徐文麗

乙肝病毒前S1抗原(Pre S1)作為一種反映乙肝病毒復(fù)制的新血清學(xué)指標(biāo)，因其方法簡(jiǎn)便、快捷，無需特殊儀器，對(duì)實(shí)驗(yàn)室條件也無特殊要求，近年來已被普遍應(yīng)用于乙型肝炎的實(shí)驗(yàn)室檢查與療效觀察。HBV血清標(biāo)記物(兩對(duì)半)檢測(cè)是目前診斷乙型肝炎最常用的指標(biāo)，主要反映宿主免疫系統(tǒng)對(duì)病毒感染的免疫反應(yīng)狀態(tài)，而在反映病毒復(fù)制方面，目前已有較多證據(jù)顯示其不是很敏感。乙肝病毒載量(HBV-DNA)是檢測(cè)HBV感染最敏感、最準(zhǔn)確的指標(biāo)，是HBV感染的直接證據(jù)，但檢測(cè)成本高，技術(shù)難度大，操作復(fù)雜，對(duì)實(shí)驗(yàn)條件要求較高，尚無法作為常規(guī)檢測(cè)。我們通過檢測(cè)304例乙型肝炎患者血清的Pre S1、乙肝兩對(duì)半、I-IBV-DNA來分析PreS1、HBeAg、I-IBV-DNA之間的相關(guān)性，探討Pre S1在乙肝病毒檢測(cè)中的意義。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來源

所有HBV感染血清陽性標(biāo)本均來自于2007年9月—2008年6月我院感染科門診及住院患者，共304份。

1.2方法

兩對(duì)半采用時(shí)間分辨免疫熒光分析法，試劑購于蘇州新波生物技術(shù)有限公司。HBeAg結(jié)果用定性方式表示，濃度值＞0.03 NCU/mL為陽性。Pre S1采用ELISA法。試劑由中國科學(xué)院上海生物化學(xué)研究所研制，上海阿爾江生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。HBV-NDA采用熒光定量PCR法測(cè)定，試劑購自深圳市匹基生物工程股份有限公司?？截悢?shù)＜10³/mL為陰性，拷貝數(shù)≥10³/mL為陽性。統(tǒng)計(jì)分析采用X²檢驗(yàn)。

2結(jié)果

HBeAg陽性120例，其中HBV-DNA陽性率為93.3％Pre s1陽性率為86.7％；HBeAg陰性184例，其中HBV-DNA陽性率為41.3％，Pre S1陽性率為34.2％，見表1。

在188例HBV-DNA陽性標(biāo)本中，HBeAg陽性112例(陽性率59.6％)，Pre S1陽性142例(陽性率75.5％)。116例HBV-DNA陰性標(biāo)本中，HBeAg陽性8例，陰性108例，特異性93.1％；Pre S1陽性25例，陰性91例，特異性78.4％，提示HBeAg特異性高于Pre sl，見表2(cop-ies/mL＜10³為陰性，copies/mL≥10³為陽性)。

3討論

HBV為嗜肝DNA病毒，含有4個(gè)編碼蛋白的基因組：S基因、C基因、P基因、X基因。S基因編碼得到s蛋白、前S2蛋白和前S1蛋白(前S1抗原)3種HBV外膜蛋白。前S1抗原作為乙肝病毒外膜蛋白的組成成分，存在于球狀完整顆粒(Dane顆粒)及無傳染性的管狀顆粒的表面。

表1數(shù)據(jù)表明，HBV-DNA陽性率在HBeAg陽性組和HBeAg陰性組之間有差異，Pre S1陽性率在HBeAg陽性組和HBeAg陰性組之間有差異，與Theilmann報(bào)道一致，都可作為乙肝病毒存在和復(fù)制的指標(biāo)。在HBeAg陰性血清中，HBV-DNA陽性率為41.3％，Pre S1陽性率為34.2％，說明HBeAg陰性，甚至出現(xiàn)HbeAb陽性也不代表病毒沒有復(fù)制，認(rèn)為可能是HBV在感染宿主后為逃避宿主的免疫應(yīng)答，基因組前C區(qū)末端1896位發(fā)生G-A點(diǎn)突變，產(chǎn)生一個(gè)新的終端密碼子(TAG)，阻斷HBeAg的形成，但不影響HBV的復(fù)制和傳播。且這種變異廣泛存在，這可能是在反映HBV復(fù)制方面HBeAg不如Pre S1靈敏的原因。本組188例HBV-DNA陽性標(biāo)本中，Pre S1陽性142例(陽性率75.5％)顯著高于HBeAg陽性112例(陽性率59.6％)。而116例HBV-DNA陰性標(biāo)本中，HBeAg陽性8例，陰性108例，特異性93.1％；Pm S1陽性25例，陰性91例，特異性78.4％，Pre s1特異性較HBeAg差。分析表1數(shù)據(jù)可知，Pre S1檢測(cè)陽性率與HBV-DNA高度符合。因此，在無條件開展HBV-DNA的醫(yī)院，建議聯(lián)合檢測(cè)Pre S1/HbeAg，對(duì)臨床將更有幫助。

雖然Pre S1檢測(cè)陽性率與HBV-DNA高度符合，但又不完全相同，表2顯示188例HBV-DNA陽性標(biāo)本中，42例Pre S1陰性，推測(cè)與前s區(qū)缺失突變引起Pre S1蛋白表達(dá)缺陷有關(guān)，但并不影響病毒的復(fù)制與裝配；另外116例HBV-DNA陰性標(biāo)本中，25例Pre S1陽性，推測(cè)可能是血清中不存在Dane顆粒，或者是乙肝病毒與肝細(xì)胞基因發(fā)生整合。有報(bào)道血清中的病毒已經(jīng)測(cè)不到了，而肝細(xì)胞內(nèi)仍有病毒存在時(shí)，檢測(cè)Pre S1陽性。

從以上分析可以看出，聯(lián)合檢測(cè)Pre S1/HbeAg既能了解HBV在體內(nèi)的復(fù)制情況，又能了解是否攜帶HBV變異毒株，還能對(duì)疾病的轉(zhuǎn)歸進(jìn)行判斷，為臨床提供幫助。