張灼錦 陳育賢 翁梅超
廣東省梅州市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東梅州 514031
D-二聚體存在于纖溶酶降解因子×IIIa交聯(lián)的纖維蛋白一(XDP)可溶性產(chǎn)物中。纖溶酶是一種絲氨酸蛋白酶,當(dāng)游離于抑制劑時(shí),作用于不溶性交聯(lián)纖維蛋白使產(chǎn)生一系列的可溶性降解物。它們的分子量決定于酶的消化程度。這些可溶性纖維蛋白降解產(chǎn)物中含有一種原始纖維蛋白原分子中,或者它的降解產(chǎn)物及可溶性纖維蛋白中沒(méi)有的新抗原(D-二聚體片段[1])。測(cè)定D-二聚體成了一種診斷血栓和溶栓治療監(jiān)測(cè)所廣泛應(yīng)用的指標(biāo)。在深靜脈血栓(DVT),肺栓塞(PE),彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)等臨床狀態(tài)中發(fā)現(xiàn)D-二聚體的水平升高。在正常妊娠過(guò)程中D-二聚體的水平也會(huì)升高,但是如果非常高的話(huà)會(huì)伴隨出現(xiàn)并發(fā)癥。懷疑患有血栓病的患者進(jìn)行D-二聚體測(cè)定陰性,低臨床可能性,對(duì)于深靜脈血栓(DVT)及肺栓塞(PE)有高陰性預(yù)測(cè)價(jià)值[2],現(xiàn)對(duì)該院2010年3月—2012年3月期間收治的136例病例數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,并報(bào)道如下。
肺部疾病患者136例,常見(jiàn)癥狀如呼吸困難、咳嗽、胸痛、咯血等。
美國(guó)IL公司生產(chǎn)的ACL TOP全自動(dòng)血凝儀。
①膠乳試劑:包被有鼠單克隆抗體(MA-8D3)的聚苯乙烯膠乳顆粒凍干懸浮液,與含有牛血清白蛋白、緩沖液,穩(wěn)定劑和防腐劑的D-二聚體直接對(duì)比。②反應(yīng)緩沖液:磷酸緩沖液,其中含有牛血清白蛋白,穩(wěn)定劑和防腐劑。
①免疫比濁法檢測(cè)DD的原理:D-二聚體膠乳試劑是一種大小均一的聚苯乙烯膠乳顆粒懸浮液,這些膠乳顆粒上包被著對(duì)纖維蛋白降解產(chǎn)物D-二聚體具有高度特異性的單克隆抗體,當(dāng)含有D-二聚體的血漿與D-聚體測(cè)定試劑盒中的膠乳試劑和試劑緩沖液混合時(shí),包被的膠乳顆粒會(huì)產(chǎn)生凝集。凝集程度與樣本中D-二聚體的濃度成正比,由于凝集而引起透射光減少,通過(guò)450 nm波長(zhǎng)處記錄其變化,從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上讀出結(jié)果[3]。②抽取病人新鮮全血,用109mmol/L枸櫞酸鈉抗凝,3000 r/min離心10 min,取得乏血小板血漿,將離心好的標(biāo)本放入儀器后自動(dòng)進(jìn)行檢測(cè),一般10 min內(nèi)出結(jié)果。③當(dāng)待測(cè)標(biāo)本濃度>1050 ng/mL,儀器自動(dòng)進(jìn)行稀釋后作進(jìn)一步檢測(cè),實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)自動(dòng)乘以稀釋倍數(shù)。④質(zhì)量控制:IL公司提供的低值及高值質(zhì)控品。⑤據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道,D-二聚體濃度<0.5 g/L基本可排除血栓形成[4]。因此,以D-二聚體檢測(cè)值是否超出0.5 g/L分為兩大類(lèi),并按病種進(jìn)行歸類(lèi),總結(jié)D-二聚體檢測(cè)結(jié)果在肺部疾病診斷中的應(yīng)用價(jià)值,特別觀察其在肺栓塞中的意義。
在試驗(yàn)中,總計(jì)136例患者(男78例,女56例)參加檢測(cè)?;颊咂骄挲g為58歲(范圍為24~90歲)。所有患者中,46例患者(33.8%)的D-二聚體檢測(cè)值<0.5 g/L,全部46例患者在住院期間無(wú)任何肺栓塞及深部靜脈栓塞的癥狀,其陰性預(yù)期值為100%;90例患者血漿中的D-聚體檢測(cè)值>0.5 g/Lng^nl,其中26例患者進(jìn)行過(guò)螺旋CT掃描確診,有11例患者被證實(shí)為肺栓塞,其陽(yáng)性預(yù)期值為12.2%,ACL TOP免疫比濁法的敏感性為100%。見(jiàn)表1。
表1 136例肺部疾病患者的D-二聚體結(jié)果分析(n)
從該次實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出,D-二聚體水平升高對(duì)肺栓塞并不是特異的,血漿中的D-二聚體水平由于呼吸系統(tǒng)多種疾病而升高,尤其是慢性阻塞性肺鏑(COPD)、呼吸衰竭和多種呼吸系統(tǒng)合并癥。因此,D-二聚體檢測(cè)的陰性結(jié)果在肺部疾病中的應(yīng)用價(jià)值大于其陽(yáng)性結(jié)果。
因?yàn)榉嗡ㄈ∨R床癥狀不明顯,與支氣管炎、心絞痛、胸膜炎、冠心病和肺炎等極為相似,所以容易造成誤診和漏診,如果不能及時(shí)確診,致命性栓塞可在1~2 h內(nèi)導(dǎo)致患者死亡,對(duì)該病應(yīng)給予足夠的重視,只要治療及時(shí),大多數(shù)患者可以完全康復(fù),所以快速準(zhǔn)確的診斷顯得尤其重要。最新研究表明,螺旋CT掃描結(jié)果陰性能夠有效地排除可疑病人的肺栓塞診斷,可以作為肺栓塞影像檢查新的金標(biāo)準(zhǔn)[4]。但其價(jià)格高,技術(shù)性強(qiáng),較適于對(duì)高度可疑的病人做確診檢查。如果使用ACL TOP免疫比濁法快速定量檢測(cè)D-二聚體作為篩選試驗(yàn),實(shí)驗(yàn)意義在于陰性結(jié)果可100%排除肺栓塞,陽(yáng)性結(jié)果可包括為肺栓塞在內(nèi)的多種疾病。因?yàn)锳CL TOP免疫比濁法定量檢測(cè)D-二聚體可實(shí)行全自動(dòng)操作,具有準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)便的特點(diǎn),適合門(mén)急診檢測(cè),可以把它作為排除診斷肺栓塞的首選篩選試驗(yàn),值得在臨床推廣應(yīng)用。
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