謝鳳云，謝梅青

(1.珠海市婦幼保健院婦科，廣東 珠海 519000；2.廣州市中山大學(xué)附屬第二醫(yī)院婦科，廣東 廣州 510120)

促性腺激素釋放激素(Gonadotropin-releasing hormone，GnRH)由下丘腦弓狀核合成，經(jīng)過(guò)垂體門脈系統(tǒng)到達(dá)垂體前葉，與垂體前葉的促性腺激素細(xì)胞的胞膜受體(Gonadotropin-releasing hormone receptor，GnRH-R)結(jié)合，促進(jìn)促性腺激素細(xì)胞合成并分泌促性腺激素(Gonadotropin)。GnRH-R屬G蛋白耦聯(lián)的膜受體，其分子結(jié)構(gòu)由327～328個(gè)氨基酸殘基組成，有7個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域。人類GnRH-R基因位于染色體4長(zhǎng)臂l3.2～21.1區(qū)，含20～25 kb，是由3個(gè)外顯子和2個(gè)內(nèi)含子構(gòu)成的單拷貝基因[1]。GnRH與受體的結(jié)合具有高度特異性，根據(jù)GnRH對(duì)受體的親和力，GnRH分為三型：GnRH-Ⅰ、GnRH-Ⅱ及GnRH-Ⅲ，相應(yīng)地，GnRHR也分為三型?，F(xiàn)在已經(jīng)證實(shí)人類存在Gn-RHR-Ⅰ及GnRHR-Ⅱ，而GnRHR-Ⅲ尚未見報(bào)道在人類有表達(dá)[2]。繼1971年Schally和Guillemin等從豬和羊的下丘腦組織中分離純化了GnRH后，1973年Grant首先以氘標(biāo)記的GnRH對(duì)垂體細(xì)胞膜上的GnRH-R的結(jié)合特性進(jìn)行了研究，從此有關(guān)GnRH-R的研究開始迅速發(fā)展。研究發(fā)現(xiàn)，GnRH和GnRH-R除位于下丘腦垂體系統(tǒng)外，在機(jī)體的其他組織，尤其是生殖器官也有分布[3-4]。近年來(lái)有許多對(duì)人類不同類型子宮內(nèi)膜表達(dá)GnRH-R的研究報(bào)道，推測(cè)子宮內(nèi)膜GnRH和GnRH-R系統(tǒng)在調(diào)節(jié)子宮內(nèi)膜的自分泌或旁分泌中起重要作用，并參與子宮內(nèi)膜的增殖調(diào)節(jié)。

1 GnRH-R在正常子宮內(nèi)膜上的表達(dá)

Raga等[5]于1998年通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)首次報(bào)道GnRH和GnRH-R mRNA在生育年齡女性整個(gè)月經(jīng)周期的子宮內(nèi)膜上均有表達(dá)，GnRH mRNA表達(dá)的濃度在增殖期比在黃體期低，而無(wú)論在增殖期和黃體期的子宮內(nèi)膜上均可探及GnRH-R呈低水平。張一萍等[6]在蛋白水平檢測(cè)到正常子宮內(nèi)膜局部有GnRH的表達(dá)。2006年，岳瑛等[7]在研究GnRH-R mRNA在正常子宮內(nèi)膜及子宮內(nèi)膜腺癌組織中的表達(dá)時(shí)發(fā)現(xiàn)增生期及分泌期正常子宮內(nèi)膜組織的GnRH-R mRNA陽(yáng)性表達(dá)率均為17%，在子宮內(nèi)膜腺癌組織中的表達(dá)率為40%，從而推測(cè)子宮內(nèi)膜GnRH-R可能參與激素調(diào)節(jié)以外的作用，如子宮內(nèi)膜的增殖調(diào)節(jié)，而不直接參與子宮內(nèi)膜的周期性變化調(diào)節(jié)。GnRH-R在正常子宮內(nèi)膜組織中有表達(dá)，在子宮內(nèi)膜局部亦存在GnRH核酸水平及蛋白水平的表達(dá)，說(shuō)明GnRH除了主要作用于腦垂體的GnRH-R外，還直接作用于子宮內(nèi)膜，通過(guò)自分泌或旁分泌作用調(diào)節(jié)子宮內(nèi)膜功能[4]。

