(jì)到2030年，抑郁癥在全球疾病總負(fù)擔(dān)中將升至第1位[2]，抑郁障礙已成為重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題[3]。目前，抑郁癥治療成功率約為50%，20%～30%的抑郁癥病人需要長(zhǎng)期或終身治療[4]，急需尋求預(yù)防和治療疾病的新方式。關(guān)于抑郁癥炎癥病因假說(shuō)研究已逐漸成為抑郁癥發(fā)病機(jī)制的研究熱點(diǎn)[5]，NOD樣受體熱蛋白結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白3（NOD?like receptor thermal protein domain associated protein 3， NLRP3）炎癥小體被認(rèn)為是潛在的抑郁癥炎性標(biāo)志物之一[6]。已有研究表明，富氫水可以有效抑制海馬和前額葉皮層NLRP3炎性小體激活，減少白細(xì)胞介素?1β（IL?1β）和活性氧（ROS）的生成，改善慢性不可預(yù)測(cè)輕度應(yīng)激（chronic unpredictable mild stress，CUMS）誘導(dǎo)的抑郁樣行為[7]。許多學(xué)者認(rèn)為，氫之所以能在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域發(fā)揮作用是基于其選擇性抗氧化清除細(xì)胞毒性自由基的特性[8?9]，氫自由基水是利用氫自由基溶解技術(shù)將氫自由基穩(wěn)定地溶解在水中以提高水的健康價(jià)值的新型氫健康飲品。適量的氫自由基可以與其他自由基或大分子物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，起到清除毒性自由基、維護(hù)細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)的作用。目前，有關(guān)氫自由基水的研究有限，其毒理安全性基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)——急性經(jīng)口毒性實(shí)驗(yàn)[9?11]結(jié)果及健康益處尚不完全明確，使臨床抑郁癥飲食護(hù)理健康食品的選擇與應(yīng)用受到限制。研究氫自由基水的安全性及其對(duì)抑郁癥的保護(hù)作用對(duì)減輕抑郁癥的公共衛(wèi)生負(fù)擔(dān)，制訂預(yù)防和改善抑郁癥的飲食護(hù)理策略具有重要意義。

1" 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象

1）氫自由基水的急性經(jīng)口毒性實(shí)驗(yàn)：Sprague?Dawley（SD）大鼠20只，無(wú)特定病原體（SPF）級(jí)，6周齡，雌雄各半。2）氫自由基水對(duì)CUMS誘導(dǎo)的抑郁樣大鼠的干預(yù)效果研究：32只雄性SD大鼠，SPF級(jí)，4周齡。受試大鼠均由山西醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，本研究涉及的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已通過(guò)山西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理審查（批準(zhǔn)編號(hào)為：SYDL2023037）。

1.2 實(shí)驗(yàn)樣品

2種氫自由基水的定型產(chǎn)品，即低濃度氫自由基水（low concentration of hydrogen free radicals in water，F(xiàn)L）和高濃度氫自由基水（high concentration of hydrogen free radicals in water，F(xiàn)H），其氫自由基分別為9.61 μmol/L和30.1 μmol/L，均為透明色液體，無(wú)味，桶裝，生產(chǎn)商為恭養(yǎng)堂醫(yī)療科技（上海）有限公司。

1.3 主要儀器與設(shè)備

灌胃針、電子天平、蒸餾水、烏拉坦麻醉劑、實(shí)驗(yàn)室常見解剖器械、顯微鏡、離心機(jī)、移液槍、全自動(dòng)生化分析儀、攤片機(jī)、烘片機(jī)、全自動(dòng)包埋機(jī)。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 氫自由基水的急性經(jīng)口毒性實(shí)驗(yàn)

選擇6周齡SPF級(jí)SD大鼠20只，雌雄各半，適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后基于體重隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每組雌雄各5只。正式實(shí)驗(yàn)前大鼠需禁食不禁水16 h，實(shí)驗(yàn)開始后實(shí)驗(yàn)組使用高濃度氫自由基水以20 mL/kg灌胃3次，間隔6 h；對(duì)照組使用等量蒸餾水以20 mL/kg灌胃3次，間隔6 h。間隔期間實(shí)驗(yàn)組自由飲用氫自由基水，對(duì)照組自由飲用蒸餾水，實(shí)驗(yàn)時(shí)間為14 d。

