蔡良謨， 霍仕霞， 林 娟， 吳培培， 閆 明， 凱賽爾·阿不都克熱木

(新疆維吾爾自治區(qū)維吾爾醫(yī)藥研究所新疆維吾爾醫(yī)方劑學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆烏魯木齊830049)

驅(qū)蟲斑鳩菊Vernonia anthelmintica(L.)Willd為菊科Compositae斑鳩菊屬一年生草本植物，別名印度山茴香(《中國植物志》)、艾特日拉力(《維吾爾語》)，始載于《中國植物志》。本品主要栽培于新疆的和田、阿克蘇及云南西部，國外印度、巴基斯坦等亦有種植［1］。驅(qū)蟲斑鳩菊是民間維吾爾醫(yī)生的常用藥材，其維吾爾藥名為卡拉孜然，是維藥中最常用的增加色素藥之一［2］。藥用部分為該種植物的成熟瘦果，具有清除異常黏液質(zhì)、驅(qū)蟲、消腫、散寒止痛等作用，現(xiàn)多用于治療濕寒性胃痛、肝病、白癜風(fēng)等病癥［3］。白癜風(fēng)的治療主要與其具有抗癌、激活酪氨酸酶活性、提高黑素含量、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫、改善局部微循環(huán)、直接補(bǔ)充局部微量元素等功效有關(guān)［4-6］。近來研究還表明驅(qū)蟲斑鳩菊具有治療糖尿病、抑制高血脂等作用［7］?，F(xiàn)臨床上多應(yīng)用于白癜風(fēng)的治療［8-10］。由于驅(qū)蟲斑鳩菊具有諸多藥理作用，十分有必要對其中的化學(xué)成分進(jìn)行分離，以便做更深入的研究。目前，對于驅(qū)蟲斑鳩菊化學(xué)成分的研究報(bào)道還較少，本研究以天然藥物化學(xué)為手段，對驅(qū)蟲斑鳩菊進(jìn)行了提取分離，本實(shí)驗(yàn)從驅(qū)蟲斑鳩菊乙醇提取物的乙酸乙酯部位中分離得到了4個(gè)化合物，分別鑒定為甘草素(1)、異甘草素 (2)、紫鉚亭 (Butin，3)、紫鉚花素 (Butein，4)。其中，化合物1、2均為首次從驅(qū)蟲斑鳩菊植物中分離得到。

1 儀器與材料

核磁共振儀 (Varian)，1H-NMR 600 MHz，13CNMR 150 MHz;柱層析硅膠 (200～300目)及薄層用硅膠G板均為青島海洋化工廠生產(chǎn);Sephadex LH-20購于北京綠百草有限公司;所用試劑石油醚、乙酸乙酯、三氯甲烷、甲醇等均為分析純。

驅(qū)蟲斑鳩菊Vernonia anthelmintica(L.)Willd采購于新疆維吾爾自治區(qū)維吾爾醫(yī)醫(yī)院草藥房。經(jīng)新疆維吾爾自治區(qū)藥物研究所張彥福研究員鑒定為菊科植物驅(qū)蟲斑鳩菊的干燥成熟果實(shí)。