2 GnRH-R在子宮內(nèi)膜異位癥(Endometrosis，EMS)患者中在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜上的表達(dá)

Borroni等[8]于1999年采用RT-PCR和原位雜交等方法檢測(cè)到卵巢型子宮內(nèi)膜異位癥病灶細(xì)胞表面有GnRH-R的表達(dá)，而在無(wú)內(nèi)異癥病灶的的腹膜組織上未探及，從而首次證實(shí)GnRH-R基因在子宮異位內(nèi)膜組織上的表達(dá)，同時(shí)研究還發(fā)現(xiàn)GnRH類似物可能通過(guò)激活GnRH-R，抑制體外子宮內(nèi)膜異位癥細(xì)胞的增殖。Batzer等[9]亦認(rèn)為，GnRHa治療EMS的作用機(jī)制中，除了GnRHa對(duì)下丘腦-垂體卵巢軸的降調(diào)節(jié)作用外，GnRHa也可能對(duì)內(nèi)膜異位病灶細(xì)胞的生長(zhǎng)產(chǎn)生直接的抑制作用。

杜英等[10]及岳瑛等[11]先后采用免疫組化法檢測(cè)子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜GnRH-R的表達(dá)。兩者研究中發(fā)現(xiàn)異位內(nèi)膜組織GnRH-R的表達(dá)率分別為62.38%、66.67%，在位內(nèi)膜GnRH-R的表達(dá)率均為100%，他們還進(jìn)一步研究不同期別EMS患者卵巢異位內(nèi)膜及在位內(nèi)膜GnRH-R的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)病變輕的EMS患者GnRH-R表達(dá)率高于病變重的EMS患者；同時(shí)還發(fā)現(xiàn)經(jīng)GnRHa治療后GnRH-R陽(yáng)性者卵巢內(nèi)膜異位囊腫復(fù)發(fā)率低于GnRH-R陰性者，推測(cè)異位內(nèi)膜GnRH-R表達(dá)的缺失有可能與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)；通過(guò)測(cè)定異位內(nèi)膜GnRH-R的表達(dá)，有可能為臨床EMS患者的治療及療效預(yù)測(cè)提供一定的參考依據(jù)。

黃堅(jiān)等[12]在2006年研究了卵巢、陰道直腸、腹壁切口及子宮漿膜層幾個(gè)部位內(nèi)異組織中GnRH-R的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)不同部位內(nèi)異組織中GnRH-R的表達(dá)率不同，推測(cè)其對(duì)GnRHa的反應(yīng)及治療效果可能不同，如何更有效地運(yùn)用GnRHa治療不同部位的內(nèi)異癥有待進(jìn)一步研究。

近年來(lái)，對(duì)于GnRH-Ⅱ及其受體在EMS患者中的表達(dá)及意義亦有研究。黃鳳英等[13]發(fā)現(xiàn)EMS患者的異位子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞具有分泌血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的功能，分泌量與在位子宮內(nèi)膜相近，這對(duì)內(nèi)異癥的形成和發(fā)展可能起重要作用，GnRH-Ⅱ呈劑量依賴性地抑制異位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞分泌VEGF，其抑制作用明顯強(qiáng)于在位，且GnRH-Ⅱ明顯強(qiáng)于GnRH-Ⅰ，為尋找EMS抗血管形成方面的新藥治療提供了新的依據(jù)。

3 GnRH-R在增生過(guò)長(zhǎng)的子宮內(nèi)膜及子內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)

張一萍等[6]在2005年采用免疫組化法測(cè)得增生過(guò)長(zhǎng)的子宮內(nèi)膜組織GnRH和GnRH-R表達(dá)率均為92.3%，而子宮內(nèi)膜癌組織分別為58.8%和82.4%。岳瑛等[7]則于2006年發(fā)現(xiàn)，子宮內(nèi)膜腺癌組織GnRH-R mRNA的陽(yáng)性表達(dá)率為40%(12/30)，明顯高于正常子宮內(nèi)膜組織的17%(9/53)，推測(cè)可能是由于子宮內(nèi)膜細(xì)胞發(fā)生癌變使細(xì)胞表面GnRH-R增加，或GnRH-R可能參與子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞增殖。

