以檢測(cè)[8]。斑馬魚是一種模式生物，其具有體型小、養(yǎng)成周期短、產(chǎn)卵量大、胚胎透明、成本低等優(yōu)點(diǎn)[9]，是國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織（ISO）認(rèn)可的5 種魚類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物之一，被經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織（OECD）推薦用于各種類型的生態(tài)毒理學(xué)試驗(yàn)[10-11]。本研究擬通過(guò)斑馬魚構(gòu)建氚水長(zhǎng)期暴露動(dòng)物模型，并在此基礎(chǔ)上檢測(cè)斑馬魚子代發(fā)生的改變[12]，初步探討斑馬魚長(zhǎng)期氚水暴露可能導(dǎo)致的子代生物效應(yīng)。1 材料與方法1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所用成年AB 品系野生型斑馬魚購(gòu)自國(guó)家斑馬魚資源

-7］等方式在斑馬魚、小鼠、果蠅、蜜蜂等動(dòng)物上展開。習(xí)得性無(wú)助的動(dòng)物表現(xiàn)出逃避行為/攻擊性減少、焦慮和恐懼增加等現(xiàn)象［8］。但是習(xí)得性無(wú)助實(shí)驗(yàn)中，引發(fā)動(dòng)物行為的刺激往往是厭惡刺激或者中性刺激，動(dòng)物面對(duì)可能獲得獎(jiǎng)勵(lì)的積極刺激也會(huì)產(chǎn)生放棄［9］，但是相關(guān)研究較少。斑馬魚作為常見模式動(dòng)物，單次產(chǎn)卵能達(dá)到三四百顆，編碼蛋白質(zhì)的基因有69%和人類同源［10］，而且腦體積較小，便于進(jìn)行全腦水平的研究［11］。捕食行為開始于斑馬魚受精后的第5 天（5 days post

意yì大dà利lì費(fèi)fèi拉lā拉lā大dà學(xué)xué的de科kē研yán人rén員yuán測(cè)cè試shì了le新xīn孵fū化huà的de斑bān馬mǎ魚yú是shì否fǒu可kě以yǐ識(shí)shí?jiǎng)ebié印yìn在zài白bái色sè缸ɡānɡ壁bì上shànɡ不bù同tónɡ數(shù)shù量liànɡ的de黑hēi色sè豎shù條tiáo的de差chā別bié。結(jié)jié果ɡuǒ發(fā)fā現(xiàn)xiàn，斑bān馬mǎ魚yú幼yòu魚yú在zài孵fū化huà96小xiǎ

210023)斑馬魚作為一種體外受精的模式動(dòng)物，廣泛應(yīng)用于人類多種疾病的研究。由于斑馬魚腫瘤模型與人類腫瘤的高度保守性，許多人類腫瘤相關(guān)通路在斑馬魚腫瘤中存在同源物。早在2005年斑馬魚就用于腫瘤的研究[1]，近來(lái)轉(zhuǎn)基因斑馬魚和腫瘤移植斑馬魚的出現(xiàn)，使其成為具有發(fā)展?jié)摿Φ囊环N腫瘤動(dòng)物模型。1 斑馬魚在腫瘤研究中的優(yōu)勢(shì)斑馬魚屬于非哺乳類脊椎動(dòng)物，比無(wú)脊椎動(dòng)物線蟲和果蠅更加與人類相近，用于體內(nèi)腫瘤增殖、分裂、轉(zhuǎn)移及抗腫瘤藥物的快速篩選研究。斑馬魚先天免疫系統(tǒng)和

]。常年產(chǎn)卵的斑馬魚個(gè)體?。w長(zhǎng)4～5 cm），飼養(yǎng)方便簡(jiǎn)單，產(chǎn)卵量大且易于收集，其早期發(fā)育階段對(duì)外界環(huán)境敏感，是毒性試驗(yàn)的常用模式生物。直接暴露于1,2,4-TCB 中的成年斑馬魚容易受到損傷，對(duì)其胚胎進(jìn)行染毒能夠避免對(duì)其母體的傷害，能更直觀地觀察到胚胎的發(fā)育毒性效應(yīng)。本試驗(yàn)主要研究不同濃度的1,2,4-TCB對(duì)斑馬魚的毒性效應(yīng)，并通過(guò)卵凝結(jié)、孵化率和畸形率等毒理學(xué)終點(diǎn)指標(biāo)觀察其對(duì)斑馬魚胚胎發(fā)育的影響。1 試驗(yàn)方法與材料1.1 受試生物與試劑采用反應(yīng)靈敏

一定的局限性。斑馬魚（zebrafish，Danio rerio）是一種理想的脊椎模式生物，在活體血管研究方面更是具備自身的特點(diǎn)及優(yōu)勢(shì)，已被越來(lái)越多地應(yīng)用于腦血管病的研究當(dāng)中，本文將對(duì)此作一綜述。1 斑馬魚腦血管系統(tǒng)發(fā)育及生物學(xué)特點(diǎn)1．1 斑馬魚的腦血管系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程 斑馬魚在受精后20 h左右，兩條靜脈——原始后腦通道逐漸形成，并沿著后腦腹側(cè)的前后軸平行分布[2]。在受精后28～32 h，新生血管從兩條原始后腦通道的內(nèi)側(cè)芽生，并向中線遷移，垂直于前后軸形成