2 提取與分離

取驅(qū)蟲斑鳩菊藥材5 kg，依次用85%乙醇8倍、6倍、6倍量加熱回流提取3次，每次2 h。提取液合并后減壓濃縮，得到干浸膏490 g，將浸膏用水均勻分散后，先用石油醚萃取脫油脂，再用乙酸乙酯萃取，得到乙酸乙酯提取物52 g。將乙酸乙酯部分以三氯甲烷溶解后與60 g空白硅膠拌樣，干法上樣，依次用三氯甲烷、三氯甲烷-甲醇(100∶2)、三氯甲烷-甲醇 (20∶1)、三氯甲烷-甲醇 (10∶1)、三氯甲烷-甲醇 (5∶1)進(jìn)行梯度洗脫，得到89個(gè)組分。第10～13組分 ［三氯甲烷-甲醇 (50∶1)洗脫］合并后，經(jīng)兩次Sephadex LH-20柱層析，甲醇洗脫得到化合物1(21.2 mg);第28～30組分 ［三氯甲烷-甲醇 (20∶1)洗脫］經(jīng)兩次Sephadex LH-20柱層析，先甲醇洗脫，再經(jīng)三氯甲烷-甲醇(1∶1)進(jìn)行洗脫，得到化合物2(25.6 mg)及化合物3(68.4 mg);第45～47組分 ［三氯甲烷-甲醇 (10∶1)洗脫］經(jīng)Sephadex LH-20柱層析，三氯甲烷-甲醇 (1∶1)進(jìn)行洗脫得到化合物4(85.7 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1:白色針晶 (甲醇)。1H-NMR(CD3OD)δ:7.67(1H，d，J=8.4 Hz，H-5)，7.26(2H，d，J=9.0 Hz，H-2'，6')，6.76(2H，d，J=9.0 Hz，H-3'，5')，6.44(1H，dd，J=8.4，2.4 Hz，H-6)，6.29(1H，d，J=2.4 Hz，H-8)，5.31(1H，dd，J=13.2，3.0 Hz，H-2)，2.99(1H，dd，J=16.8，13.2 Hz，H-3β)，2.63(1H，dd，J=16.8，3.0 Hz，H-3α)。13C-NMR(CD3OD)δ:193.5(C=O)，166.8(C-7)，165.6(C-9)，159.0(C-4')， 131.3(C-1')， 129.9(C-5)，129.0(C-2'，6')，116.3(C-3'，5')，115.0(C-10)，111.7(C-6)，103.8(C-8)，81.0(C-2)，45.0(C-3)。與文獻(xiàn)［11］報(bào)道基本一致，故鑒定該化合物為甘草素 ［(2S)-liquiritigenin］。

化合物2:桔紅色針晶 (甲醇)。1H-NMR(CD3OD)δ:7.91(1H，d ，J=9.0 Hz，H-6')，7.72(1H，d，J=15.6 Hz，H-β)，7.56(2H，d，J=8.4 Hz，H-2，6)，7.54(1H，d，J=15 Hz，H-α)，6.78(2H，d，J=8.4 Hz，H-3，5)，6.35(1H，dd，J=9.0，2.4 Hz，H-5')，6.23(1H，d，J=2.4 Hz，H-3')。13C-NMR(CD3OD)δ:193.5(C=O)，167.5(C-4')，166.4(C-2')，161.6(C-4)，145.7(C-β)，133.4(C-6')，131.8(C-2，6)，127.9(C-1)，118.3(C-α)，116.9(C-3，5)，114.7(C-1')，109.1(C-5')，103.8(C-3')。與文獻(xiàn)［11］報(bào)道基本一致，故該化合物鑒定為異甘草素 (isoliquiritigenin)。

化合物3:淡黃色針晶 (甲醇)。1H NMR(CD3OD)δ:7.65(1H，d ，J=8.4 Hz，H-5)，6.87(1H，d，J=1.8 Hz，H-2')，6.75 ～ 6.71(2H，m，H-6'，5'，重疊)，6.43(1H，dd，J=8.4，1.8 Hz，H-6)，6.30(1H，d，J=1.8 Hz，H-8)，5.26(1H，dd，J=12.6，3.0 Hz，H-2);2.95(1H，dd，J=12.6，16.8 Hz，H-3β)，2.63(1H，dd，J=16.8，3.0 Hz，H-3α)。13C-NMR(CD3OD)δ:193.5(C=O)，166.8(C-7)，165.5(C-9)，146.8(C-4')， 146.5(C-3')， 132.0(C-1')，129.8(C-5)， 119.2(C-6')， 116.2(C-5')，115.0(C-10)，114.7(C-2')，111.7(C-6)，103.8(C-8)，81.1(C-2)，45.0(C-3)。與文獻(xiàn)［12］報(bào)道基本一致，鑒定為紫鉚亭 ［(2S)-butin］。

