馬魯豫，馬振環(huán)

(1山東中醫(yī)藥大學(xué)，濟南 250011;2陽谷縣中醫(yī)院)

牛蒡又名白肌人參，屬菊科，目前的研究大多集中于牛蒡子和牛蒡葉的化學(xué)成分和藥理活性上，關(guān)于牛蒡根化學(xué)成分的研究較少報道。2008年 10月，我們對牛蒡根的化學(xué)成分進行了系統(tǒng)研究，分離并鑒定了 6個化合物，分別為丁二酸(Ⅰ )、β-D-果糖乙苷(Ⅱ)、齊墩果酸(Ⅲ )、熊果酸(Ⅳ)，β-谷甾醇(Ⅴ)和胡蘿卜苷(Ⅵ)，其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ目前鮮見相關(guān)報道。

儀器與材料:Stuart smp3型熔點測定儀(未校正);NICOLET AVATAR-330型紅外光譜儀;Bruker advanced 400型核磁共振儀(內(nèi)標(biāo)TMS);Varian INOVA-600型核磁共振儀(內(nèi)標(biāo)TMS);Agilent Trap VL型質(zhì)譜儀;色譜用硅膠為青島海洋化工廠產(chǎn)品;所用試劑均為分析純。牛蒡根藥材購自山東濟南，經(jīng)鑒定為菊科牛蒡?qū)僦参锱］虻母?/p>

牛蒡根成分提取與分離:取牛蒡根藥材 15 kg，用乙醇加熱回流提取 2遍，每次 1 h，合并乙醇提取液，回收乙醇至無醇味，得浸膏，水混懸后依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到 4個不同極性部位，其中石油醚部位 60 g、乙醚部位 70g、乙酸乙酯部位 50 g、正丁醇部位 200 g。乙酸乙酯部位用氯仿—甲醇系統(tǒng)梯度洗脫，經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析，結(jié)晶、重結(jié)晶等得到化合物Ⅰ～Ⅵ。

牛蒡根分離化合物結(jié)構(gòu)鑒定:①化合物Ⅰ:為無色顆粒狀結(jié)晶。負 ESI-MSm/z:116.7([M-H]-，準(zhǔn)分子離子峰)，98.7([M-H-H2O]-。正 ESI-MSm/z:140.8([M+Na]+，準(zhǔn)分子離子峰)，101.2[M+H-H2O]+。在1H NMR(DMSO-d6，400 MHz)圖譜中，有 2組質(zhì)子單峰信號，δ:2.45(4H，s)和12.16(2H，s)，質(zhì)子數(shù)比例為 1∶2;13C NMR(DMSO-d6，100 MHz)圖譜數(shù)據(jù)可看到一個羧基碳和脂肪族碳，初步推斷為丁二酸。與丁二酸對照品共薄層，兩者比移值(Rf值)相同。以上理化性質(zhì)、波譜數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致，故鑒定其為丁二酸。②化合物Ⅱ:無色粒狀結(jié)晶。Molish反應(yīng)陽性，茴香醛—硫酸反應(yīng)陽性。負 ESI-MS m/z:116.7([M-H]-，準(zhǔn)分子離子峰)，98.7([M-H-H2O]-。正 ESI-MSm/z:439.8([M+M+Na]+，準(zhǔn)分子離子峰)，230.7([M+Na]+，準(zhǔn)分子離子峰)，208.9([M+H]+，準(zhǔn)分子離子峰)，179.8[M-C2H5]+。1H NMR(D2O，400MHz)圖譜中出現(xiàn)兩組相互偶合的質(zhì)子信號，δ1.08(3H，t，J=7.2 Hz，H-2′)和 δ3.69(2H，q，J=7.2 Hz，H-1′)，故化 合物含有乙 氧基片段;13C NMR(D2O，100 MHz)圖譜數(shù)據(jù)可看到 14.8(C-2′)和 56.7(C-1′)，進一步證實化合物中有乙氧基片段。碳譜中還觀察到5個連氧碳信號和一個縮酮碳信號:61.3(C-1)，100.7(C-2)，69.6(C-3)，69.3(C-4)，68.3(C-5)，63.8(C-6)。以上理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致，故鑒定其為 β-D-果糖乙苷。③化合物Ⅲ:為白色無定形粉末。Liebermann-Burchard反應(yīng)陽性，依據(jù)1H NMR和13C NMR的圖譜特征初步推測為齊墩果烷型五環(huán)三萜類化合物。正ESI-MSm/z:479.2([M+Na]+，準(zhǔn)分子離子峰)，457.1([M+H]+，準(zhǔn)分子離 子峰)，439.1[M-H2O+H]+。在1HNMR(C5D5N，600MHz)圖譜中，可以觀察到 7個甲基質(zhì)子信號，均為單峰。13C NMR數(shù)據(jù)與齊墩果酸數(shù)據(jù)基本一致。與齊墩果酸對照品共薄層兩者 Rf值完全相同。以上理化性質(zhì)、波譜數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致，故鑒定其為齊墩果酸。④化合物Ⅳ:為白色無定形粉末。Liebermann-Burchard反應(yīng)陽性，依據(jù)其1HNMR和13CNMR圖譜特征初步推測為烏蘇烷型五環(huán)三萜類化合物。正 ESI-MS m/z:479.3[M+Na]+，準(zhǔn)分子離子峰)，457.3([M+H]+，準(zhǔn)分子離子峰)，439.3([M-H2O+H]+。在1H NMR(C5D5N，600 MHz)圖譜中，可以看到 7個甲基質(zhì)子信號，其中 5個為單峰，2個裂分為雙峰。13CNMR數(shù)據(jù)與熊果酸的數(shù)據(jù)基本一致;與熊果酸對照品共薄層兩者Rf值完全相同。以上理化性質(zhì)、波譜數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致，故鑒定其為熊果酸。⑤化合物Ⅴ:無色針晶。Liebermann-Burchard反應(yīng)陽性，推測該化合物可能為甾體類;與 β-谷甾醇對照品共薄層 Rf值一致，且混合熔點不下降。以上理化性質(zhì)、波譜數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致，故鑒定為 β-谷甾醇。⑥化合物Ⅵ:白色粉末。Liebermann-Burchard反應(yīng)陽性，用10%的硫酸乙醇溶液顯色為紫紅色，與胡蘿卜苷的紅外光譜(IR)數(shù)值基本相同;與胡蘿卜苷對照品共薄層 Rf值一致，且混合熔點不下降。以上理化性質(zhì)、波譜數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致，由此鑒定為胡蘿卜苷。