4]。模式生物斑馬魚作為一種小型水生動(dòng)物，與人類之間大約有70%的基因是直系同源的[5]。斑馬魚特有的透明胚胎可用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)胚胎發(fā)育的過(guò)程，展開各種病理生理現(xiàn)象的研究。斑馬魚還具有繁殖周期短、養(yǎng)殖費(fèi)用相對(duì)較低、可用于高通量藥物篩選的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，在醫(yī)藥研究領(lǐng)域應(yīng)用日益廣泛[6]。因此人們?cè)噲D從斑馬魚的組織中鑒定并表征circRNA[7]，發(fā)掘斑馬魚體內(nèi)與人類基因同源的circRNA，以利用斑馬魚自身優(yōu)勢(shì)，開展與circRNA相關(guān)的更高效、深入的疾病研究。cir

于非哺乳動(dòng)物如斑馬魚中SDC4介導(dǎo)的生物學(xué)功能則鮮有研究。HOFMEISTER等[11]揭示了SDC1-4四種家族蛋白在斑馬魚胚胎期腦部發(fā)育的表達(dá)模式相異，推測(cè)SDC1-4可能在斑馬魚體內(nèi)有不同的生物學(xué)功能。LUO等[12]通過(guò)原位雜交研究發(fā)現(xiàn)SDC4在斑馬魚胚胎期廣泛表達(dá)，并且影響斑馬魚胚胎神經(jīng)發(fā)生過(guò)程中神經(jīng)細(xì)胞的增殖。本文對(duì)斑馬魚SDC4 基因進(jìn)行克隆并測(cè)序驗(yàn)證，分析其在斑馬魚胚胎發(fā)育前10 d的表達(dá)量差異，并且對(duì)斑馬魚SDC4、人SDC4和鼠SDC4

的負(fù)擔(dān)[2]。斑馬魚與人類基因高度同源，可以通過(guò)光照、咖啡因、持續(xù)流動(dòng)水流、感官刺激、電刺激、物理?yè)u晃等方式對(duì)斑馬魚進(jìn)行睡眠剝奪[3-7]，但目前尚未見斑馬魚成魚失眠模型的報(bào)道。該研究探索建立一種斑馬魚成魚失眠模型，并通過(guò)比較睡眠剝奪后斑馬魚的運(yùn)動(dòng)行為、學(xué)習(xí)記憶能力、生物鐘基因表達(dá)和腦部超微結(jié)構(gòu)的改變進(jìn)行評(píng)價(jià)，以期為失眠的機(jī)制和動(dòng)物模型研究提供借鑒和參考。1 材料與方法1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物4月齡同批次野生型AB系雄性斑馬魚160尾，購(gòu)自國(guó)家斑馬魚資源中心，飼養(yǎng)

410081)斑馬魚具有基因組與人類基因組相似度高、基因編輯簡(jiǎn)單、飼養(yǎng)方便等特點(diǎn),而且其水環(huán)境適合多種運(yùn)動(dòng)方案和高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練的開展,是一種新興的研究運(yùn)動(dòng)干預(yù)效果的理想模型[1]。運(yùn)動(dòng)方案的設(shè)計(jì)需要考慮運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度、運(yùn)動(dòng)頻率、運(yùn)動(dòng)時(shí)間和能量供應(yīng)方式。研究表明,不同的運(yùn)動(dòng)干預(yù)方案對(duì)斑馬魚機(jī)能的影響截然不同,合理的運(yùn)動(dòng)方案對(duì)實(shí)現(xiàn)預(yù)期的運(yùn)動(dòng)干預(yù)效果至關(guān)重要[2]。建立斑馬魚有氧運(yùn)動(dòng)能力評(píng)估方法和有氧/無(wú)氧運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練判斷方法,有利于了解斑馬魚能承受的運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度及運(yùn)動(dòng)時(shí)能量

430065）斑馬魚容易大規(guī)模飼養(yǎng)，3 個(gè)月可性成熟，雌魚每周可產(chǎn)卵1 次，每次產(chǎn)卵約為200～300枚，受精在體外完成，透明可見，便于觀察。由于斑馬魚與人類基因同源性高，可作為多種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的斑馬魚備受科研工作者的青睞。目前斑馬魚睡眠剝奪的方式主要有光照、咖啡因、持續(xù)流動(dòng)水流、感官刺激、電刺激、物理?yè)u晃等方式［1-4］。其中持續(xù)流動(dòng)水流、感官刺激和電刺激需要專用的儀器與設(shè)備，而作為誘導(dǎo)睡眠剝奪方便快捷方式的光照與咖啡因?qū)?shí)驗(yàn)室要求較低，運(yùn)用較多。但使用

凋亡[13]。斑馬魚作為一種模式生物由于其不可替代的優(yōu)勢(shì)已經(jīng)獲得越來(lái)越廣泛的應(yīng)用，例如利用藥物處理、外科手術(shù)或者基因編輯技術(shù)構(gòu)建人類疾病模型，可以實(shí)現(xiàn)藥物的高通量篩選，極大地促進(jìn)了藥物研發(fā)進(jìn)程。本研究利用實(shí)驗(yàn)室前期已構(gòu)建成功的tspo功能缺失斑馬魚（tspocpu87）[14]與野生型斑馬魚進(jìn)行對(duì)比，探索了tspo敲除突變體斑馬魚的部分表型，為進(jìn)一步闡明tspo的生理功能以及相關(guān)疾病提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。1 材料與方法1.1 主要儀器與試劑尼羅紅(上海阿拉丁公司)

