王 泳,馬素英

(1.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心;2.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院,河南新鄉(xiāng) 453003)

電針刺激在我國中醫(yī)早已廣泛應(yīng)用于疼痛治療,但其鎮(zhèn)痛機制尚未完全明了。本實驗采用動物行為學(xué)方法,觀察單純電針刺激對大鼠行為學(xué)的影響,以探討電針刺激在鎮(zhèn)痛方面可能的機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 健康成年Wistar大鼠48只,雌雄不拘。

1.2 分組 將48只Wistar大鼠隨機分成4組,每組 12只。正常組不做任何處理;疼痛刺激組在大鼠右側(cè)后腳掌注射福爾馬林 200μl致痛,置于籠內(nèi),飲食活動自由;電針刺激組用針灸治療儀刺激大鼠右側(cè)后肢足三里穴(電針強度3 V,頻率8 Hz)持續(xù)

0.5 h;疼痛加電針刺激組是將動物疼痛刺激后再給予電針刺激。

1.3 自發(fā)痛反應(yīng)監(jiān)測 于實驗前5 d,每日將大鼠置于實驗觀察箱中30 min使之適應(yīng)。實驗時,右后腳掌皮下注射福爾馬林和(或)用針灸治療儀刺激大鼠右側(cè)后肢“足三里穴”后迅速將大鼠放回實驗觀察箱內(nèi),計數(shù)注射后10 min內(nèi)及60 min內(nèi)大鼠注射掌縮足反射次數(shù)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 6.12統(tǒng)計軟件處理,各組結(jié)果以均數(shù)±標準差(±s)表示,各組間比較采用單因素方差分析,組與組之間的兩兩比較采用q檢驗,方差不齊時采用秩和檢驗,檢驗水準 α= 0.05。

2 結(jié)果

疼痛刺激后,第一相、第二相縮足反射次數(shù)均較正常組明顯增多(P＜0.01);單純電針刺激后,第一相、第二相縮足反射次數(shù)與正常組相比無明顯變化(P＞0.05),疼痛加電針刺激組,與正常組相比,第一相縮足反射次數(shù)明顯增多(P＜0.01),而第二相縮足反射次數(shù)無明顯變化(P＞0.05),與疼痛刺激組相比,第一相縮足反射次數(shù)無明顯變化(P＞0.05),第二相縮足反射次數(shù)明顯減少(P＜0.01)。

表1 各組第一相、第二相縮足反射次數(shù)比較(±s,n=12)

表1 各組第一相、第二相縮足反射次數(shù)比較(±s,n=12)

注:與正常組比較,1)P＜0.01;與疼痛刺激組比較,2)P＜0.01。

組別 0～10分(次/5m in) 10～60分(次/5min)正常組 5.12±0.34 4.02±1.32疼痛刺激組 15.45±0.561) 17.11±0.861)電針刺激組 14.80±0.661) 6.34±0.622)疼痛加電針刺激組 14.80±0.661) 6.34±0.622)

3 討論

福爾馬林刺激后,第一相、第二相縮足反射次數(shù)均較正常組明顯增多。炎性痛時,脊髓后角 N0生成增多是多因素綜合作用的結(jié)果。外周傷害性信息的傳入,引起初級神經(jīng)元纖維末梢釋放興奮性氨基酸等神經(jīng)遞質(zhì),這些遞質(zhì)與脊髓神經(jīng)元胞膜上相應(yīng)受體結(jié)合,通過不同途徑激活胞內(nèi)信使分子,促進NOS表達及 N0的產(chǎn)生[1-3]。

單純電針刺激后,第一相、第二相縮足反射次數(shù)及陽性細胞數(shù)與正常組相比無明顯變化,表明單純電針刺激對自發(fā)性痛反應(yīng)及 N0的產(chǎn)生均無影響。

疼痛加電針刺激后,與正常組相比,第一相縮足反射次數(shù)明顯增多,而第二相縮足反射次數(shù)及陽性細胞數(shù)均無明顯變化:與疼痛刺激組相比,第一相縮足反射次數(shù)無明顯變化,第二相縮足反射次數(shù)及陽性細胞數(shù)均明顯減少。表明本實驗中電針刺激可以抑制NOS活性和福爾馬林第二相反應(yīng),對第一相反應(yīng)無明顯影響。大量研究證實[4],低頻電針可激活腦啡肽、內(nèi)啡肽和嗎啡肽,作用于 μ和 δ阿片受體而產(chǎn)生鎮(zhèn)痛。由于神經(jīng)元內(nèi) NOS的激活需興奮性氨基酸等遞質(zhì)激活NMDA受體引起細胞內(nèi)鈣離子濃度增加,因此推測電針通過釋放腦啡肽、內(nèi)啡肽和內(nèi)嗎啡肽等內(nèi)源性阿片肽,一方面抑制傳入神經(jīng)末梢谷氨酸、P物質(zhì)的釋放,影響NMDA受體的激活,另一方面與神經(jīng)元上阿片受體結(jié)合,抑制鈣通道活性,影響鈣離子內(nèi)流,使細胞內(nèi) NOS不能被激活。我們的實驗證實了電針發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用,但其確切機制尚待進一步研究。

[1] 孫曉彩,李文斌,李淑琴,等.鞘內(nèi)注射神經(jīng)激肽-1受體激動劑Sar-SP增強大鼠脊髓一氧化氮合酶表達和一氧化氮生成[J].生理學(xué)報,2003,55(6):677-683.

[2] 李桐楠,李清君,李文斌,等.CGRP8-37對甲醛炎性大鼠自發(fā)痛反應(yīng)及脊髓后角NOS表達和NO含量的影響[J].中國應(yīng)用生理學(xué)雜志,2004,20(3):291-295.

[3] 曾靜波,李文斌,李清君,等.MK-801降低炎性痛大鼠脊髓NOS表達和NO含量[J].生理學(xué)報,2001,53(1):55-60.

[4] Fei H,Sun SI,Han JS.Evidence supporting differential release of dynorphin and enkephalin in the spinal cord by high and low electro-acupuncture in rats[J].Science Bull(Beijing),1998,34:703 -705.