李婷婷，馬松濤，馮 云，鄭 利，曾文婷，黃 亞

(成都醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心，四川 成都 610083)

肉桂為樟科(Lauraceae)植物肉桂 Cinnamomum cassia Presl的干燥干皮，枝皮和根皮。肉桂皮含有1%～2%揮發(fā)油，主要成分是肉桂醛(C9H8O)。功效補(bǔ)火助陽、引火歸源、散寒止痛、活血通經(jīng)[1]，用于陽痿、宮冷、心腹冷痛、虛寒吐瀉、經(jīng)閉、痛經(jīng)、溫經(jīng)通脈[2]，還能殺菌、消毒、防腐，特別是對(duì)真菌顯著療效，更具有脂肪分解作用、抗病毒作用、壯陽作用等[3]。筆者試用不同溶劑超聲提取，建立了簡單且有效的高效液相色譜(HPLC)法測定肉桂揮發(fā)油中肉桂醛的含量，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

p680型HPLC色譜系統(tǒng)(戴安中國有限公司);AS150BD－IU型超聲清洗器(天津奧特賽斯有限公司);INO－200型移液器(上海卜昂科學(xué)儀器有限公司);BS224S型電子分析天平。色譜純甲醇(迪馬公司);樂百氏純凈水;肉桂醛對(duì)照品(四川省藥品與生物制品檢驗(yàn)所);肉桂醛樣品(本院自制);甲醇(批號(hào)為090302，成都市科龍化工試劑廠);乙醇(批號(hào)為090404，天津市富宇精細(xì)化工有限公司);正丁醇(批號(hào)為080403，天津市富宇精細(xì)化工有限公司);冰醋酸(批號(hào)為090524，成都市科龍化工試劑廠)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱:C18柱(250 mm × 4.6 mm，5 μm);流動(dòng)相:1% 冰醋酸水溶液(pH=2.52)－甲醇(35∶65);柱溫:30 ℃;流速:1.0 mL/min;檢測波長:290 nm;進(jìn)樣量:10 μL。

2.2 樣品溶液制備

精密稱取肉桂細(xì)粉2.000 0 g，3份，分別裝入帶塞錐形瓶中，分別加入甲醇、乙醇、正丁醇各200 mL，浸泡30 min后，超聲提取40 min，過濾，取續(xù)濾液，再用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸發(fā)濃縮至黏稠液體，制成樣品貯備液，待用。

2.3 定量限檢測

精密量取肉桂醛對(duì)照品10 μL，用甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶中定容，此時(shí)對(duì)照品貯備液的質(zhì)量濃度為0.04 g/L。然后逐漸按一定倍數(shù)稀釋，按上述色譜條件進(jìn)樣10 μL，當(dāng)稀釋至質(zhì)量濃度為0.004 g/L時(shí)得到基線與對(duì)照品峰高比為1∶10。因此，該方法中肉桂醛最低定量限為0.04 ng。

2.4 方法學(xué)考察

標(biāo)準(zhǔn)曲線制備:精密量取對(duì)照品貯備液1 mL，轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶中，用甲醇稀釋后定容待用。分別取 4.0，20.0，40.0，48.0，60.0，72.0，80.0 ng進(jìn)樣。以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)、峰面積(A)為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性回歸方程 Y=3.262 9X －2.853 8，r=0.999 9，可見，肉桂醛進(jìn)樣量在4.0～80.0 ng范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

精密度試驗(yàn):將質(zhì)量濃度為4 μg/mL的對(duì)照品溶液轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣瓶中，精密吸取對(duì)照品溶液10 μL，連續(xù)進(jìn)樣5次。結(jié)果平均峰面積為 122.645 5，RSD=0.19%(n=5)。

穩(wěn)定性試驗(yàn):精密量取2.2項(xiàng)下樣品貯備液，用甲醇稀釋數(shù)倍，得到樣品溶液，分別于 0，2，4，6，8，10，12，24 h 時(shí)進(jìn)樣測定。結(jié)果平均峰面積為 92.531 4，RSD=0.698%(n=8)，表明該樣品在24 h內(nèi)較穩(wěn)定。

重復(fù)性試驗(yàn):精密稱取2.2項(xiàng)下樣品貯備液5份，同樣稀釋數(shù)倍后配成樣品溶液，進(jìn)樣測定。結(jié)果肉桂醛含量的 RSD=0.87%(n=5)，表明該方法的重現(xiàn)性較好。

加樣回收試驗(yàn):精密稱取同一已知肉桂醛含量的樣品，加入高、中、低量級(jí)的肉桂醛對(duì)照品，混合，按樣品溶液制備方法制成適宜濃度，進(jìn)樣 10 μL。結(jié)果見表 1。

表1 肉桂醛加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

2.5 樣品含量測定

取2.2項(xiàng)下不同溶劑提取的樣品貯備液，分別稀釋10倍，進(jìn)樣10 μL。結(jié)果以甲醇、乙醇、正丁醇為提取容劑時(shí)，肉桂醛的含量分別為 1.49，1.24，1.01 mg/g，色譜圖見圖 1。

圖1 高效液相色譜圖

3 討論

采用高效液相色譜法測定肉桂醛的含量，操作簡便，結(jié)果較為滿意。也曾用其他色譜條件測定，如用乙腈－水、甲醇－乙酸、磷酸溶液等[4－5]，但從分離效果、峰形、經(jīng)濟(jì)等綜合考慮，選用了文中所用色譜條件。用不同溶劑超聲提取肉桂醛得到的結(jié)果表明，甲醇的提取效果較好，但方法還需優(yōu)化。

[1]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，2005:91.

[2]施 宇，楊 杰，王 強(qiáng).八種樟屬肉桂組藥用植物中肉桂酸、肉桂醛含量的測定[J].中國野生植物資源，2008，27(3):54－57.

[3]馬蓉蓉，唐意紅，孫兆林，等.RP－HPLC測定不同產(chǎn)地肉桂中桂皮醛和肉桂酸的含量[J].中國現(xiàn)代中藥，2008，10(4):9－11.

[4]薛玉梅，張先芬.高效液相色譜法測定肥兒丸中肉桂酸的含量[J].中醫(yī)藥臨床雜志，2007，19(6):563 －564.

[5]陳建明，陳建真.桑葉黃酮超聲提取工藝的研究[J].中國中醫(yī)藥科技，2009，16(1):282 －284.