孫占田 劉曉紅 劉志敏

(1.河北工程大學(xué)農(nóng)學(xué)院，河北邯鄲 056021；2.北京新水利康科技發(fā)展有限公司，北京 100101)

隨著消費者對食品安全的日益關(guān)注，飼料中超量添加或違規(guī)添加抗生素受到越來越嚴(yán)格的限制，因此飼料企業(yè)正在加緊進行抗生素替代品的研究工作，其中益生素尤其是由新菌種組成的益生素成為首選。納豆芽孢桿菌能在腸道上段迅速發(fā)育轉(zhuǎn)變成具有新陳代謝作用的營養(yǎng)型細胞，以自身的耗氧來抑制腸道中有害需氧菌的生長，從而促使以厭氧菌為優(yōu)勢菌群的腸道正常菌群的生長，提高機體免疫力 (陳兵等，2003)。酪酸菌是一種厭氧的革蘭氏陽性芽孢桿菌，能促進有益的雙歧桿菌和乳酸菌的增殖和有效地抑制有害菌的繁殖（謝樹貴等，2007）；此外，酪酸菌在腸道內(nèi)還能產(chǎn)生丁酸、淀粉酶、蛋白酶、糖苷酶和纖維素酶等，促進營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。本試驗通過研究斷奶仔豬日糧中添加含納豆芽孢桿菌、酪酸菌和乳酸菌的復(fù)合益生素替代抗生素對仔豬腹瀉、生產(chǎn)性能、日糧養(yǎng)分表觀消化率和腸道菌群數(shù)的影響，旨在為復(fù)合益生素替代抗生素的應(yīng)用提供試驗依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

試驗所用的復(fù)合益生素主要由納豆芽孢桿菌、酪酸菌和嗜酸乳桿菌組成，通過后加工處理為能耐高溫制粒，產(chǎn)品由北京新水利康科技發(fā)展有限公司提供。

1.2 試驗動物和試驗設(shè)計

選用(21±1)d斷奶、體重相近(約為6.9 kg)的杜長大三元雜交仔豬144頭，按性別和體重隨機分為4個處理,每個處理設(shè)6個重復(fù)，每個重復(fù)6頭豬(公、母各半),各組初始體重差異不顯著(P＞0.05)。分別飼喂基礎(chǔ)日糧(對照組)、基礎(chǔ)日糧+150 mg/kg抗敵素+100 mg/kg桿菌肽鋅(抗生素組)、基礎(chǔ)日糧+800 mg/kg復(fù)合益生素+60 mg/kg抗敵素+50 mg/kg桿菌肽鋅（抗生素+益生素組）和基礎(chǔ)日糧+1 500 mg/kg復(fù)合益生素（益生素組）。試驗期為21 d?；A(chǔ)日糧參照中國豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T65—2004）進行配制，其配方和營養(yǎng)水平見表1。

1.3 飼養(yǎng)管理

仔豬21日齡斷奶后，選擇豬只立即轉(zhuǎn)入保育舍，塑料床平養(yǎng)，保育欄的大小為2.2 m×1.8 m，試驗采用顆粒料，仔豬自由采食和飲水。其它日常管理按常規(guī)進行。

1.4 指標(biāo)測定

1.4.1 生產(chǎn)性能和腹瀉情況

試驗于開始前和結(jié)束時的次日早上8：00，以重復(fù)欄為單位空腹稱重，計算平均日增重。以重復(fù)欄為單位每天記錄投料量，試驗結(jié)束時記錄剩余料量，計算平均日耗料量和飼料轉(zhuǎn)化率。每天隨時觀察并記錄豬的健康及腹瀉等情況，計算仔豬的腹瀉率。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

1.4.2 養(yǎng)分的表觀消化率

飼養(yǎng)試驗結(jié)束后，從每個重復(fù)欄中選擇中等體重公仔豬，分別放入消化籠中，采用全收糞法連續(xù)進行7 d的消化試驗。每100 g鮮糞加入10%H2SO410 ml，充分混勻，于65～70℃鼓風(fēng)烘干至恒重，回潮粉碎后制成風(fēng)干樣品。分別測定飼料和糞樣干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維、鈣、磷的含量，計算各自的表觀消化率。

1.4.3 腸道的菌群數(shù)量

用滅菌棉棒直接插入仔豬直腸內(nèi)刮去直腸內(nèi)容物，將腸道內(nèi)容物放入滅菌塑料袋中低溫冷藏，迅速運回微生物實驗室進行大腸桿菌和乳酸桿菌菌落計數(shù)(lgCFU/g)。

1.5 數(shù)據(jù)處理

利用SAS統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析，差異顯著時用鄧肯氏法進行多重比較。試驗數(shù)據(jù)采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 試驗結(jié)果

2.1 仔豬的生產(chǎn)性能和腹瀉情況（見表2）

表2 復(fù)合益生素對斷奶仔豬生產(chǎn)性能和腹瀉率的影響

從表2可知，對照組的平均日增重和平均日采食量顯著低于3個試驗組(P＜0.05)。與抗生素組相比,抗生素+益生素組和益生素組的平均日增重有增加的趨勢,但差異不顯著(P＞0.05)。試驗組之間的平均日采食量差異不顯著（P＞0.05）。對照組的料重比顯著高于抗生素+益生素組和益生素組（P＜0.05），略高于抗生素組（P＞0.05）。