賴于動(dòng)物模型。斑馬魚用于科學(xué)研究已有80多年的歷史[9]，因具有體積小、繁殖能力強(qiáng)、易于基因改造的優(yōu)點(diǎn)，目前廣泛應(yīng)用于藥物的篩選[10]，在動(dòng)物疾病模型的構(gòu)建中也顯示出了其特有的優(yōu)勢(shì)，然而目前LGMD2G斑馬魚疾病模型的構(gòu)建及致病機(jī)制的研究還處于初步探索階段。本研究利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)致斑馬魚tcap基因突變來(lái)構(gòu)建LGMD2G的活體動(dòng)物模型，并進(jìn)一步利用該模型初步探討tcap基因在LGMD2G中的功能以及潛在作用機(jī)制，旨在為進(jìn)一步研究LG

待進(jìn)一步探究。斑馬魚作為新型模式生物，具有成本低、用藥量少等多種優(yōu)點(diǎn)[10]，可以高通量地進(jìn)行活性物質(zhì)篩選；同時(shí)，斑馬魚與人類有高達(dá)70%以上基因同源性[11]，并且有類似的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system，CNS)形態(tài)[12-14]，作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用于神經(jīng)行為學(xué)和神經(jīng)內(nèi)分泌學(xué)研究具備很大的潛力[15-16]。目前，國(guó)外對(duì)斑馬魚在神經(jīng)方面的研究較為完善，國(guó)內(nèi)關(guān)于斑馬魚相關(guān)研究較少，并且主要集中在利用斑馬魚進(jìn)行藥物毒性篩選，并未對(duì)其進(jìn)

陳立鳳供稿小斑馬魚最近可倒霉了，接二連三地遇到了會(huì)打氣泡“子彈”的槍蝦，正當(dāng)他以為逃出生天時(shí)，誰(shuí)料卻被一槍擊中……小斑馬魚追著老斑馬魚說(shuō)：“你怎么不認(rèn)識(shí)我了？昨天還教過(guò)我捕食呢?！闭f(shuō)起食物，呆滯的老斑馬魚一下子精神起來(lái)，回過(guò)頭說(shuō)：“我現(xiàn)在餓了，想吃掉你。”說(shuō)著，竟然真的轉(zhuǎn)身向小斑馬魚追過(guò)來(lái)，小斑馬魚嚇得臉都白了，趕緊逃命。突然，“轟隆”一聲巨響，震得兩條斑馬魚都昏了過(guò)去，像兩片樹葉一樣，輕飄飄沉入水底。小斑馬魚清醒過(guò)來(lái)之后，看到不遠(yuǎn)處，一只槍蝦正把老斑馬魚

寶全*基因敲除斑馬魚的模型建立及其鋁暴露神經(jīng)毒性相關(guān)研究汪雪雁1，談 勇1，張 芳1，陳 豪1，賀亞南1，李行舟2，趙寶全2*(1. 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)茶與食品科技學(xué)院，合肥 230036；2. 軍事科學(xué)院軍事醫(yī)學(xué)研究院毒物藥物研究所，北京 100850)利用CRISPR/Cas9技術(shù)敲除斑馬魚基因，研究基因在鋁致斑馬魚癡呆中的作用。針對(duì)斑馬魚基因設(shè)計(jì)并制備gRNA，通過(guò)顯微注射技術(shù)將gRNA與Cas9-mRNA混合注入斑馬魚單細(xì)胞胚胎中，利用酶切和基因測(cè)序篩選

A的神經(jīng)毒性。斑馬魚是一種新型的模式生物，相比于嚙齒動(dòng)物而言，斑馬魚具有體型小、易繁殖的特點(diǎn)。斑馬魚的胚胎在體外發(fā)育，易觀察易操作，可實(shí)時(shí)記錄斑馬魚胚胎發(fā)育的動(dòng)態(tài)過(guò)程，適合進(jìn)行多種體外實(shí)驗(yàn)，且目前斑馬魚的實(shí)驗(yàn)技術(shù)均已成熟，如斑馬魚胚胎行為學(xué)實(shí)驗(yàn)、斑馬魚胚胎顯微注射[6]、斑馬魚基因突變體構(gòu)建[7]等。因此，斑馬魚在毒理學(xué)研究、神經(jīng)行為學(xué)研究等方面均有卓越的優(yōu)勢(shì)。在本實(shí)驗(yàn)中，我們進(jìn)行了斑馬魚自主運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)、接觸反應(yīng)實(shí)驗(yàn)、光暗周期實(shí)驗(yàn)，以比較LM609添加前后T

