陳曉麗　計仁軍　張　茹　康傳亮

[摘要] 氣相色譜和質譜聯(lián)用儀（GC-MS）是開發(fā)最早的色譜聯(lián)用儀器，氣-質聯(lián)用法綜合了氣相色譜和質譜的優(yōu)點，可同時完成待測組分的分離和鑒定，是目前能夠為皮克級試樣提供結構信息的工具，GC-MS法現(xiàn)已廣泛用于藥物濫用監(jiān)測、興奮劑檢測、臨床疾病診斷和藥動學研究等體內藥物的分析。

[關鍵詞] 氣相色譜和質譜聯(lián)用技術；生物藥劑學研究；應用

[中圖分類號] Q657.63[文獻標識碼]A [文章編號]1673-7210（2009）01（b）-007－０2

在色譜聯(lián)用儀中，氣相色譜和質譜聯(lián)用儀（GC-MS）是開發(fā)最早的色譜聯(lián)用儀器，自1957年霍姆斯（Holmes JC）和莫雷爾（Morrell FA）首次實現(xiàn)氣相色譜和質譜聯(lián)用以后，這一技術得到長足的發(fā)展。由于從氣相色譜柱分離后的樣品呈氣態(tài)，流動相也是氣體，與質譜的進樣要求相匹配，最容易將這兩種儀器聯(lián)用，而且氣-質聯(lián)用法綜合了氣相色譜和質譜的優(yōu)點，彌補了各自的缺陷，因而具有靈敏度高、分析速度快和鑒別能力強的特點，可同時完成待測組分的分離和鑒定，特別適用于多組分混合物中未知組分的定性和定量分析，判斷化合物的分子結構，準確地測定化合物的分子量，是目前能夠為皮克級試樣提供結構信息的工具，故可用于測定生物樣品和體液中藥物和代謝物的痕量分析。對揮發(fā)性成分可直接進行定性和定量分析，對不揮發(fā)性成分和熱不穩(wěn)定的物質，可進行適宜的衍生化再進行分析。GC-MS法現(xiàn)已廣泛用于藥物濫用監(jiān)測、興奮劑檢測、臨床疾病診斷、藥動學研究等體內藥物分析。

1 GC-MS在興奮劑檢測中的應用

根據(jù)國際奧委會醫(yī)學委員會的要求，體育運動中的興奮劑檢測唯一能用作確認的儀器是GC-MS。一般興奮劑檢測實驗室都以GC-MS（HP5970/71/72/73）做初篩。初篩一般用選擇離子檢測（SIM）能有較高的靈敏度，初篩有懷疑的樣品必須重新進行檢測，并用樣品與同樣條件下比對物全掃描提供的質譜圖的一致性、保留時間的一致性對檢測物質進行定性。環(huán)丁甲羥氫嗎啡（Nalbunbine，NA）是豆種強效的麻醉鎮(zhèn)痛劑，它與嗎啡的鎮(zhèn)痛強度相似，但作用時間較長。在體育競賽中，運動員利用它減輕受傷后的痛感并產生心理亢奮，提高運動成績，所以被國際奧委會(IOC)禁用。申利等[1]將丁甲羥氫嗎啡陽性尿經酸解、醚洗、乙酸乙酯-異丙醇提取、衍生化后，采用GC-MS分析，檢出了環(huán)丁甲羥氫嗎啡及其一種代謝物，提供了從人尿中檢測NA原形藥物及其主要代謝物的快速靈敏準確的方法。噴布洛爾(Penbutolol，PEN)是1994年新列入國際奧委會禁用藥物的一種β-受體阻斷劑，對其分析和檢測已有報道[3-5]，但所建立的方法僅限于原形[2]或一、兩種代謝物[3，4]。段宏瑾等[5，6]采用氣相色譜-質譜聯(lián)用系統(tǒng)對此藥進行了研究。實驗發(fā)現(xiàn)，PEN原藥在尿中的代謝很快，2 h后的尿中已檢測不到，因而檢測其代謝物十分重要。在實驗中共檢出了6種代謝產物，其中5種在72 h的尿中仍能檢出，大大增加了檢測的可靠性。與此同時，還建立了血中PEN的檢測方法。此方法現(xiàn)已用于對運動員興奮劑的檢查。張亦農等[7]應用GC-MS方法建立了人尿中類固醇類藥物美保龍（Mibolerone）及其代謝產物的監(jiān)測方法，根據(jù)甾體在人體內代謝的一般規(guī)律和對質譜圖的分析，在受試者的尿液中，確認檢出美保龍原形和6種代謝產物，并測定了它們的代謝消除曲線。

