臺海川 徐 荔 王 娟 卯明霞
(云南省西雙版納州食品藥品檢驗所,云南 景洪 666100)
傣藥扁擔藤為葡萄科植物十字崖爬藤Tetrastigma cruciatum Craib et Gagnep.的干燥藤莖,西雙版納傣醫(yī)將扁擔藤稱為“嘿扁”。扁擔藤性平,味微澀,入風、火、土、水塔。有除風解毒,消腫止痛之功。用于風濕痹痛,頸項強痛,腰膝疼痛;跌打損傷,骨折;濕疹,蛇竄瘡等。目前對扁擔藤的質量評價方法未見報道。為了有效控制其藥材質量,本文對3個不同產(chǎn)地藥材的性狀、成分系統(tǒng)預試驗、顯微鑒別、薄層色譜鑒別、水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物、急性毒性等方面進行了研究,為扁擔藤藥材的質量評價提供了科學依據(jù)。
1.1 材料:樣品采自景洪市景訥鄉(xiāng)(1號樣)、勐臘縣勐侖鎮(zhèn)(2號樣)、勐臘縣勐伴鄉(xiāng)(3號樣),植物標本經(jīng)中國科學院西雙版納熱帶植物園鑒定為葡萄科植物十字崖爬藤Tetrastigma cruciatum Craib et Gagnep.。硅膠G(青島海洋化工廠),所用其它試劑均為分析純。
1.2 儀器:LEICA RM-2016生物組織切片機(上海徠卡儀器有限公司)、SA3300PL生物顯微鏡(北京泰克儀器有限公司)、計算機顯微分析系統(tǒng)(北京泰克儀器有限公司)。
2.1 性狀:本品為不規(guī)則條塊狀,厚0.3~1cm。栓皮淺褐色至綠褐色,可見綠色苔蘚附著物,栓皮脫落處顯棕紅色。質硬。切面皮部較薄,棕紅色。木質部淺棕色,由纖維束與導管群相間排列呈多個同心環(huán),導管孔明顯,有裂隙,易縱向層狀剝離。髓部小。氣微,味淡、微澀。
2.2 成分系統(tǒng)預試驗:試驗顯示含有還原糖、多糖類、黃酮類、植物甾醇、酚類、鞣質、香豆素、強心苷、有機酸類等成分。
2.3 顯微鑒別:橫切面:寬.5cm,0.7cm。呈兩端膨大,中部狹窄的啞鈴狀,兩端切面最外為落皮層。落皮層向內(nèi)有3~4個排列整齊的木栓層帶,兩個層帶中間為頹廢的皮層組織,有纖維束及少量石細胞環(huán)繞分隔。維管束被髓射線分隔為數(shù)束,向兩端沿明顯輻射。韌皮部細胞由纖維環(huán)繞分隔成10~13個格子狀,束中形成層可見,木質部導管在外側直徑較大,向內(nèi)漸小。中部切面木栓層數(shù)列,外被落皮層,皮層細胞4~5列,維管束亦被射線分隔成束;韌皮部一面較寬,一面窄,髓部類圓形,偏向窄面。韌皮部、射線及髓部均有黏液細胞散在,內(nèi)含針晶束。薄壁細胞中含淀粉粒及草酸鈣簇晶(見圖1)。
粉末:粉末紅棕色。木栓細胞黃棕色,多角形,壁略增厚。黏液細胞內(nèi)含草酸鈣針晶束,針晶長50~150μm。草酸鈣簇晶眾多,棱角短鈍,直徑10~70μm。導管為具緣紋孔,直徑60~120μm。纖維長梭形,壁連珠狀增厚,可見壁孔,直徑15~35μm。淀粉粒多單粒,長卵形、廣卵形、類三角形、不規(guī)則形,臍點點狀、人字狀,直徑5~15μm;復粒由2~3分粒組成。可見黃棕色色素塊。(見圖2)。
2.4 薄層色譜鑒別:取本品粉末1g,加乙醇10ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液。另取扁擔藤對照藥材1g,同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》一部附錄)試驗,吸取上述2種溶液各3μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(1∶8∶1)為展開劑,預平衡15分鐘,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸溶液。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點(見圖3)。
2.5 水分:取1、2、3號樣粉末約2g,精密稱定,照水分測定法(《中國藥典》2010年版一部附錄第一法)測定,結果分別為.08%、8.90%、9.30%,平均值為.09%。
2.6 總灰分:取、2、3 號樣粉末約g,精密稱定,照(《中國藥典》2010年版一部附錄),結果分別為7.67%、6.77%、7.74%,平均值為.39%。
2.7 酸不溶性灰分:取總灰分結果按(《中國藥典》2010年版一部附錄),結果分別為.53%、0.44%、0.54%,平均值為.50%。
2.8 重金屬:取1、2、3號樣粉末約2g,精密稱定,照(《中國藥典》2010年版一部附錄),結果均未超過百萬分之一。
2.9 浸出物:取1、2、3號樣粉末約4g,精密稱定,照醇溶性浸出物測定法項下的熱浸法(《中國藥典》一部附錄)測定,用稀乙醇作溶劑,結果分別為.48%、17.32%、16.68%,平均值為16.83%。
2.10 急性毒性試驗:對扁擔藤藥材的水煎濃縮液(6.03g生藥/ml)進行了小鼠急性毒性試驗,未測出LD50值,故測定其最大耐受量。取18~22gSPF級ICR小鼠40只,分為2組,每組20只,雌雄各半,以4.22g生藥/ml,按40ml/kg給藥,24小時內(nèi)灌胃給藥1次,觀察14天。結果表明小鼠的最大耐受量為168.8g生藥/kg,相當于臨床成人(體重按60kg計)擬用量的338倍。與對照組(生理鹽水)比較,給藥組小鼠體重、飲食、外觀、行為、分泌物、排泄物等均未見明顯異常,亦無死亡。實驗結束后處死小鼠,肉眼觀察各主要臟器未見異常。
3.1 水分、總灰分、酸不溶性灰分和浸出物是評價藥材質量的重要參數(shù),因此制定相應的限度是十分必要的。根據(jù)試驗結果,規(guī)定其水分不得過13.0%,總灰分不得過10.0%,酸不溶性灰分不得過1.0%,浸出物不得少于11.0%。重金屬結果均未超過百萬分之十,暫不在質量標準中設置此項目。
3.2 試驗分別以水、乙醇、稀乙醇為溶劑,采用冷浸法及熱浸法測定本品浸出物的含量。結果表明,稀乙醇浸出量高于乙醇和水的浸出量,熱浸法浸出量高于冷浸法浸出量。因此,確定以稀乙醇為溶劑,熱浸法測定本品浸出物的含量。
3.3 在急性毒性試驗中測出最大耐受量為168.8g生藥/kg,顯示扁擔藤藥材在處方用藥范圍內(nèi)仍是安全的。
3.4 上述研究項目內(nèi)容全面,方法簡便快速,能有效控制傣藥材扁擔藤的質量。