張 曄

依托紅霉素 （erythromycin estolate）為大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，為紅霉素丙酸酯的十二烷基硫酸鹽，對(duì)葡萄球菌屬、各組鏈球菌和革蘭陽性桿菌均具抗菌活性。本品對(duì)除脆弱擬桿菌和梭桿菌屬以外的各種厭氧菌亦具抗菌活性；對(duì)軍團(tuán)菌屬、胎兒彎曲菌、某些螺旋體、肺炎支原體、立克次體屬和衣原體屬也有抑制作用。本品系抑菌劑，但在高濃度時(shí)對(duì)某些細(xì)菌也具殺菌作用。依托紅霉素在水中幾乎不溶，其制劑的類型及工藝可影響其溶出和體內(nèi)的吸收。中國藥典2010年版制劑通則中規(guī)定混懸顆粒應(yīng)進(jìn)行溶出度檢查[1]，依托紅霉素顆粒為混懸顆粒，但正文中對(duì)溶出度檢查并未做規(guī)定[1]，為確保臨床用藥有效，本文通過對(duì)依托紅霉素顆粒溶出行為的考察，并依據(jù)試驗(yàn)結(jié)果建立了紫外分光光度法測(cè)定依托紅霉素顆粒溶出度的方法，可為制定依托紅霉素顆粒溶出度檢查法提供依據(jù)。

1 材 料

UV-240紫外分光光度計(jì)；ZRS-8G型溶出度測(cè)定儀。依 托 紅 霉 素 顆 粒 （75 mg）， 批 號(hào) ：20101105 20110106 20101204，均為市售品。依托紅霉素原料，A廠提供。鹽酸、硫酸均為分析純。

2 方 法

2.1 檢測(cè)波長的選擇 稱取依托紅霉素原料適量，用含0.2%的十二烷基硫酸鈉的鹽酸溶液（9→1000 ml）溶解并稀釋成83 μg/ml的溶液。精密量取5 ml，精密加硫酸溶液（75→100）5 ml，搖勻，放置 30 min，冷卻至室溫，照分光光度法在350～550 nm波長范圍內(nèi)掃描，結(jié)果在482 nm波長處有最大吸收。

2.2 線性范圍考察 稱取依托紅霉素原料適量，用含0.2%的十二烷基硫酸鈉的鹽酸溶液（9→1000 ml）溶解并稀釋成濃度分別為 40、60、80、100、120 μg/ml的溶液。精密量取上述溶液各 5 ml，分別精密加入硫酸溶液（75→100）5 ml，搖勻，放置30 min，照分光光度法在482 nm波長處測(cè)定吸光度，結(jié)果吸光度分別為 0.274、0.415、0.546、0.691、0.838。 回歸方程A=0.007C-0.008 8（r=0.999 6），表明在 40～120 μg/ml范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.3 輔料干擾情況 稱取按處方配制的輔料適量 （約相當(dāng)于平均裝量），加含0.2%的十二烷基硫酸鈉的鹽酸溶液（9→1000 ml）900 ml振搖溶解，用 0.8 μm 濾膜過濾，精密量取續(xù)濾液 5 ml，精密加入硫酸溶液（75→100）5 ml，搖勻，放置30 min，冷卻至室溫，照分光光度法在482 nm波長處測(cè)定吸光度，結(jié)果輔料在此波長處無吸收，表明輔料對(duì)樣品溶出度測(cè)定無干擾。