1.4.2 氫自由基水對(duì)CUMS誘導(dǎo)的抑郁樣大鼠的干預(yù)效果研究

選擇4周齡SPF級(jí)雄性SD大鼠32只，適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后基于體重隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、低濃度組、高濃度組，每組8只，每日固定時(shí)間灌胃1次，灌胃體積均為20 mL/kg，正常對(duì)照組與模型組以蒸餾水灌胃，低濃度組以低濃度氫自由基水灌胃，高濃度組以高濃度氫自由基水灌胃。正常對(duì)照組大鼠每籠2只或3只維持正常的群居飼養(yǎng)，其余組均單籠飼養(yǎng)。對(duì)模型組、高濃度組、低濃度組大鼠進(jìn)行CUMS干預(yù)[7，12?13]，主要包括小籠孤養(yǎng)、24 h晝夜顛倒、4 h噪聲、潮濕墊料、禁食不禁水、擁擠、空墊料、異物、夜間射燈、震蕩、45°傾斜籠子、小管內(nèi)限制運(yùn)動(dòng)等項(xiàng)目，每日隨機(jī)選擇其中1種或2種干預(yù)項(xiàng)目，時(shí)間和規(guī)律不可預(yù)測(cè)，造模時(shí)間為6周。

1.5 觀察指標(biāo)

1.5.1 氫自由基水的急性經(jīng)口毒性實(shí)驗(yàn)

1）灌胃后連續(xù)觀察14 d，觀察內(nèi)容包括大鼠行為活動(dòng)、是否出現(xiàn)中毒及死亡現(xiàn)象等。2）于大鼠灌胃后1、2、3、7、14 d稱重。3）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將大鼠進(jìn)行大體解剖，肉眼觀察大鼠主要臟器病理變化，稱量各臟器重量（g），計(jì)算臟器指數(shù)（臟器指數(shù)=臟器重量/體重×100%）。

1.5.2 氫自由基水對(duì)CUMS誘導(dǎo)的抑郁樣大鼠的干預(yù)效果研究

1）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后進(jìn)行行為學(xué)實(shí)驗(yàn)，包括糖水偏好實(shí)驗(yàn)[14]、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)[12]、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)[14]，通過(guò)電腦監(jiān)測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行記錄。2）試驗(yàn)結(jié)束后采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）進(jìn)行血清皮質(zhì)酮檢驗(yàn)，按照試劑盒操作步驟進(jìn)行操作。3）試驗(yàn)結(jié)束后將大鼠麻醉，經(jīng)下腔靜脈取血進(jìn)行血常規(guī)指標(biāo)（紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)、紅細(xì)胞分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞絕對(duì)值）、生化指標(biāo)（γ?谷氨酰氨基轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶、尿素、肌酐、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、血清白蛋白、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶）測(cè)定。4）大鼠死亡后對(duì)大鼠進(jìn)行大體解剖并行蘇木精?伊紅（HE）染色組織切片，置于光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行組織病理學(xué)觀察，通過(guò)與正常對(duì)照組及模型組比較以初步判斷服用氫自由基水的短期安全性[15]。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 28.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，符合正態(tài)分布的定量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析后再進(jìn)行最小顯著差異法（LSD）檢驗(yàn)；不符合正態(tài)分布的定量資料以中位數(shù)（四分位間距）[M（IQR）]表示，組間比較采用秩和檢驗(yàn)；定性資料以頻數(shù)表示，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2" 結(jié)果

2.1 氫自由基水的急性經(jīng)口毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1.1 大鼠一般情況

連續(xù)觀察14 d，其間實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組大鼠生長(zhǎng)情況良好，大鼠飲食、二便、一般活動(dòng)、常規(guī)狀態(tài)（如呼吸、眼、鼻、口腔、皮膚、被毛等）等均未見異常，無(wú)死亡情況出現(xiàn)。