化合物4:黃色結(jié)晶。1H-NMR(CD3OD)δ:7.86(1H，d，J=7.8 Hz，H-6')，7.65(1H，d，J=15.0 Hz，H-β)，7.46(1H，J=15.0 Hz，H-α)，7.12(1H，d，J=2.4 Hz，H-2)，7.04(1H，dd，J=7.8，2.4 Hz，H-6)，6.76(1H，d，J=7.8 Hz，H-5)，6.35(1H，dd，J=7.8，2.4 Hz，H-5')，6.23(1H， d， J=2.4Hz， H-3')。13C-NMR(CD3OD) δ:193.5(C=O)，167.5(C-4')，166.3(C-2')，149.9(C-3)，146.8(C-4)，146.1(C-β)，133.3(C-6')，128.4(C-1)，123.6(C-6)，118.3(C-2)，116.6(C-α)，115.8(C-5)，114.7(C-1')，109.1(C-5')，103.8(C-3')。與文獻(xiàn)［13］報(bào)道的基本一致，鑒定為紫鉚花素 (butein)。

致謝:本論文是在上海永恒生物科技有限公司顧正斌總經(jīng)理的悉心指導(dǎo)下修改完成的，在此對顧總經(jīng)理深表感謝!

［1］劉銅華.維藥驅(qū)蟲斑鳩菊治療白癜風(fēng)的研究與應(yīng)用［J］.國外醫(yī)學(xué):中醫(yī)中藥分冊，2004，26(2):103.

［2］國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì).中華本草:維吾爾藥卷［M］.上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社，2005:206-207.

［3］石得仁，田惠玉，劉錦蓮，等.維吾爾醫(yī)西醫(yī)結(jié)合治療白癜風(fēng)的初步研究［J］.新疆中醫(yī)藥，2005，23(1):31-32.

［4］鄧瑞春，周 勇，尚 靖，等.驅(qū)蟲斑鳩菊對B16黑素瘤細(xì)胞酪氨酸酶活性及黑素生成影響［J］.氨基酸和生物資源，2002，24(1):31-33.

［5］鄧瑞春，周 勇，徐建國，等.驅(qū)蟲斑鳩菊對小鼠免疫分子的影響［J］.生物技術(shù)通訊，2002，13(3):183-186.

［6］徐媛媛，唐定書.驅(qū)蟲斑鳩菊內(nèi)治外用治療氣血失和型白癜風(fēng)40例［J］.福建中醫(yī)藥，2009，40(1):43.

［7］Fatima S S，Rajasekhar M D，Kumar K V，et al.Antidiabetic and antihyperlipidemic activity of ethyl acetate:isopropanol(1∶1)fraction of Vernonia anthelmintica seeds in streptozotocin induced diabetic rats［J］.J Food Chem Toxicol，2010，48(2):495-501.

［8］吐爾遜·吾甫爾，艾尼瓦爾·加馬力.維吾爾醫(yī)治療白癜風(fēng)610例的臨床觀察［J］.中國民族醫(yī)藥雜志，2003，(1):12.

［9］宋東燕.中藥驅(qū)蟲斑鳩菊和白靈聯(lián)合窄譜中波紫外線治療白癜風(fēng)臨床觀察［J］.皮膚性病診療學(xué)雜志，2010，17(1):41-43.

［10］迪力拜爾·熱夏提.復(fù)方卡力孜然酊聯(lián)合其它療法治療斑禿的臨床療效觀察［J］.國外醫(yī)學(xué):中醫(yī)中藥分冊，2005，26(2):3738.

［11］殷志琦，巢劍非，張雷紅，等.構(gòu)樹化學(xué)成分研究［J］.天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2006，18:421-422.

［12］李明潺，唐生安，段宏泉，等.野雉尾金粉蕨化學(xué)成分研究［J］.中草藥，2010，41(5):686-688.

［13］吳 彤，李 燕，孔德云，等.藤香樹莖藤的化學(xué)成分［J］.中國藥學(xué)雜志，2010，45(12):902-905.