三條活潑可愛的斑馬魚。這三條斑馬魚分別是墨藍(lán)色、粉黃色和肉紅色的，雖然它們的個(gè)頭差不多，但性格卻大相徑庭。先來(lái)說(shuō)說(shuō)墨藍(lán)色的斑馬魚吧！它是這三條小魚中最勤勞的，但也是脾氣最不好的。它平時(shí)只要看見吃的，就會(huì)飛快地游過(guò)去，將食物銜進(jìn)嘴里，然后分給另外兩位小伙伴吃。如果有其他種類的魚搶了它的食物，它一定不會(huì)“嘴下留情”——不游過(guò)去把“奪食者”狠狠地咬上幾口，它是不會(huì)善罷甘休的。粉黃色的斑馬魚膽子最大，大到你可以拿著鑷子逗它玩兒。只要我拿著細(xì)長(zhǎng)的小鑷子輕輕地?fù)芘?/div>

紅領(lǐng)巾·成長(zhǎng) 2021年10期2021-02-10

611137斑馬魚(Danio rerio或Zebrafish)是一種熱帶硬骨魚，最早產(chǎn)于印度、東南亞等熱帶地區(qū)，因其體表具有延伸至尾部的藍(lán)色水平條紋，形似斑馬而得名[1]，此外，又名花條魚、藍(lán)條魚和斑馬擔(dān)尼魚等。通過(guò)對(duì)比斑馬魚與人類基因庫(kù)，發(fā)現(xiàn)斑馬魚與人類基因組具有高度的相似性，相似度高達(dá)87.0%[2,3]，這意味著以斑馬魚為模式生物而取得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果大多數(shù)也適用于人類。因此，筆者結(jié)合國(guó)內(nèi)外近5年文獻(xiàn)報(bào)道，綜述了模式生物斑馬魚在藥物毒性篩選方面的最新研

戴明云單色光對(duì)斑馬魚趨光行為的影響鄧青燕1，盧克祥1，錢衛(wèi)國(guó)2，王偉杰1，戴明云1（1. 上海海洋大學(xué)海洋科學(xué)學(xué)院，上海 201306；2. 浙江海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，浙江 舟山 316022）【】研究個(gè)體和群體斑馬魚對(duì)5種單色光的趨光反應(yīng)。在無(wú)外界光源干擾下，設(shè)置紅光（625±5）nm、黃光（585±5）nm、綠光（525±5）nm、藍(lán)光（455±5）nm、紫光（400±5）nm等5種人工光源光照環(huán)境，利用自制裝置研究個(gè)體和群體斑馬魚在5種單色光照環(huán)境下的趨

01）0 引言斑馬魚(Danio rerio)是一種簡(jiǎn)單的生物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,具有和哺乳動(dòng)物相似的生物結(jié)構(gòu)和生理功能。幾乎透明的胚胎、胚胎的體外發(fā)育以及與人類高達(dá)87%的基因相似性，使得斑馬魚被廣泛用于藥學(xué)領(lǐng)域的研究。模式動(dòng)物斑馬魚在生態(tài)毒理學(xué)、發(fā)育遺傳學(xué)等研究領(lǐng)域已得到廣泛應(yīng)用。近年來(lái)，斑馬魚模型已拓展延伸至人類疾病動(dòng)物模型、藥物代謝及藥物篩選研發(fā)等多個(gè)方面。國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道[1-5]，斑馬魚模型在現(xiàn)代藥學(xué)研究中關(guān)于疾病動(dòng)物模型、藥物活性篩選及代謝研究方向的研究

似的失眠困擾。斑馬魚是目前生命科學(xué)研究中重要的模式脊椎動(dòng)物之一。斑馬魚的基因與人類基因的相似度達(dá)到了87%，這意味著在其身上做藥物實(shí)驗(yàn)所得到的結(jié)果在多數(shù)情況下也適用于人體，因此它受到了生物學(xué)家的重視。像大多數(shù)魚一樣，斑馬魚沒有眼瞼，當(dāng)它們處于不活躍狀態(tài)時(shí)或者僅僅是短暫休息時(shí)，人們很難判斷它們是否在睡覺。如今，研究人類睡眠紊亂癥的美國(guó)和法國(guó)研究小組發(fā)現(xiàn)，斑馬魚不僅可以睡覺，而且也會(huì)受到失眠癥和睡眠不足的折磨。研究人員說(shuō)：“睡眠紊亂這種現(xiàn)象很普遍，而且往往鮮為

的適應(yīng)范圍等。斑馬魚Daniorerio作為一種經(jīng)典模式生物，近年來(lái)被廣泛應(yīng)用于魚類生理代謝、遺傳發(fā)育、干細(xì)胞再生、心血管毒性評(píng)價(jià)等領(lǐng)域的研究[13]。在斑馬魚的趨光研究方面，Oliveira 等[14]和Spence 等[15]研究了斑馬魚對(duì)環(huán)境顏色的辨別和偏好；Fernandes等[16]和Orger 等[17]研究了斑馬魚腦部的光感受器，發(fā)現(xiàn)大腦內(nèi)部的光敏元素可影響其生理和行為；Cameron[18]運(yùn)用電生理方法探討了光感受器在斑馬魚視網(wǎng)膜中神經(jīng)活