對照組的腹瀉率極顯著高于3個試驗組(P＜0.01),而3個試驗組之間差異不顯著（P＞0.05），從整個試驗期來看，對照組的腹瀉持續(xù)時間最長，不得不對腹瀉嚴(yán)重的個體進行了口服或注射抗生素治療，而試驗組的仔豬腹瀉時間較短，一周后基本上就沒有腹瀉了。

2.2 飼料養(yǎng)分的表觀消化率（見表3）

表3 復(fù)合益生素對斷奶仔豬日糧常規(guī)養(yǎng)分表觀消化率的影響（%）

從表3可知，各試驗組的干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪表觀消化率顯著高于對照組（P＜0.05），試驗組之間差異不顯著（P＞0.05）；各處理組的粗纖維、鈣和磷表觀消化率均無顯著差異（P＞0.05）。表明高劑量的益生素或低劑量抗生素及益生素聯(lián)合使用可以提高日糧干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)和粗脂肪表觀消化率。

2.3 仔豬的直腸菌群數(shù)量（見表4）

從表4可知，益生素+抗生素組和益生素組的仔豬直腸大腸桿菌數(shù)量明顯低于抗生素組和對照組(P＜0.05)，抗生素組顯著低于對照組(P＜0.05)。益生素組的仔豬直腸乳酸桿菌數(shù)量比對照組和抗生素組分別高40.66%和22.44%(P＜0.05)，表明復(fù)合益生素抑制大腸桿菌數(shù)量，促進乳酸桿菌生長的效果較為明顯，要優(yōu)于抗生素組。

表4 復(fù)合益生素對斷奶仔豬直腸菌群的影響（lgCFU/g鮮樣）

3 討論

3.1 復(fù)合益生菌對斷奶仔豬的生長性能及腹瀉率的影響

由于試驗所選的菌種、添加的劑量、飼養(yǎng)環(huán)境條件以及斷奶仔豬自身生理狀態(tài)的不同，斷奶仔豬日糧中添加益生素的飼喂效果報道不一。羅衛(wèi)斌等（2010）報道，日糧中添加0.4%納豆菌可明顯減少仔豬的腹瀉率，生產(chǎn)性能有明顯的提高。劉婷婷等（2011）則報道，日糧中添加500 mg/kg酪酸菌可使斷奶仔豬的日增重和飼料轉(zhuǎn)化率略有增加，但差異不顯著。本試驗結(jié)果表明，添加高劑量的由納豆芽孢桿菌、酪酸菌和乳酸菌組成的復(fù)合益生素可明顯減少腹瀉，生產(chǎn)性能也有明顯的提高。另外，添加高劑量的復(fù)合益生素或低劑量的抗生素和益生素聯(lián)合使用對斷奶仔豬生產(chǎn)性能和腹瀉的改善作用與大劑量的抗生素基本相當(dāng)，因此從安全生產(chǎn)的角度來看，此類復(fù)合益生素在生產(chǎn)上具有相當(dāng)?shù)膽?yīng)用價值。

3.2 益生素對養(yǎng)分表觀消化率的影響

耿春銀等（2010）報道，日糧中添加納豆菌可提高養(yǎng)分消化率，但差異不顯著。黃俊文等（2004）比較了日糧中添加抗生素、益生素和抗生素與益生素混合添加的飼喂效果，結(jié)果顯示，3種添加方式對養(yǎng)分消化率沒有顯著差異，但都高于對照組。本試驗也得出了類似的結(jié)果，這表明納豆菌和酪酸菌等有益菌通過調(diào)整和維持腸道的微生態(tài)平衡和自身分泌的消化酶等有益代謝物，提高斷奶仔豬的健康水平，改善了仔豬的消化代謝。

3.3 益生素對仔豬直腸微生物的影響

大腸桿菌和乳酸菌是仔豬腸道的正常菌群，仔豬斷奶后腸道菌群發(fā)生變化，大腸桿菌等致病菌濃度上升，乳酸桿菌等有益菌數(shù)量下降。吳德華等（2009）報道，納豆菌可使斷奶幼犬糞便的大腸桿菌數(shù)量顯著降低，而乳酸桿菌數(shù)量顯著增加。本試驗的結(jié)果也得出了類似的結(jié)論。謝樹貴等（2007）體外培養(yǎng)結(jié)果顯示，酪酸菌對豬大腸桿菌、豬腸炎沙門氏菌和金黃色葡萄球菌有顯著的抑制作用。唐寶英等（2005）報道，酪酸菌可顯著增加培養(yǎng)基中的雙歧桿菌、嗜酸乳酸桿菌數(shù)量。這表明含納豆菌和酪酸菌的復(fù)合益生素可促進腸道有益菌增殖，同時抑制有害菌的增殖。而且本試驗結(jié)果還表明，單獨添加復(fù)合益生素或益生素和低劑量抗生素混合添加的抑制大腸桿菌數(shù)量，促進乳酸桿菌生長的效果要優(yōu)于大劑量抗生素組。

4 小結(jié)

在本試驗條件下，復(fù)合益生素組、益生素+抗生素組能顯著提高斷奶仔豬平均日增重、飼料轉(zhuǎn)化率，降低腹瀉率。在促進飼料消化、促生長方面，益生素組和低劑量抗生素+益生素組和大劑量抗生素組無顯著差異。在抑制大腸桿菌和促進乳酸菌生長方面，復(fù)合益生素組要優(yōu)于大劑量抗生素組。因此，由納豆菌、酪酸菌和乳酸菌組成的復(fù)合益生素或復(fù)合益生素+小劑量抗生素混合添加可替代大劑量抗生素用于斷奶仔豬飼料中。

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