摘 要:為探索出適宜州河鯉(Cyprinus carpio zhouhe L.)受精卵孵化和幼苗培育的總氨氮范圍,進一步規(guī)范州河鯉孵化用水的水質(zhì)管理,采用毒理學方法,使用含有系列濃度NH4Cl的養(yǎng)殖用水,對州河鯉受精卵開展孵化試驗,以胚胎發(fā)育速度、孵化率、畸形率、仔魚成活率及安全濃度等指標為參考。結(jié)果表明,試驗條件下,水體總氨氮對各試驗組州河鯉胚胎發(fā)育存在一定滯后作用,對孵化率的影響區(qū)別不明顯,對仔魚畸形率的影響差異顯著,通過仔魚存活情況所得數(shù)據(jù)計算,仔魚養(yǎng)殖水體總氨氮濃度不宜高于0.19 mg/L。
關(guān)鍵詞:州河鯉(Cyprinus carpio zhouhe L.);幼苗;孵化;總氨氮
中圖分類號:S961.2"""" 文獻標志碼:A
文章編號:1004-6755(2025)02-0001-03
氨是魚類的主要代謝廢物,能夠?qū)ζ涿庖?、生長和繁殖產(chǎn)生重要影響[1-3]。水體中氨以離子態(tài)NH+4和非離子態(tài)NH3的形態(tài)存在,兩種形態(tài)可相互轉(zhuǎn)化,并受溫度和pH的影響,因此,在研究氨對養(yǎng)殖品種毒性的過程中,常采用離子態(tài)NH+4試劑如NH4Cl等,作為可控因子開展試驗。州河鯉(Cyprinus carpio zhouhe L.)是天津市重要的“地理標志保護產(chǎn)品”[4],尚未有總氨氮對其胚胎和胚后發(fā)育相關(guān)影響研究的報道。因此,項目組采用含有系列濃度NH4Cl的養(yǎng)殖用水,對州河鯉受精卵開展孵化試驗,以胚胎發(fā)育速度、孵化率、畸形率、仔魚成活率及安全濃度等指標為參考,探索出適宜州河鯉苗種孵化的總氨氮范圍,以期進一步規(guī)范州河鯉孵化用水質(zhì)管理。
1 材料與方法
1.1 試驗材料
" 州河鯉受精卵;WMZK-01型控溫儀、YSI多功能水質(zhì)分析儀;曝氣處理48 h的井水,主要理化指標為pH 8.00,DO 5.50~6.20 mg/L,總氨氮 0.05 mg/L。
1.2 試驗方法
試驗持續(xù)時間約7 d,州河鯉受精卵孵化后繼續(xù)培育3 d。試驗設置5個總氨氮濃度梯度,總氨氮分別為 0.05 mg/L(井水)、5.05 mg/L、10.05 mg/L、15.05 mg/L、20.05 mg/L,分別標記為I—V,每個濃度組設置3個平行試驗,每個平行計數(shù)受精卵150~200粒,采用NH4Cl作為總氨氮濃度調(diào)節(jié)劑。使用WMZK-01控溫儀調(diào)節(jié)試驗水溫維持在(22±0.5)℃范圍。
孵化過程中,每0.5 h即采用解剖鏡觀察胚胎發(fā)育情況1次。每12 h更換50%相同試驗水。按如下公式統(tǒng)計孵化率(HR,%)、畸形率(DR,%)、成活率(SR,%)及安全濃度(SC,mg/L)[5]。
HR=N2/N1×100%
DR=N3/N2×100%
SR=N4/N2×100%
SC=48 h LC50×0.3/(24 h LC50/48 h LC50)2
式中,N1為受精卵的數(shù)量,N2為初孵仔魚的數(shù)量,N3為畸形仔魚的數(shù)量,N4為正常開口攝食仔魚的數(shù)量,LC50為半致死濃度,mg/L。
1.3 數(shù)據(jù)處理
主要使用Excel 2013和SPSS 22.0對相關(guān)數(shù)據(jù)開展處理與分析,顯著性水平設定為0.05。
2 結(jié)果與分析
2.1 水體總氨氮對州河鯉胚胎發(fā)育速度的影響
試驗結(jié)果表明,總氨氮濃度≥10.05 mg/L條件下,胚胎發(fā)育至囊胚早期階段的時間約滯后0.5 h;總氨氮濃度≥5.05 mg/L條件下,胚胎發(fā)育度過原腸期階段的時間滯后0.5~1.5 h;總氨氮濃度≥5.05 mg/L條件下,胚胎發(fā)育到達肌肉效應期的時間滯后約平均0.5 h;總氨氮濃度≥10.05 mg/L條件下,胚胎發(fā)育至心跳期的時間滯后0.5 h~2.5 h;總氨氮濃度≥5.05 mg/L條件下,胚胎破膜時間滯后0.5 h~2 h不等。見表1。
2.2 水體總氨氮對州河鯉受精卵孵化率、仔魚畸形率的影響
不同試驗組孵化率、畸形率統(tǒng)計情況見表2。通過方差分析表明,各試驗組之間受精卵孵化率差異不顯著(P>0.05),各試驗組之間仔魚畸形率差異均表現(xiàn)顯著(P<0.05)。圖1表明,總氨氮濃度變化與仔魚畸形率正相關(guān),方程式為y=2.775 4 x+ 8.389 6;隨著總氨氮濃度的升高,仔魚畸形率升高線性趨勢明顯,R2=0.997 5。
2.3 水體總氨氮對州河鯉幼苗存活率的影響
水體總氨氮對州河鯉幼苗72 h內(nèi)存活率的影響見表3,其中24 h總氨氮半致死濃度為9.83 mg/L,48 h總氨氮半致死濃度為2.71 mg/L,經(jīng)計算,州河鯉仔魚期總氨氮的安全濃度約為0.19 mg/L。
3 討論與結(jié)論