顯著性差異。而斑馬魚作為研究早期胚胎發(fā)育的優(yōu)勢(shì)模型之一，2009年有研究通過(guò)原位雜交實(shí)驗(yàn)指出在斑馬魚幼魚發(fā)育過(guò)程早期，tspo主要表達(dá)在內(nèi)細(xì)胞團(tuán)（intermediate cell mass,ICM）中表達(dá)，可能參與原始紅細(xì)胞的分化[17]，但其在斑馬魚生物體發(fā)育過(guò)程中的具體功能未作描述。人類疾病的動(dòng)物模型一直是藥物發(fā)現(xiàn)和機(jī)制探索的重要基石，在疾病動(dòng)物模型中我們才可以更準(zhǔn)確地將基因功能與發(fā)病機(jī)制聯(lián)系在一起。斑馬魚模型在研究基因功能和病理機(jī)制過(guò)程中具有極為突

游龍?zhí)?董曉旭斑馬魚與人類基因同源性高達(dá)85%，擁有廣泛的細(xì)胞色素P450酶參與代謝反應(yīng)，包括氧化、羥基化、接合、去甲基化和甲基化[1-3]，能體現(xiàn)Ⅰ相、Ⅱ相、腸菌及多途徑代謝的綜合結(jié)果。另具有飼養(yǎng)成本低、體外受精、透明易觀察、單次產(chǎn)卵數(shù)較高等特點(diǎn)[4-5]。目前斑馬魚已被美國(guó)國(guó)家衛(wèi)生研究院列為繼人和鼠之后的第三大模式生物，可以快速篩選藥物和定量評(píng)價(jià)待測(cè)化合物的肝毒性作用。大黃為蓼科植物掌葉大黃RheumpalmatumL.、唐古特大黃Rheumtangu

。 而每條雌性斑馬魚1 次能產(chǎn)生200 ～300 個(gè)卵，可以將其放入96 或384 孔板中進(jìn)行培養(yǎng)，斑馬魚胚胎能夠依靠卵黃囊中的營(yíng)養(yǎng)存活，這使得即便是一個(gè)小的實(shí)驗(yàn)室也可以達(dá)到成千上萬(wàn)，甚至上千萬(wàn)的培養(yǎng)規(guī)模[2]。 斑馬魚實(shí)驗(yàn)與細(xì)胞實(shí)驗(yàn)均可以達(dá)到相近的數(shù)量規(guī)模，且斑馬魚作為一個(gè)完整的有機(jī)體，又能夠?qū)λ幬镞M(jìn)行吸收、代謝、分布、排泄，可以用于研究器官間的相互作用以及免疫反應(yīng)等。 所以近年來(lái)斑馬魚的應(yīng)用十分廣泛，本文將對(duì)于斑馬魚在毒理學(xué)中的應(yīng)用進(jìn)行綜述。1 斑馬魚

201203)斑馬魚是科學(xué)研究廣泛使用的一種重要脊椎動(dòng)物模型[1],目前已被廣泛用于遺傳、毒理[2-3]和發(fā)育生物[4]等學(xué)科的研究。Rihel等[5]證明斑馬魚可以作為神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)藥物研究的一個(gè)快速、可靠且成本較低的工具, 在神經(jīng)疾病的病因?qū)W方面與嚙齒動(dòng)物和人類有許多共同性[6]。4～5天的斑馬魚幼魚即可表現(xiàn)出狩獵,回避和趨觸等廣泛的行為學(xué)[7-9]變化,在人類認(rèn)識(shí)疾病的發(fā)病機(jī)制和新藥的研發(fā)過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用[10-11]。斑馬魚的凍結(jié)、旋轉(zhuǎn)[12]

的海分枝桿菌-斑馬魚幼魚模型已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于結(jié)核病致病機(jī)制以及藥物篩選方面的研究，例如結(jié)核病肉芽腫的形成與成熟機(jī)制等基礎(chǔ)研究[10-13]以及依賴熒光的細(xì)菌菌數(shù)計(jì)數(shù)法用于藥物篩選等[14-15]。不同于斑馬魚幼魚，斑馬魚成魚同時(shí)具有先天免疫系統(tǒng)以及后天免疫系統(tǒng)。鑒于后天免疫系統(tǒng)在控制結(jié)核病方面具有關(guān)鍵的作用[16-17]，海分枝桿菌感染斑馬魚成魚模型更為接近正常生理狀態(tài)。目前，盡管海分枝桿菌感染斑馬魚成魚模型已在結(jié)核病致病機(jī)制和結(jié)核病疫苗等方面的研究中廣泛

]。本研究利用斑馬魚作為動(dòng)物模型，聯(lián)合應(yīng)用行為學(xué)、免疫組化、Western blot等方法，研究中藥有效成分鉤藤堿對(duì)METH誘導(dǎo)斑馬魚CPP效應(yīng)的作用機(jī)制。1 材料1.1 藥品與試劑鹽酸甲基苯丙胺(國(guó)家麻醉品實(shí)驗(yàn)室，批號(hào)：1212-9802)；鉤藤堿(日本MATSUURA YKUGYO公司)；鹽酸氯胺酮注射液(規(guī)格：2 mL ∶0.1 g，江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司)；3-氨基苯甲酸乙酯甲基磺酸鹽(JL160318010，江萊生物公司); 抗GluR1抗體(