張玉泉[14]在2006年研究增生過(guò)長(zhǎng)的子宮內(nèi)膜GnRH-R的表達(dá)及其與ER、PR的關(guān)系，把子宮內(nèi)膜增生分為增生期、分泌期、單純性增生、復(fù)雜性增生及不典型增生5組類型內(nèi)膜進(jìn)行研究(97例)，發(fā)現(xiàn)5組類型子宮內(nèi)膜GnRH-R表達(dá)的陽(yáng)性率為25%～46.7%，表達(dá)陽(yáng)性等級(jí)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而Dong等于1998年報(bào)道GnRH mRNA在增殖期呈低水平表達(dá)，而在分泌早期急劇增長(zhǎng)約10倍的這種改變可能引起其受體的改變。兩者研究結(jié)論不一致，考慮可能是前者研究樣本數(shù)量不夠或存在某些混雜因素的原因。

上述研究結(jié)果為臨床內(nèi)分泌治療提供了參考依據(jù)。GnRH-R在異常增生的子宮內(nèi)膜和內(nèi)膜癌中的高表達(dá)可能成為臨床診斷指標(biāo)和治療的靶點(diǎn)，可用于定向靶細(xì)胞化療治療子宮內(nèi)膜癌[15]。既往有文獻(xiàn)報(bào)道GnRH的抑瘤效應(yīng)是間接通過(guò)降低血清雌激素水平來(lái)實(shí)現(xiàn)的，現(xiàn)在認(rèn)為，GnRH主要發(fā)揮間接抑制腫瘤作用的同時(shí)還有直接抑制腫瘤的作用，利用癌細(xì)胞表面GnRH-R增加的事實(shí)，選擇殺傷癌細(xì)胞的靶點(diǎn)，這種癌細(xì)胞特異性殺傷作用可能成為今后研究的一個(gè)方向[16]。有研究發(fā)現(xiàn)GnRH誘導(dǎo)某些生殖道腫瘤細(xì)胞調(diào)亡的作用與Fas耦連密不可分，表現(xiàn)為GnRH類似物誘導(dǎo)出的Fas-GnRH-R陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)明顯被抑制，而Fas陰性細(xì)胞不受影響。故用GnRH類似物治療某些生殖道腫瘤前，測(cè)定腫瘤細(xì)胞的Fas表達(dá)陽(yáng)性率，將能更好地選擇GnRH類似物治療的對(duì)象；而對(duì)于Fas陰性的腫瘤細(xì)胞，研究能誘導(dǎo)其表達(dá)Fas的方法，將能擴(kuò)大GnRH類似物的治療范圍。

Eicke等[17]發(fā)現(xiàn)在卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌中，Ⅱ型GnRH(GnRH-Ⅱ)比GnRH-Ⅰ具有更強(qiáng)的抗增殖效應(yīng)，且GnRH-Ⅱ的作用并不是由GnRHR-Ⅰ介導(dǎo)的。Fister等[18]于2007年研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌，GnRH-Ⅱ拮抗劑是一個(gè)高效、低毒性的內(nèi)分泌治療方法。

4 結(jié)論和展望

GnRH及GnRH-R在正常子宮內(nèi)膜組織中有表達(dá)，說(shuō)明GnRH能夠通過(guò)自分泌或旁分泌作用調(diào)節(jié)子宮內(nèi)膜功能。GnRHa是目前治療內(nèi)異癥最有效的藥物[19]，“如何提高異位內(nèi)膜GnRH-R的表達(dá)率，增強(qiáng)GnRHa對(duì)EMS患者的療效”將是我們以后研究的方向。

GnRH-R在內(nèi)膜增生過(guò)長(zhǎng)和內(nèi)膜癌中的高表達(dá)可能成為臨床診斷指標(biāo)和治療的靶點(diǎn)，在內(nèi)膜癌中的高表達(dá)可被用于定向靶細(xì)胞化療。對(duì)于GnRHR-Ⅱ，有學(xué)者認(rèn)為，從理論上講人類不存在功能性的GnRHR-Ⅱ[20]。2004年，日本學(xué)者利用抑制基因表達(dá)的方法首次證明了人類可能存在功能性的GnRHR-Ⅱ，當(dāng)GnRHR-Ⅱ基因被抑制表達(dá)時(shí)，GnRH-Ⅱ及Cetrorelix不能發(fā)揮作用，而GnRH-Ⅰ的作用不受影響。但是該作者未能真正測(cè)得人類GnRHR-Ⅱ的功能性蛋白的表達(dá)[21]。2005年，澳大利亞學(xué)者則用免疫組化法測(cè)得人類子宮肉瘤上有GnRHR-Ⅱ的表達(dá)，說(shuō)明人類存在功能性的GnRHR-Ⅱ[22]。故研究GnRHR-Ⅱ及其類似物將具有更好的臨床應(yīng)用前景。

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