2.4 溶出行為考察 取批號(hào)20101105批樣品，考察其溶出行為。取樣品6袋，照溶出度測(cè)定法（中國藥典2010年版二部附錄XC第二法），以含0.2%的十二烷基硫酸鈉的鹽酸溶液（9→1000 ml）900 ml為溶出介質(zhì)，分別以轉(zhuǎn)速為 50 r/min和 75 r/min 進(jìn)行溶出， 經(jīng) 5、10、20、30、45 min 時(shí)各取溶出液5 ml，以0.8 μm濾膜過濾，同時(shí)分別補(bǔ)充新鮮介質(zhì)各5 ml。取續(xù)濾液用溶出介質(zhì)稀釋成83 g/ml的溶液，作為供試品溶液。另取本品10袋，分別精密稱定內(nèi)容物重量并計(jì)算平均裝量，混勻，精密稱取適量（約相當(dāng)于平均裝量），用乙醇15 ml溶解后，用溶出介質(zhì)稀釋成83 μg/ml的溶液，濾過，取續(xù)濾液作為對(duì)照溶液。精密量取上述溶液各5 ml，分別精密加入硫酸溶液（75→100）5 ml，搖勻，放置 30 min，冷卻至室溫，照分光光度法在482 nm波長處測(cè)定吸光度，按供試品溶液與對(duì)照溶液吸光度的比值計(jì)算每袋的溶出量。溶出曲線見圖1。

圖1 溶出曲線

結(jié)果表明依托紅霉素顆粒在含0.2%的十二烷基硫酸鈉的鹽酸溶液（9→1000 ml）中溶出性能良好。轉(zhuǎn)速對(duì)其溶出速率影響不大，無論50 r/min還是75 r/min在30 min都能達(dá)到溶出平臺(tái)，且6袋樣品具有良好的溶出均一性（RSD<5.0%）。

2.5 樣品的溶出度測(cè)定 取三批樣品，照溶出度測(cè)定法（中國藥典2005年版二部附錄XC第二法），以含0.2%的十二烷基硫酸鈉的鹽酸溶液（9→1000 ml）900 ml為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50 r/min，依法操作，于30 min時(shí)取溶出液適量，以0.8 μm濾膜過濾，取續(xù)濾液用含0.2%的十二烷基硫酸鈉的鹽酸溶液（9→1000 ml）稀釋成 83 μg/ml的溶液，作為供試品溶液。另取本品10袋，分別精密稱定內(nèi)容物重量并計(jì)算平均裝量，混勻，精密稱取適量（約相當(dāng)于平均裝量），用乙醇15 ml溶解后，用溶出介質(zhì)稀釋成83 μg/ml的溶液，濾過，取續(xù)濾液作為對(duì)照溶液。以下操作同2.4項(xiàng)下，計(jì)算三批樣品的溶出度，結(jié)果均大于90%。

3 討 論

本文選擇用含0.2%的十二烷基硫酸鈉的鹽酸溶液（9→1000 ml）作為溶出介質(zhì)。實(shí)驗(yàn)證明，依托紅霉素顆粒在含0.2%的十二烷基硫酸鈉的鹽酸溶液（9→1000 ml）中溶出良好。考慮到本品為粉末，采用轉(zhuǎn)籃法，往籃中倒樣品時(shí)易撒出，把籃體連接到籃軸時(shí)由于震動(dòng)也會(huì)導(dǎo)致部分細(xì)粉漏出造成誤差，故本文采用槳法試驗(yàn)。依托紅霉素的化學(xué)結(jié)構(gòu)上無共軛雙鍵，在紫外光區(qū)無特征吸收，無法直接用紫外分光光度法進(jìn)行測(cè)定，故用硫酸顯色法測(cè)定。硫酸顯色反應(yīng)時(shí)，能夠放出大量的熱量，為了保持樣品之間的一致性，需要注意硫酸的加入速度應(yīng)比較緩慢，使熱量能夠均勻地逐漸散發(fā)出去，加硫酸后要搖勻，要放置至室溫后再測(cè)定。

本實(shí)驗(yàn)對(duì)轉(zhuǎn)速的影響進(jìn)行了考察，結(jié)果表明50 r/min和75 r/min對(duì)依托紅霉素顆粒的溶出行為影響不大，故建議選擇50 r/min。依托紅霉素顆粒在30 min即能達(dá)到溶出平臺(tái)，建議溶出時(shí)間定為30 min。限度建議參照依托紅霉素片定為70%。

本文采用自身對(duì)照法計(jì)算溶出量，可抵消由主藥原料效價(jià)之間、制劑含量之間以及輔料之間等可能存在的差異對(duì)溶出量測(cè)定的影響。

[1]國家藥典委員會(huì)編.中國藥典[S].二部.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010. 附錄 14，472.