生潛能，例如：斑馬魚(Daniorerio, zebrafish)作為模式動(dòng)物具有較強(qiáng)的再生能力，它的鰭[2]、心臟[3]、肝[4]、視網(wǎng)膜[5]、脊髓[6]和感覺毛細(xì)胞[7]在損傷后能夠再生，是研究再生問(wèn)題的良好模型[8]。大量研究發(fā)現(xiàn)，組織再生過(guò)程中，F(xiàn)GF、Wnt、Notch、BMP、Hedgehog、IGF等信號(hào)通路參與其中[9-11]。然而，至今組織再生的信號(hào)調(diào)控機(jī)制還沒有被闡述清楚[12-15]。組織再生過(guò)程中，涉及大量細(xì)胞的分裂、增殖生物學(xué)過(guò)

器，那就是——斑馬魚！”我家養(yǎng)著很多條斑馬魚，平日里它們?cè)隰~缸里悠閑地游來(lái)游去，和同伴們嬉戲打鬧，如同一群活潑可愛的小精靈，非常討人喜歡。說(shuō)完，媽媽就撈起兩條斑馬魚，放進(jìn)睡蓮盆里面。斑馬魚見到肥胖的孑孓，就好像餓虎見到了小綿羊，饞貓見到小老鼠一樣，飛快游過(guò)去，毫不客氣地將孑孓吞入口中。別看斑馬魚體型很小，消滅孑孓的效率倒是挺高，很快就吃掉了一大半孑孓。剩下的孑孓嚇得四散奔逃，躲的躲，藏的藏，想利用荷葉作為掩體，垂死掙扎，但還是逃不過(guò)斑馬魚的追捕。兩條斑馬魚

201306)斑馬魚(Zebrafish, Danio rerio)是輻鰭亞綱鯉科短擔(dān)尼屬的熱帶觀賞性淡水魚。斑馬魚最早被用于水體污染，致畸和有毒物質(zhì)的檢測(cè)[1]。1981年，美國(guó)生物學(xué)家Streisinger等[2]首次在Nature上發(fā)表了關(guān)于斑馬魚的文章，介紹了斑馬魚是將遺傳學(xué)、胚胎學(xué)和分子生物學(xué)有機(jī)結(jié)合的一種理想模式動(dòng)物，此后斑馬魚被廣泛用于科學(xué)研究中。斑馬魚相比哺乳動(dòng)物是體外受精，且胚胎透明，可觀察到內(nèi)部的組織器官。成年斑馬魚體長(zhǎng)4～5 cm，胚

可以輕易買到的斑馬魚，已成為生命科學(xué)研究的新寵。斑馬魚與人類基因相似度高達(dá)70%以上，因繁殖力強(qiáng)、體外受精、胚胎透明等生物學(xué)特征，被譽(yù)為“水中小白鼠”。日前，筆者探訪了中科院水生生物研究所的國(guó)家斑馬魚資源中心，這里保藏著1400多個(gè)品系的斑馬魚，已成為全球三大斑馬魚資源庫(kù)之一。目前，國(guó)內(nèi)外科學(xué)家正在利用斑馬魚，開展包括腫瘤等疾病的藥物篩選，以及毒理學(xué)、生物育種學(xué)等方面的研究。最佳養(yǎng)殖溫度28.5℃28℃，是國(guó)家斑馬魚資源中心內(nèi)的常溫?！斑^(guò)熱容易滋生細(xì)菌，過(guò)

克隆聯(lián)合暴露對(duì)斑馬魚胚胎的神經(jīng)毒性作用陳香平1，黃長(zhǎng)江2，陳元紅2，劉濱3，劉翠平3，朱亞先4，張勇1,*1. 近海海洋環(huán)境科學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(廈門大學(xué))，廈門大學(xué)環(huán)境與生態(tài)學(xué)院，廈門 3611022. 溫州醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生與管理學(xué)院，溫州 3250353. 溫州出入境檢驗(yàn)檢疫局，溫州 3250274. 廈門大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院化學(xué)系，廈門 361102以斑馬魚(Danio rerio)為研究對(duì)象，探討鉛(Pb)、得克隆(DP)及二者聯(lián)合急性暴露對(duì)斑馬魚胚胎的

·埃德蒙茲一條斑馬魚不過(guò)三、四厘米長(zhǎng)，可這小小的魚類卻在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域發(fā)揮著大作用。斑馬魚可以在實(shí)驗(yàn)中充當(dāng)人類的角色，二者同為脊椎動(dòng)物，有許多身體部位是類似的，包括大腦、心臟、肝臟和腎臟。并且，基因組測(cè)序顯示，84%的人類致病基因也能在斑馬魚中找到。自2001年昆士蘭大學(xué)的細(xì)胞生物學(xué)家本·霍根開始研究斑馬魚以來(lái)，它們?cè)趯?shí)驗(yàn)室中的使用率急劇上升，他說(shuō)。這種魚的優(yōu)點(diǎn)之一是它們是一目了然的。因?yàn)榕咛ナ峭该鞯?，并且在母體以外發(fā)育，所以科學(xué)家就可以通過(guò)操縱基因來(lái)模