2.1.2 大鼠體重變化（見表1）

2.1.3 各臟器病理學(xué)狀況

人道處死所有受試大鼠，大體解剖其主要臟器進(jìn)行肉眼觀察，均未見異常。對(duì)大鼠的主要臟器稱重計(jì)算臟器指數(shù)，結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05），見表2。

2.2 氫自由基水對(duì)CUMS誘導(dǎo)的抑郁樣大鼠的干預(yù)效果

2.2.1 4組大鼠抑郁樣行為及血清皮質(zhì)酮水平比較（見表3）

2.2.2 4組大鼠血常規(guī)指標(biāo)比較（見表4）

2.2.3 4組大鼠生化指標(biāo)比較（見表5）

2.2.4 病理學(xué)變化

與正常對(duì)照組相比，高濃度組的心、肝、脾、輸精管均未見異常；腎臟切片顯示：高濃度組與模型組腎組織腎小球結(jié)構(gòu)基本正常，腎小管上皮細(xì)胞均有不同程度的變性壞死，且模型組比高濃度組病變嚴(yán)重；模型組膀胱黏膜下層局部可見輕微炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，高濃度組膀胱組織整體結(jié)構(gòu)正常，黏膜下層未見明顯炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。

3" 討論

3.1 氫自由基水的安全性檢測(cè)

氫自由基水是利用氫自由基溶解技術(shù)將氫自由基穩(wěn)定地溶解在水中以提高水的健康價(jià)值的新型氫健康飲品。目前，有關(guān)氫自由基水的研究有限。食用安全性是功效研究的前提，急性經(jīng)口毒性實(shí)驗(yàn)是毒理安全性研究中最基礎(chǔ)的一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)[9?10]，故本研究在探討氫自由基水抗抑郁效果之前，遵循動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理3R原則，參考食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)28 d經(jīng)口毒性試驗(yàn)[15]，實(shí)施了氫自由基水的急性經(jīng)口毒性實(shí)驗(yàn)，通過(guò)對(duì)大鼠血常規(guī)指標(biāo)、血生化指標(biāo)及病理學(xué)檢查等方面的觀察，初步探討了飲用氫自由基水的短期安全性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：1）在14 d的觀察期內(nèi)，各組大鼠生長(zhǎng)情況良好，日?；顒?dòng)未見異常，皮毛光潔，自主活動(dòng)與行為表現(xiàn)正常，同性別各組間進(jìn)食飲水量差異不明顯，各器官與系統(tǒng)未見異常，無(wú)死亡情況出現(xiàn)。表明氫自由基水并未對(duì)大鼠一般情況產(chǎn)生明顯的毒性效應(yīng)。2）體重是評(píng)價(jià)生長(zhǎng)發(fā)育期受試動(dòng)物健康狀況最敏感的指標(biāo)之一[11]。觀察期間，同性別實(shí)驗(yàn)組大鼠的體重增長(zhǎng)率與同期對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Pgt;0.05），表明實(shí)驗(yàn)組大鼠體重受到受試物的影響不明顯，氫自由基水未對(duì)大鼠的體重產(chǎn)生明顯的不良影響。3）臟器指數(shù)可以靈敏地反映受試物對(duì)受試對(duì)象臟器的綜合影響[11]。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，肉眼觀察大鼠主要臟器無(wú)異常變化，各臟器形態(tài)、顏色、質(zhì)地均正常。同性別實(shí)驗(yàn)組大鼠主要器官的臟器指數(shù)與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Pgt;0.05），表明氫自由基水對(duì)大鼠各主要臟器無(wú)明顯損害。4）大鼠血液學(xué)各組指標(biāo)均在正常生理范圍內(nèi)，表明短期飲用氫自由基水對(duì)大鼠的血常規(guī)無(wú)明顯影響。5）低濃度組、高濃度組腎臟功能指標(biāo)與正常對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Pgt;0.05），說(shuō)明氫自由基水對(duì)腎臟功能影響較小。6）低濃度組丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶低于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），但其在正常生理范圍內(nèi)[16]，故無(wú)實(shí)際意義。低濃度組、高濃度組堿性磷酸酶水平與正常對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Plt;0.05）；正常對(duì)照組堿性磷酸酶水平與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），提示可能是由于慢性應(yīng)激造模致使堿性磷酸酶出現(xiàn)差異，與氫自由基水的“毒性作用”關(guān)系不大。