魚類的孵化由孵化酶的釋放和胚胎運動等因素共同作用[6]。據(jù)報道,魚類胚胎期對水體總氨氮的耐受能力高于仔魚甚至幼魚期[7-9]。本試驗中5個試驗組均能孵化出膜,但歷時長短存在區(qū)別,這與王夢杰等[10]對臺灣泥鰍(Paramisgurnus dabryanus ssp.Taiwan)胚胎進行的試驗結(jié)果不同。各試驗組孵化率差異不顯著,畸形率差異顯著,這說明水體中總氨氮含量的增加對州河鯉胚胎、仔魚產(chǎn)生了一定的毒性作用,相似結(jié)果亦見于外界污染物對鳉魚(Fundulus heteroclitus) 胚胎和仔魚的影響[11]。隨著州河鯉仔魚在含有氨氮的水體中滯留時間的延長,半致死濃度逐漸降低,經(jīng)計算其安全濃度約為0.19 mg/L,略高于河川沙塘鱧(Odontobutis potamophila)仔魚的0.14 mg/L[12],遠小于4 日齡太平洋鱈(Gadus macrocephalus)仔魚的11.52 mg/L[13],這可能是由于水環(huán)境中其他理化指標和試驗品種不同。
本試驗得出如下結(jié)論:在本試驗條件下,水體總氨氮對州河鯉胚胎發(fā)育存在一定滯后作用;從孵化率指標觀察,水體總氨氮對州河鯉受精卵孵化階段的影響不明顯,但可能產(chǎn)生內(nèi)在發(fā)育不良的影響,進而使后期仔魚畸形率顯著提高,因此,在孵化過程中,需要提升管理手段、降低氨氮水平;水體中總氨氮對州河鯉仔魚的存活率影響較大,生產(chǎn)試驗過程中應通過換水、添加微生態(tài)制劑等方式,保證其濃度不高于0.19 mg/L。
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The effect of total ammonia nitrogen on the hatching of Cyprinus carpio zhouhe L.
SONG Limin1, TENG Shuqin2, ZHANG Wei1, LIU Xiaolian1
(1.Tianjin Fishery Research Institute,Tianjin 300221,China;2. Jizhou Animal Husbandry and Aquaculture Development Service Centre,Tianjin 301900,China)
Abstract:In order to explore the appropriate range of total ammonia nitrogen for hatching fertilized eggs and cultivating fry of Cyprinus carpio zhouhe L., and further standardize the water quality management, incubation experiments were conducted on fertilized eggs of C. carpio zhouhe L. using aquaculture water containing a series of concentrations of NH4Cl, through toxicological methods, with reference to indicators such as embryo development rate, hatching rate, malformation rate, larval survival rate, and safe concentration. The results showed that under the experimental conditions,the total ammonia nitrogen in the water had a certain lag effect on the embryonic development of C. carpio zhouhe L. in each experimental group,and the effect on hatching rate was not significantly different.The effect on larval malformation rate was significantly different.Based on the data obtained from the survival of larvae,the total ammonia nitrogen concentration in the aquaculture water for larvae should not exceed the level of 0.19 mg/L.
Key words:Cyprinus carpio zhouhe L.; seedling; hatching; total ammonia nitrogen
(收稿日期:2024-10-22)