炊慧霞,張秀麗,廖興廣,銀恭舉

沙門菌是腸桿菌科一大類重要致病菌,是引起食物中毒的重要病原菌。在我國(guó),引起沙門菌食物中毒的食品類別中肉類食品占重要地位〔1〕。由耐藥性沙門菌引起的暴發(fā)流行,在發(fā)達(dá)國(guó)家和發(fā)展中國(guó)家都有發(fā)生〔2-3〕。為了解鄭州市生肉類食品中沙門菌的污染狀況及其耐藥性,2008年1月至5月我們對(duì)鄭州市市售生肉類食品進(jìn)行了調(diào)查研究,分析如下。

1 材料與方法

1.1 樣品來(lái)源與種類 樣品分別采自鄭州市超市、便利店、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng),共計(jì)186份生肉樣品,其中生禽肉127份、生畜肉59份。

1.2 檢驗(yàn)方法 參照GB/T4789.4-2008方法進(jìn)行檢測(cè);藥敏試驗(yàn)采用紙片法,操作及結(jié)果判讀參照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI/NCCLS)抗微生物藥物敏感性試驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)(2006年)。

1.3 試劑 試劑和干粉培養(yǎng)基購(gòu)自廣東環(huán)凱微生物科技有限公司,柯瑪嘉顯色平板購(gòu)自鄭州博賽生物技術(shù)研究所,沙門菌抗血清購(gòu)自泰國(guó)S ＆ A公司,藥物敏感紙片購(gòu)自英國(guó)Oxoid公司,以上均在有效期內(nèi)使用。

1.4 質(zhì)控菌株 大腸埃希菌ATCC25922,沙門菌CMCC50774,均購(gòu)自中國(guó)生物制品檢定所。

1.5 質(zhì)量控制 樣品檢測(cè)均在本實(shí)驗(yàn)室完成,本實(shí)驗(yàn)室是國(guó)家認(rèn)可實(shí)驗(yàn)室,每年接受國(guó)家疾病預(yù)防控制中心質(zhì)控考核,且考核合格。

2 結(jié) 果

2.1 沙門菌在生肉中的檢出情況 在186份生肉樣品中檢出沙門菌68株,檢出率為36.6%;其中在127份生禽肉中檢出沙門菌 58株,檢出率為45.7%,在59份生畜肉中檢出沙門菌9株,檢出率為15.3%。生禽肉與生畜肉中沙門菌的檢出率差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=14.88,P＜0.01),生禽肉中沙門菌的檢出率高于生畜肉的檢出率。

2.2 沙門菌的血清分型 從生肉中檢出的68株沙門菌血清分型結(jié)果看,共檢出9種血清型的沙門菌,分布于B,C2-C3,D1,F等血清群內(nèi)。排前五位的血清型是腸炎沙門菌、印地安納沙門菌、鼠傷寒沙門菌、阿貢納沙門菌、德?tīng)柋壬抽T菌。其中,生禽肉中檢出的沙門菌血清型占首位的是腸炎沙門菌,其次是印地安納沙門菌,生畜肉中檢出的沙門菌血清型占首位的是德?tīng)柋壬抽T菌,其次是腸炎沙門菌,見(jiàn)表1。

表1 不同種類生肉中各個(gè)血清型沙門菌的檢出情況

2.3 分離菌株的藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果 本次試驗(yàn)采用12種抗生素藥物敏感紙片對(duì)所檢出的68株沙門菌菌株進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)。29株沙門菌多重耐藥,占42.7%,其中耐5種以上抗生素多重耐藥菌株15株,占22.1%。檢出6株超廣譜β內(nèi)酰胺酶ESBLs(+)沙門菌,占8.8%。在12種抗生素中,對(duì)萘啶酸、氨芐西林、四環(huán)素、復(fù)方新諾明、鏈霉素的耐藥率分別達(dá)88.2%、33.8%、26.5%、25.0%和20.6%;對(duì)氨芐西林、頭孢他啶、萘啶酸、環(huán)丙沙星、卡那霉素、鏈霉素、氯霉素均呈現(xiàn)中度敏感;對(duì)阿米卡星、頭孢他啶、頭孢噻肟、環(huán)丙沙星、慶大霉素的敏感率分別達(dá) 95.6%、91.2%、88.2%、85.3%、82.4%,見(jiàn)表2。

3 討 論

從對(duì)鄭州市生肉類食品樣品的檢測(cè)結(jié)果看,127份生肉樣品檢出沙門菌68株,陽(yáng)性率36.6%,提示鄭州市生肉類食品(尤其是生禽肉類食品)中沙門菌污染嚴(yán)重,生肉類食品為引起沙門菌食源性疾病的高危食品。從超市及冷鮮肉店中采集的106份生肉類食品中,沙門菌檢出率為38%,其中生豬肉 36份,檢出率14%,生禽肉70份,檢出率 50%;從集貿(mào)市場(chǎng)中采集的80份樣品中,沙門菌檢出率為35%,其中生豬肉23份,檢出率17%,生禽肉57份,檢出率42%。從超市及冷鮮肉店中采集生肉類食品與從集貿(mào)市場(chǎng)中采集生肉類食品中沙門菌的檢出率差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.15,P＞0.05),二者沙門菌污染程度相當(dāng)。生肉類食品中沙門菌的污染來(lái)源尚不明確,初步懷疑生肉類食品中沙門氏菌的污染是由于屠宰方式及加工處理方法不當(dāng)造成的。