3.2 氫自由基水對(duì)大鼠抑郁樣行為及皮質(zhì)酮的影響

壓力在抑郁癥的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中扮演著重要角色[17?20]。抑郁癥動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究造模方式較多，CUMS是其最經(jīng)典、使用最廣泛的一種造模方式[21?22]。糖水偏好實(shí)驗(yàn)、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)等行為測(cè)試常被用以評(píng)價(jià)抗抑郁藥的療效[23]。本研究結(jié)果顯示，慢性應(yīng)激刺激6周后，模型組與正常對(duì)照組相比表現(xiàn)出了蜷縮少動(dòng)、易受驚、毛發(fā)粗糙無(wú)光澤，行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表現(xiàn)為模型組糖水消耗量減少，曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)水平運(yùn)動(dòng)降低，強(qiáng)迫游泳靜止時(shí)間占比增加，提示模型組快感缺乏，對(duì)新環(huán)境的探索減少，慢性應(yīng)激降低了大鼠對(duì)周圍環(huán)境的好奇程度，運(yùn)動(dòng)活動(dòng)能力下降，出現(xiàn)絕望情緒，表明抑郁模型建立成功。低濃度組、高濃度組均能提高大鼠糖水消耗量，增加強(qiáng)迫游泳時(shí)間，高濃度組能增加水平運(yùn)動(dòng)距離，可能是由于氫自由基水逆轉(zhuǎn)了以上行為。已有研究表明，富氫水可以增加抑郁小鼠的糖水?dāng)z入量，縮短強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間[7]，增加抑郁樣小鼠的曠場(chǎng)活動(dòng)總距離和平均速度[24]，與本研究結(jié)果相似。Hu等[25]研究結(jié)果表明，富氫水可以抑制體內(nèi)應(yīng)激相關(guān)的IL?1β，使氧化應(yīng)激水平升高，還可通過(guò)抗炎及抗氧化特性有效控制應(yīng)激反應(yīng)。Masuda等[26]研究發(fā)現(xiàn)，富含氫、礦物質(zhì)的天然還原水可減少焦慮相關(guān)行為，防止氧化應(yīng)激水平升高。下丘腦?垂體?腎上腺軸是機(jī)體的一種自我保護(hù)機(jī)制，強(qiáng)烈的慢性應(yīng)激、工作壓力、離婚、失業(yè)和貧窮等均可導(dǎo)致下丘腦?垂體?腎上腺軸負(fù)反饋功能失調(diào)，皮質(zhì)酮釋放增多[12]。抑郁癥病人皮質(zhì)酮水平升高，可隨著抑郁癥狀的緩解而恢復(fù)[27]。本研究結(jié)果顯示，模型組大鼠較正常對(duì)照組大鼠的皮質(zhì)酮濃度升高，與已有研究結(jié)果[6，12]相似，而低濃度組、高濃度組均能不同程度逆轉(zhuǎn)這一情況，與Hu等[25]研究結(jié)果相似。表明氫自由基水可以在一定程度上緩解CUMS誘導(dǎo)的抑郁樣行為，且高濃度可能效果更佳。

4" 小結(jié)

在本實(shí)驗(yàn)條件下，實(shí)驗(yàn)結(jié)果未顯示出氫自由基水有急性和短期毒性效應(yīng)和毒作用特征，并發(fā)現(xiàn)其對(duì)CUMS誘導(dǎo)的抑郁樣行為有一定的保護(hù)作用，可能具有劑量效應(yīng)，后期可繼續(xù)進(jìn)行其他安全性實(shí)驗(yàn)并探討其抗抑郁相關(guān)分子機(jī)制。

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（收稿日期：2024-08-09；修回日期：2024-10-27）

（本文編輯 陳瓊）