吳軍俠，趙紅俠

（1.陜西天遠(yuǎn)藥業(yè)有限公司，陜西 西安 710072； 2.陜西誠信制藥有限公司，陜西 渭南 715200）

暖宮七味散收載于1998年版《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·蒙藥分冊》，由白豆蔻、天門冬、手掌參、沉香、肉豆蔻、黃精、丁香7味藥材組方，具有調(diào)經(jīng)養(yǎng)血、暖宮止帶功效，用于治療心、腎臟“赫依”病所致氣滯腰痛、小腹冷痛、月經(jīng)不調(diào)、白帶過多。原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中未收載含量測定項(xiàng)，不能有效控制制劑的質(zhì)量。為此，筆者采用高效液相色譜（HPLC）法測定該制劑中丁香酚含量，報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

L2000型高效液相色譜儀，包括紫外可見光檢測器和N2000色譜工作站；UV－1200紫外－可見分光光度計(jì)；Sartrius BP211D型電子天平；SB3200－T型超聲清洗器。丁香酚對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號為110725－200610）；暖宮七味散（自制）；甲醇為色譜純；超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Shim －pack C18柱(250 mm ×4.6 mm，5!m)；流動相：甲醇 － 水(58 ∶42)；流速：1.0 mL/min；檢測波長：280 nm；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：10!L。

2.2 溶液制備

精密稱取丁香酚對照品，加甲醇制成0.2 g/L的溶液，作為對照品溶液。取樣品粉末適量，研細(xì)，稱取1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，稱定質(zhì)量，放置過夜，超聲處理60 min，放冷，再稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，靜置，取上清液，微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。按處方比例取除丁香外的其他藥材，按制劑處方制備陰性樣品，按供試品溶液制備方法制備陰性對照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

干擾試驗(yàn)：分別精密吸取2.2項(xiàng)下3種溶液各10!L，注入色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果在陰性對照品溶液色譜中未檢出丁香酚色譜峰，表明處方中其他成分對丁香酚的測定無干擾（見圖1）。

圖1 高效液相色譜圖

線性關(guān)系考察：精密稱取丁香酚對照品，加甲醇制成貯備液，分別精密移取該貯備液適量，加甲醇制成系列對照品溶液。分別精密進(jìn)樣10!L測定，以峰面積（Y）對進(jìn)樣量(X）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程 Y=1 066 505 X－24 154，r=0.999 3。結(jié)果表明丁香酚進(jìn)樣量線性范圍是 0.406 4 ～8.128!g。

精密度試驗(yàn)：取同一對照品溶液，按擬訂的色譜條件重復(fù)進(jìn)樣5次，依法測定。結(jié)果丁香酚峰面積的 RSD=0.77%（n=5），表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液，分別于0,2,4,8,12 h時(shí)進(jìn)樣測定。結(jié)果丁香酚峰面積的 RSD=1.32%（n=5）,表明供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

重現(xiàn)性試驗(yàn)：準(zhǔn)確稱取同一批號的樣品6份，依法制備供試品溶液并測定。結(jié)果丁香酚平均含量為28.67 mg/袋，RSD=0.89%（n=6），表明方法重現(xiàn)性良好。

加樣回收試驗(yàn)：精密稱取已精確測定含量樣品6份，分別精密加入丁香酚對照品適量，按供試品溶液制備方法制備溶液并依法進(jìn)樣測定含量，計(jì)算回收率。結(jié)果見表1。

表1 丁香酚加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

2.4 樣品含量測定

依法對3批樣品的丁香酚含量進(jìn)行了測定。結(jié)果批號為20070729，20070731，20070802的每袋樣品中丁香酚含量分別為29.10，29.87，28.29 mg(n=2)。

3 討論

取丁香酚的甲醇溶液，于200～400 nm波長范圍內(nèi)掃描，結(jié)果在280 nm波長處有最大吸收，故選擇280 nm作為檢測波長。

丁香為桃金娘科植物丁香 Eugenia caryophyllata Thunb.的干燥花蕾，有效成分為揮發(fā)油（含量為15% ～20%），其中主要成分為丁香酚，含量為80% ～95%[1]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，丁香具溫中降逆、補(bǔ)腎助陽功效，用于治療脾胃虛寒、呢逆嘔吐、食少吐瀉、心腹冷痛、腎虛陽痿等癥；丁香酚具有抑制血小板聚集、抗氧化和抗衰老、清除活性氧自由基、抗菌、抗炎等多種藥理作用，與本制劑的功能主治有密切的關(guān)系。采用HPLC法測定暖宮七味散中丁香酚含量，為控制該制劑的質(zhì)量提供了依據(jù)。

[1]康廷國.中藥鑒定學(xué)[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2003：304.