表2 68株沙門菌藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果

本次研究,在68株沙門菌血清學(xué)分型中,腸炎沙門菌占首位,其次分別是德?tīng)柋壬抽T菌、印地安納沙門菌、鼠傷寒沙門菌、阿貢納沙門菌、奧爾巴尼沙門菌、阿伯丁沙門菌、布利丹沙門菌、胥伐成格隆沙門菌。其中,生禽肉中檢出的沙門菌血清型占首位的是腸炎沙門菌,其次是印地安納沙門菌,生畜肉中檢出的沙門菌血清型占首位的是德?tīng)柋壬抽T菌,其次是腸炎沙門菌。與2007年河南省食品中沙門菌污染情況〔4〕相比,血清型種類及其順位有所變化,并且有新的血清型出現(xiàn)。

從河南省腹瀉門診監(jiān)測(cè)點(diǎn)收集的資料來(lái)看,沙門菌引起人類腹瀉的血清型是鼠傷寒沙門菌、腸炎沙門菌、德?tīng)柋壬抽T菌、印第安納沙門菌、阿貢納沙門菌、利齊菲爾德沙門菌、阿姆斯特丹沙門菌。前五位的血清型與生肉類食品檢出的沙門菌血清型相比,血清型種類相同,順位不同(可能是由于不同血清型沙門菌致病力不同和人類自身的個(gè)體差異及生病就診情況不同等原因造成)?？股孛舾行栽囼?yàn)顯示,腹瀉病人糞便中檢出的沙門菌除對(duì)鏈霉素敏感外,對(duì)氨芐西林(40.2%)、頭孢噻肟(4.6%)、頭孢他啶(1.2%)、萘啶酸(58.6%)、環(huán)丙沙星(16.1%)、四環(huán)素(46%)、氯霉素(35.6%)、復(fù)方新諾明(36.8%)均有不同程度的耐藥。與生肉中的沙門菌相比,前者對(duì)氨芐西林、四環(huán)素、氯霉素、復(fù)方新諾明的耐藥率高于后者,而對(duì)頭孢他啶、頭孢噻肟、萘啶酸、鏈霉素的耐藥率低于后者,差異原因初步懷疑是由于臨床與禽畜飼養(yǎng)用藥不同造成的,有待進(jìn)一步調(diào)查研究。生肉中檢出的沙門菌對(duì)鏈霉素表現(xiàn)為耐藥,耐藥率為20.6%,并且表現(xiàn)中度敏感菌株,表明有向耐藥進(jìn)一步發(fā)展的趨勢(shì),若被人類再次感染,不利于臨床治療,對(duì)公共健康造成威脅。

另外,本次研究發(fā)現(xiàn)6株ESBLs(+)沙門菌,占所有檢出菌株的8.8%,因ESBLs(+)菌株也就意味著對(duì)所有青霉素類、頭孢菌素類和氨曲南耐藥,若被人類感染,不利于臨床治療,病人的生命健康受很大威脅。

抗生素在臨床和畜禽飼料中普遍使用,對(duì)于減少許多感染性疾病的發(fā)病率和死亡率,以及許多傳染病的控制發(fā)揮了十分重要的作用,但細(xì)菌耐藥及毒副作用問(wèn)題日益突出,使許多抗生素失效,治療失敗〔5〕。世界衛(wèi)生組織(WHO)在2000年 11月提出了遏制細(xì)菌耐藥性蔓延的全球戰(zhàn)略。其中明確指出抗生素作為飼料添加劑的使用與耐萬(wàn)古霉素腸球菌的出現(xiàn)有關(guān);抗生素在食用動(dòng)物中的使用與食源性致病菌(沙門菌、彎曲菌)的耐藥有關(guān)〔6〕。本次研究,發(fā)現(xiàn)生肉類食品中沙門菌對(duì)12種抗生素均產(chǎn)生不同程度的耐藥,有的菌株出現(xiàn)多重耐藥,甚至出現(xiàn)對(duì)11種抗生素耐藥,鄭州市生肉類食品中沙門菌的耐藥情況嚴(yán)重。提醒相關(guān)監(jiān)管部門對(duì)此寓于重視,加大對(duì)抗生素使用的管理力度,遏制沙門菌耐藥性的蔓延。

〔1〕張秀麗,廖興廣,沈剛建.微生物性食物中毒的檢驗(yàn)及防治〔M〕.鄭州:中原農(nóng)民出版社,2001:127-139.

〔2〕王茂起,冉陸,王竹天,等.2001年中國(guó)食源性致病菌及其耐藥性主動(dòng)監(jiān)測(cè)研究〔J〕.衛(wèi)生研究,2004,33(1):49-54.

〔3〕冉陸,張靜.全球食源性疾病監(jiān)測(cè)及監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)〔J〕.中國(guó)食品衛(wèi)生雜志,2005,17(4):385-386.

〔4〕炊慧霞,張秀麗,廖興廣,等.2007年河南省食源性致病菌的監(jiān)測(cè)結(jié)果分析〔J〕.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2009,19(1)173-175.

〔5〕李曉,羅山,楊慶文,等.云南省食品中食源性致病菌污染調(diào)查〔J〕.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2005,15(7):846.

〔6〕吳愛(ài)武,鄭貴星,江鋒利,等.綠膿桿菌和酶表型檢出與耐藥性分析〔J〕.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2006,16(2):188-189.