水族新貴斑馬魚斑馬魚又名藍(lán)條魚、花條魚、藍(lán)斑馬魚、印度魚、印度斑馬魚，鯉科屬，原產(chǎn)印度。因體色艷麗，深受水族愛好者喜愛。斑馬魚的生活特征斑馬魚的品種：斑馬魚體長(zhǎng)為4～6厘米，最大體長(zhǎng)可達(dá)8厘米。體呈紡錘形，稍側(cè)扁。斑馬魚頭稍尖身上有斑馬樣的條紋，故得名斑馬魚。其背部為橄欖色，體側(cè)從頭至尾布滿多條藍(lán)色條紋，雄魚為深藍(lán)間檸檬色條紋，雌魚為藍(lán)色間銀灰色條紋。斑馬魚眼眶虹膜黃色，泛紅光。斑馬魚的臀鰭寬大。與背鰭相對(duì)應(yīng)，胸鰭較小。斑馬魚的品種約有10多種，有長(zhǎng)鰭斑馬

死因子α突變型斑馬魚在海分枝桿菌感染中的應(yīng)用研究謝玲玲1，王風(fēng)華2，王德成3，趙超1，彭剛2，牛辰11. 復(fù)旦大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)分子病毒學(xué)教育部/衛(wèi)生部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 200032； 2. 復(fù)旦大學(xué)腦科學(xué)研究院，上海 200032； 3. 三峽大學(xué)醫(yī)學(xué)院，宜昌 443002腫瘤壞死因子α (tumor necrosis factor α，TNF-α)作為重要的炎性細(xì)胞因子，在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、感染性休克等疾病的發(fā)病中起重要作用。為探究TNF-α在宿主抵抗海分

300301）斑馬魚在藥物毒性評(píng)價(jià)中的應(yīng)用段 蕊，吳昊澤（天津藥物研究院新藥評(píng)價(jià)有限公司，天津 300301）目前在國(guó)內(nèi)的新藥研發(fā)領(lǐng)域，迫切需要建立有效而又經(jīng)濟(jì)的藥品早期安全性能評(píng)價(jià)體系，在臨床之前進(jìn)行試驗(yàn)階段，藥品的研發(fā)主要的研究對(duì)象是細(xì)胞，通過(guò)細(xì)胞對(duì)藥物以及體外實(shí)驗(yàn)。使用這種方法的優(yōu)勢(shì)在于高效并且快速，但是也是有很多缺陷，所以在對(duì)藥物進(jìn)行研發(fā)的過(guò)程中，需要一種動(dòng)物模型作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，來(lái)整體評(píng)價(jià)藥物的安全性。本文就斑馬魚在藥物毒性評(píng)價(jià)中的應(yīng)用進(jìn)行分析，以供

翟文我家有一條斑馬魚，雖然它長(zhǎng)得不錯(cuò)，可是它的性格就沒那么好嘍。它外表美麗，魚鱗只要碰著陽(yáng)光就會(huì)發(fā)出彩虹般的光線。最漂亮的是它那長(zhǎng)長(zhǎng)的鰭，游動(dòng)時(shí)鰭總是在后面拖著，頗像披了一層白色透明的紗。當(dāng)我準(zhǔn)備叫它“彩虹使者”時(shí)，我發(fā)現(xiàn)我錯(cuò)了。 ?斑馬魚已經(jīng)陪伴我一年多了。這一年多來(lái)，它總愛追其他的魚。一開始，我以為是在嬉戲打鬧，結(jié)果很快發(fā)現(xiàn)它們的“嬉戲打鬧”逐漸演化成了追殺。斑馬魚總是追著其他的魚，一旦追上對(duì)方，就對(duì)這條魚猛撕亂咬，最終這條可憐的小魚就走上了黃泉路

似的失眠困擾。斑馬魚也會(huì)失眠斑馬魚是目前生命科學(xué)研究中重要的模式脊椎動(dòng)物之一。斑馬魚的基因與人類基因的相似度達(dá)到了87%，這意味著在其身上做藥物實(shí)驗(yàn)所得到的結(jié)果在多數(shù)情況下也適用于人體，因此它受到了生物學(xué)家的重視。像大多數(shù)魚一樣，斑馬魚沒有眼瞼，當(dāng)它們處于不活躍狀態(tài)時(shí)或者僅僅是短暫休息時(shí)，人們很難判斷它們是否在睡覺。如今，研究人類睡眠紊亂癥的美國(guó)和法國(guó)研究小組發(fā)現(xiàn)，斑馬魚不僅可以睡覺，而且也會(huì)受到失眠癥和睡眠不足的折磨。研究人員說(shuō)：“睡眠紊亂這種現(xiàn)象很普遍

陳立鳳小斑馬魚追著老斑馬魚說(shuō)：“你怎么不認(rèn)識(shí)我了？昨天你還教過(guò)我捕食呢。”說(shuō)到食物，呆滯的老斑馬魚一下子來(lái)了精神，說(shuō)：“我現(xiàn)在餓了，想吃掉你?！闭f(shuō)著，竟真的轉(zhuǎn)過(guò)身，張開大嘴來(lái)咬小斑馬魚，嚇得小斑馬魚臉都白了。小的在前面逃，老的在后面追。突然，“轟隆”一聲巨響，震得他倆昏死過(guò)去。兩條斑馬魚像兩片落在水里的樹葉，輕飄飄地沉入水底。等小斑馬魚清醒過(guò)來(lái)后，他看到不遠(yuǎn)處，一只槍手對(duì)蝦正把老斑馬魚當(dāng)作美食吃得津津有味。小斑馬魚嚇得趕緊鉆進(jìn)礁石堆，躲在石頭縫里，藏好后，