2 GC-MS在生物利用度和藥代動力學研究中的應用

楊麗莉等[8]以樟腦為內標，建立了GC-MS法測定冰片和川芎嗪的血藥濃度方法，最低檢出限為2 ng/ml。動物實驗表明，冰片可促進川芎嗪的吸收，通過測定10名健康志愿者含服速效救心丸后冰片的血藥濃度，并擬合了藥代動力學參數(shù)，發(fā)現(xiàn)舌下含服速效救心丸后10 min冰片達到了最高血藥濃度；同時發(fā)現(xiàn)冰片在體內的消除半衰期為（58.23±15.90） min，在服藥90 min后，冰片濃度降至20 ng/ml以下，從而了解了藥物在體內的吸收代謝情況，為合理用藥提供了科學依據(jù)。另外，以麻黃堿為內標，通過三氟醋酐衍生化，采用高效毛細管GC法用GC-MS分離和質量選擇檢測器（GC-MSD）測定了血中的偽麻黃堿的含量。方法靈敏，無干擾，適用于麻黃堿類生物堿的分析，也已成功地用于麻黃堿控釋片的生物利用度和藥代動力學的研究[9]。葉云鵬[10]用氣相層析-質譜研究了人體尿中的川芎嗪代謝產物，采用氣相層析-質譜(美國惠普公司的HP5890Ⅱ GC-HP5971AMSD)和HP-l石英毛細管柱(12m)。柱溫70℃，2.5 min以后以20 ℃/min程序升溫至240℃，進樣口溫度250℃，GC-MS接口溫度280℃，載氣為氦氣，化學電離（chemical ionization）用甲烷氣，掃描范圍100～350 m/z，證實主要代謝產物為3，5，6-三甲基吡嗪甲酸，為進一步闡明人體代謝對川芎嗪藥效和毒性的影響和指導對川芎嗪的結構改造等打下基礎。江驥[11]以氘標記川芎嗪（TMPz）為內標，根據(jù)同位素反稀釋法的原理，采用GC-MS定量技術測定了一組(5例)正常成人在接受恒速靜脈輸注川芎嗪180 min時血漿川芎嗪的濃度變化，并依此進行了藥代動力學的計算。結果表明，TMPz在體內代謝較快，其半衰期為（0.53±0.03） h。朱榮華等[12]用安定（Diazepam，DAP）作內標，建立了測定人血清中氯氮平和去甲氯氮平（desmethyl-clozapine，DCLP）的柱前衍生化氣相色譜-質譜選擇離子監(jiān)測法，并將其成功地應用于服用細胞色素氧化酶P4501A2抑制劑Fluvoxamine前后低劑量CLP的藥代動力學自身對照試驗中。結果顯示，氯氮平的代謝水平明顯受P4501A2活性的影響。

[參考文獻]

[1]申利,徐友宣.人尿中環(huán)丁甲羥氫嗎啡及其代謝物的GC/MS分析研究[J].質譜學報,1995,16(3):27-30.

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[3]Cartoni GP. Detection of β-blocking drugs in urine by capillary column gas chromatography-negative ion chemical ionzation mass spectrometry [J]. J High Resolution Chromatogr Chromatogr Commun,1988,11:528.

[4]Maurer H, Pfleger K. Identification and differentiation of beta-blockers and their metabolites in urine by computerized gas chromatography-mass spectrometry [J]. J Chromatogr,1986,382:147.

[5]段宏瑾.興奮劑檢測中β-受阻滯劑的檢測[J].藥物分析雜志,1991,11:272.

[6]徐友宣,申利,張長久,等.人尿中美沙芬及其代謝產物的氣-質聯(lián)用分析[J].藥學學報,1993,28:156.

[7]張亦農,劉欣,張長久,等.用GC-MS方法檢測人尿中美保龍及其代謝物[J].1997,18(4):39.

[8]楊麗莉,袁倚盛,佟永嶺.冰片和川芎嗪血藥濃度的GC-MSD測定法[J].藥學學報,1994,29(9):697.

[9]楊麗莉,屠錫德.氣相色譜-質譜法測定血中偽麻黃堿[J].藥學學報,1993,28(9):709.

[10]葉云鵬.人體尿中川芎嗪代謝產物的研究[J].中國醫(yī)學科學院學報,1996,18(4):288.

[11]江驥.人體內川芎嗪藥代動力學參數(shù)的穩(wěn)定同位素法測定[J].中國藥學雜志,1994,29(7):416.

[12]朱榮華,王傳躍,趙靖平,等.氣相色譜-質譜法測定氯氮平及其去甲基代謝物[J].色譜,1998,16(4):317.

（收稿日期：2008-09-26）