劉杰彥 雷雙燕 涂小玲 唐芳

HPLC法測定復(fù)方氨酚烷胺膠囊中氯苯那敏的含量

劉杰彥 雷雙燕 涂小玲 唐芳

目的 建立復(fù)方氨酚烷胺顆粒中馬來酸氯苯那敏的含量的測定方法。方法 色譜柱：ZORBAX EclipseXDB-C18(4.6 mm×150 mm，5 μm)，流動相：乙腈-0.2%十二烷基磺酸鈉溶液 (60∶40)(0.1%磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0)，檢測波長215 nm。結(jié)果 馬來酸氯苯那敏在30.8～154 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程為A=2155.2C+512.87，相關(guān)系數(shù)r=0.9992。平均回收率為99.4%，RSD為0.29%。結(jié)論 本方法簡便、靈敏、準確。

復(fù)方氨酚烷胺膠囊;馬來酸氯苯那敏;高效液相色譜

復(fù)方氨酚烷胺膠囊主要用于緩解普通感冒或流行感冒引起的發(fā)熱、頭痛、咽痛、鼻塞、打噴嚏等癥狀，效果較好，臨床上得到了廣泛的應(yīng)用，但其部頒標(biāo)準中僅對乙酞氨基酚和鹽酸金剛烷胺的含量進行了控制［1］。馬來酸氯苯那敏具有較強的抗組織胺作用，可引起嗜睡及輕度抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)，嚴重者則表現(xiàn)為室性心動過速，甚至心室纖顫［2］。為了更好地保證藥品質(zhì)量，有必要對該品種中的馬來酸氯苯那敏進行含量測定。我們參照相關(guān)文獻，制定了本品馬來酸氯苯那敏的測定方法，取得滿意效果。

1 儀器與試劑

WATERS 515高效液相色譜儀，配2996 PAD檢測器，717plus自動進樣器，Empower工作站;馬來酸氯苯那敏對照品(中國藥品生物制品檢定所購買)，復(fù)方氨酚烷胺膠囊為市售品，乙腈為色譜純，水為重蒸水，其它試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：ZORBAX EclipseXDB-C18(4.6 mm×150 mm，5 μm)，流動相：乙腈-0.2%十二烷基磺酸鈉溶液(60∶40)(0.1%磷酸調(diào)節(jié) pH值至3.0);流速為1.0 ml/min;進樣量：20 μl。檢測波長215 nm，柱溫為30℃。理論板數(shù)以各組分峰計均不低于3000，各色譜峰的分離度均符合要求。(色譜圖1B中馬來酸峰在前，氯苯那敏峰在后)。

2.2 對照品溶液制備

精密稱取105℃干燥至恒重的馬來酸氯苯那敏對照品適量，加流動相溶解并稀釋制成每1 ml中含馬來酸氯苯那敏80 μg的溶液，作為對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備

取膠囊20粒，求得平均粒重，將內(nèi)容物研細，精密稱取適量(相當(dāng)于含馬來酸氯苯那敏4 mg)置50 ml量瓶中，加流動相適量，振搖使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，作為供試品溶液。

2.4 陰性對照液的制備

按處方比例及制備工藝制備的不含馬來酸氯苯那敏的陰性對照樣品，按供試品溶液制備方法制備，為陰性對照溶液。

2.5 系統(tǒng)適用性試驗

分別精密量取陰性對照液、對照品溶液、供試品溶液各3 ml，置三個50 ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，取20 μl注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定，結(jié)果見圖1?？瞻讓φ杖芤荷V圖中無與氯苯那敏色譜峰保留時間相同的色譜峰，說明處方中其它成分對氯苯那敏的測定無干擾。

圖1 馬來酸氯苯那敏的HPLC圖譜

2.6 線性關(guān)系考察

精密稱取105℃干燥至恒重的馬來酸氯苯那敏對照品約16 mg置50 ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取 1.0，2.0，3.0，4.0和 5.0 ml置于10 ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，精密吸取上述對照品溶液各20 μl注入高效液相色譜儀，測定，以色譜峰面積為縱坐標(biāo)、濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準曲線，得線性回歸方程為A=2155.2C+512.87，相關(guān)系數(shù)r=0.9992。結(jié)果：馬來酸氯苯那敏在30.8～154 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.7 精密度試驗

精密吸取同一份馬來酸氯苯那敏對照品溶液重復(fù)進樣6次，測定氯苯那敏的峰面積，計算峰面積值的RSD=0.92%，結(jié)果表明儀器的進樣精密度良好。

2.8 穩(wěn)定性試驗

取同一批供試品溶液適量置室溫下，每間隔2 h測定1次，連續(xù)測定6次。結(jié)果馬來酸氯苯那敏色譜峰面積的RSD分別為0.56%(n=6)。表明該藥物溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.9 重復(fù)性試驗

取同一批號的樣品6份，按供試品溶液制備方法制成6份溶液，并按以上色譜條件測定，測得氯苯那敏平均含量為標(biāo)示量的99.0%，RSD為0.8%。

2.10 加樣回收率試驗

精密稱取己知含量的樣品適量(批號：20110301，含馬來酸氯苯那敏為標(biāo)示量的99.0%)，置25 ml量瓶中，另精密稱取105℃干燥至恒重的馬來酸氯苯那敏對照品25.2 mg置25 ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取0.8、1.0、1.2 ml置上述供試品量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過。照樣品測定項下方法測定，結(jié)果見表1。

表1 加樣回收率結(jié)果(n=9)

由表1可知，平均回收率為99.4%，RSD為0.29%，表明準確度良好。

2.11 三批供試品馬來酸氯苯那敏含量測定

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液，按上述色譜條件測定，以外標(biāo)法計算，結(jié)果見表2。

表2 氯苯那敏含量測定

3 討論

3.1 供試品溶液和對照品溶液中馬來酸氯苯那敏呈解離狀態(tài)存在，故在色譜圖中出現(xiàn)有馬來酸峰(如圖1B)。因此在馬來酸氯苯那敏的含量測定時是以氯苯那敏峰面積［3］來計算的。

3.2 曾試用馬來酸氯苯那敏的最大吸收波長作為檢測波長，但靈敏度很低。還曾試用200、205 nm等波長作為檢測波長，馬來酸氯苯那敏的吸收度增大，但基線噪聲明顯增大。在215 nm波長處，基線噪聲不是很大，故選215 nm作為波長。

3.3 通過對本文流動相體系和文獻［4］磷酸二氫鉀溶液-甲醇體系流動相的比較，發(fā)現(xiàn)乙腈-0.2%十二烷基磺酸鈉溶液(60∶40)(0.1%磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0)體系所得色譜圖，馬來酸氯苯那敏的峰形優(yōu)，分離效果好，保留時間適中。

［1］地標(biāo)升國標(biāo)第三冊：195

［2］何鴿飛，張順芝，何仲春.復(fù)方氨酚烷胺致精神癥狀1例.藥物流行病學(xué)雜志，2007，16(2)：120.

［3］南楠，朱霽虹，等.HPLC法測定萬輝化痰止咳露中磷酸可待因、鹽酸麻黃堿和馬來酸氯苯那敏的含量.藥物分析雜志，2000，(1)：7.

［4］羅萍，曾昭寧，羅灼雨.HPLC法測定復(fù)方氨酚烷胺膠囊中馬來酸氯苯那敏的含量.中國藥業(yè)，2006，7(1)：37-38.

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