201203）斑馬魚模型在藥物非臨床毒代動(dòng)力學(xué)研究中的應(yīng)用趙琪，汪溪潔，馬璟（中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)研究總院國(guó)家上海新藥安全評(píng)價(jià)研究中心，上海201203）斑馬魚是一種簡(jiǎn)單的生物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，擁有和哺乳動(dòng)物相似的生物結(jié)構(gòu)與生理功能。斑馬魚模型在藥物毒代動(dòng)力學(xué)的研究應(yīng)用前景十分廣闊，采用斑馬魚模型研究藥物在體吸收、分布和代謝過(guò)程，能夠減少實(shí)驗(yàn)研究的假陰性或假陽(yáng)性結(jié)果，提高實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性；采用斑馬魚模型進(jìn)行一般毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)的毒代動(dòng)力學(xué)研究，有助于一般毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)研究的劑量選擇和靶器

理與毒理專欄*斑馬魚模型在藥物早期安全性評(píng)價(jià)中的應(yīng)用劉可春，孫晨，王希敏，侯海榮（山東省科學(xué)院生物研究所，山東 濟(jì)南 250014）在藥物研發(fā)領(lǐng)域，建立經(jīng)濟(jì)、有效的藥物早期安全性評(píng)價(jià)技術(shù)已成為當(dāng)前國(guó)內(nèi)外的迫切需求。斑馬魚作為常用的三大模式動(dòng)物之一，是一種理想的藥物早期安全性評(píng)價(jià)模型。采用該模型對(duì)新藥進(jìn)行早期安全性評(píng)價(jià)可以提高藥物早期毒性預(yù)測(cè)的可靠性和靈敏度，縮短新藥研發(fā)周期，降低新藥研發(fā)成本，提高新藥研發(fā)成功率。本文綜述了斑馬魚模型在藥物早期安全性評(píng)價(jià)，如

2)靈芝多糖對(duì)斑馬魚存活、發(fā)育和衰老的影響夏廣清1，姚慧敏2，董麗紅3，劉 偉1(通化師范學(xué)院1.生命科學(xué)學(xué)院；2.制藥與食品科學(xué)學(xué)院；3.化學(xué)學(xué)院，吉林通化 134002)目的 觀察靈芝多糖對(duì)斑馬魚存活、發(fā)育和衰老的影響。方法 取正常受精的斑馬魚卵,在其單細(xì)胞發(fā)育期注射二胺嗎啉代寡核苷酸(MO),制備p53基因敲除斑馬魚模型。正常斑馬魚卵和p53基因敲除斑馬魚卵孵育8 h后,分別加入靈芝多糖1,2和3 g·L－1于28℃繼續(xù)培養(yǎng)3 d,測(cè)定斑馬魚存活率和

點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，國(guó)家斑馬魚資源中心，武漢 430072)在現(xiàn)代生命科學(xué)等相關(guān)學(xué)科的發(fā)展歷程中，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)揮了重要的作用。那些被廣泛認(rèn)同、使用、研究的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物種，被稱為模式動(dòng)物。斑馬魚(Daniorerio)是一種原產(chǎn)于印度半島熱帶淡水水域的新興模式動(dòng)物[1]，它具有胚胎體外受精、體外發(fā)育、發(fā)育迅速、胚體透明、體型較小、性成熟快、產(chǎn)卵量大、適于高通量養(yǎng)殖和篩選等優(yōu)點(diǎn)[2]，因而受到遺傳學(xué)[3]、發(fā)育生物學(xué)[4, 5]、神經(jīng)生物學(xué)[6]、腫瘤學(xué)[7]、再生和干細(xì)胞

張文清，莫志賢斑馬魚(Danio rerio，zebrafish)，是一種常見的熱帶觀賞魚，因其體側(cè)具有像斑馬一樣縱向的暗藍(lán)與銀色相間的條紋而得名。其具有體積小，產(chǎn)卵量大，胚胎繁殖迅速且整體透明，易于活體觀察［1］等特點(diǎn)，作為一種新的模式生物越來(lái)越多的應(yīng)用于各種人類疾病模型的建立以及藥物的高通量篩選。與大鼠、小鼠等哺乳動(dòng)物相比，斑馬魚給藥量少且給藥方式簡(jiǎn)單;與果蠅等低等動(dòng)物相比，斑馬魚基因圖譜與人類有極大的相似;與細(xì)胞模型相比，斑馬魚擁有整體生物優(yōu)勢(shì)以及能

基-2-硫脲對(duì)斑馬魚胚胎發(fā)育與黑色素生成的影響張利軍，史慧勤，苑曉燕，余壽忠，趙 君，彭雙清(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院疾病預(yù)防控制所毒理學(xué)評(píng)價(jià)研究中心，北京 100071)目的 1-苯基-2-硫脲(PTU)可抑制斑馬魚胚胎黑色素的產(chǎn)生，保持斑馬魚透明，便于形態(tài)觀察和信號(hào)檢測(cè)。本文研究了PTU對(duì)斑馬魚胚胎發(fā)育的影響和抑制斑馬魚胚胎黑色素生成，保持斑馬魚透明性的最佳濃度。方法 用不同濃度PTU處理23 hpf(受精后，hours post fertilization，h