王紅珊，曹毅敏，楊 晉，吳 琳，李國(guó)豪，臧林泉

(1.廣州市第一人民醫(yī)院，廣東 廣州 510180;2.廣東藥學(xué)院，廣東 廣州 510006)

心肌缺血再灌注是指在短時(shí)間的心肌血液供應(yīng)中斷，然后在一定時(shí)間內(nèi)恢復(fù)供血，原來(lái)的缺血心肌細(xì)胞較供血恢復(fù)前會(huì)發(fā)生更為嚴(yán)重的損傷［1］。葡萄籽原花青素(procyanidins)是葡萄籽提取物中的一種有效成分，具有一定的抗炎癥、抗衰老的作用。本文研究了葡萄籽原花青素對(duì)于大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。

1 材料

葡萄籽原花青素(純度:98.48%)，中國(guó)藥科大學(xué)天然產(chǎn)物教研室提供。

SD大鼠，雌雄各半，體重220～270 g，購(gòu)自廣州中醫(yī)藥大學(xué)(大學(xué)城校區(qū))實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，動(dòng)物合格證號(hào):SCXK(粵)2008-0020。

2 方法

2.1 分組及給藥

SD大鼠50只，隨機(jī)分為5組:假手術(shù)組、模型組、葡萄籽原花青素低、中、高劑量組，每組10只。

按照文獻(xiàn)方法［2-3］進(jìn)行大鼠心肌缺血再灌注手術(shù)處理。假手術(shù)組在進(jìn)行處理后，穿線但不結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支，120 min后結(jié)束實(shí)驗(yàn);模型組及葡萄籽原花青素低、中、高個(gè)劑量組結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支30 min，再灌注90 min后結(jié)束實(shí)驗(yàn)，其中，假手術(shù)組和模型組分別在穿線或者結(jié)扎前30 min腹腔注射生理鹽水，葡萄籽原花青素低、中、高劑量組于結(jié)扎前腹腔注射給葡萄籽原花青素50，100和200mg/kg。

2.2 檢測(cè)指標(biāo)

5組大鼠在60 min后腹主動(dòng)脈取血，按試劑盒說(shuō)明書測(cè)定血清肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量。

腹主動(dòng)脈取血后，立刻取出心臟，置于生理鹽水中，分離靜脈、動(dòng)脈和左右心室。將左心室稱重，采用氯化硝基四氮唑藍(lán)染色法，分離正常心肌和梗死心肌，分別稱重，計(jì)算心肌梗死面積(即梗死心肌重量占左心室重量的比例)。

2.3 統(tǒng)計(jì)分析

3 結(jié)果

結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可以看出，不同劑量葡萄籽原花青素均可以降低大鼠CK、LDH、AST和MDA的水平，升高大鼠體內(nèi)SOD的水平，與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，葡萄籽原花青素的作用具量效關(guān)系。心肌梗死面積隨著葡萄籽原花青素劑量的增加而減少，三個(gè)劑量組與模型組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表1 五組大鼠生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較(n=10，±s)Tab.1 The comparison of biochemical indicator in five groups(n=10，±s)

表1 五組大鼠生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較(n=10，±s)Tab.1 The comparison of biochemical indicator in five groups(n=10，±s)

與模型組比較:1P＜0.05Compared with model group:1 P＜0.05

組 別 劑量/(mg/kg)CK/(μ/L)LDH/(μ/L)AST/(μ/L)MDA/(μmol/L)SOD/(μ/mL)心肌梗死面積/%假手術(shù)組 － 230±89 424±32 188±18 4.8±1.2 524±26 0模型組 － 5 8432±1 523 2 589±451 607±56 19.5±3.6 419±15 64.5±11.3原花青素組 50 7 863±6561 1 126±1571 516±391 14.9±2.81 436±231 49.4±12.81 100 5 121±4821 785±1121 384±271 9.7±2.51 457±241 38.6±9.71 200 2 498±2691 441±591 223±221 7.1±2.61 498±191 14.3±8.71

4 討論

原花青素是自然界中廣泛存在的聚多酚混合物，主要由兒茶酚的單體、二聚體、三聚體等組合而成，目前已經(jīng)從葡萄籽中分離提取了十幾種原花青素，據(jù)報(bào)道［4］，葡萄籽原花青素可以用于外周靜脈功能不全、淋巴水腫以及微循環(huán)障礙，廣泛的用于藥物與化妝品領(lǐng)域。

本研究中，我們重點(diǎn)研究了葡萄籽原花青素對(duì)缺血再灌注過(guò)程中心肌細(xì)胞損傷的保護(hù)作用，結(jié)果表明，不同劑量的葡萄籽原花青素均可以顯著的降低血清CK、LDH、AST和MDA的水平，與張國(guó)霞等的研究結(jié)果一致［5］。同時(shí)，葡萄籽原花青素還可以升高SOD的水平，與鐘書輝等［6］的研究結(jié)果相符合。由于CK、LDH、AST和MDA水平與心肌細(xì)胞損傷成正相關(guān)，這四個(gè)指標(biāo)水平的下降表明心肌細(xì)胞受損程度下降，而SOD正好相反，其水平與心肌細(xì)胞損傷程度成負(fù)相關(guān)，SOD水平的提高說(shuō)明心肌細(xì)胞是損傷減輕。因此，葡萄籽原花青素對(duì)心肌細(xì)胞有一定的保護(hù)作用。同時(shí)，通過(guò)心肌梗死面積比較，我們同樣可以看出葡萄籽原花青素對(duì)于心肌缺血再灌注的保護(hù)作用，說(shuō)明葡萄籽原花青素在抗衰老、抗自由基生成方面具有一定的效果，有望用于心臟疾病的治療。

［1］黃志華，李良東，肖 海.3'-大豆苷元磺酸鈉對(duì)心肌缺血/再灌注損傷及抗氧化作用的影［J］.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2009，25(4):481-483.

［2］徐曉軍，陸 波，盛海峰.醋柳黃酮對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用［J］.藥學(xué)服務(wù)與研究，2005，5(2):119-121.

［3］鄧漢武.大鼠心肌缺血再灌注損傷實(shí)驗(yàn)法［J］.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，1989，5(2):317-319.

［4］董六一，陳志武.心肌缺血/再灌注損傷與炎癥反應(yīng)［J］.中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2008，13(5):582-588.

［5］張國(guó)霞，武 艷，韓冬梅.原花青素對(duì)大鼠心肌缺血-再灌注損傷的保護(hù)作用［J］.中國(guó)生化藥物雜志，2010，31(3):170-172.

［6］鐘書輝，張艷，李樂(lè)雯.原花青素對(duì)心肌缺血再灌注大鼠血清T-AOC、CRP及NO 的影響［J］.中國(guó)生化藥物雜志，2011，32(3):228-229.