劉海洋王冰冰

HPLC法測(cè)定風(fēng)濕馬錢片中士的寧的含量

劉海洋1王冰冰2

（1吉林省白山市食品藥品檢驗(yàn)所，白山134300；2吉林省通化市食品藥品檢驗(yàn)所，通化134001）

建立風(fēng)濕馬錢片中士的寧含量HPLC測(cè)定法，用C18色譜柱，流動(dòng)相：乙腈-0.01mol／L庚烷磺酸鈉與0.02mol／L磷酸二氫鉀等量混合溶液（10%磷酸調(diào)pH值2.8）（23∶77），檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm。士的寧在0.0247～0.2223μg范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好（r=0.9999），平均回收率為101.16%，RSD=1.56%。

風(fēng)濕馬錢片；士的寧；HPLC

風(fēng)濕馬錢片由馬錢子粉、僵蠶、乳香、沒藥、全蝎等九味藥組成，本文采用HPLC法測(cè)定士的寧含量，考察了方法的精密性、重現(xiàn)性、準(zhǔn)確性，結(jié)果表明該法準(zhǔn)確、可靠、重現(xiàn)性好，可用于風(fēng)濕馬錢片的質(zhì)量控制。

1 儀器與試劑

LC-2010AHT型液相色譜儀，紫外檢測(cè)器，CLASSVP工作站。UV-260型紫外分光光度計(jì)，電子天平AB265-S、BS110S。士的寧對(duì)照品（批號(hào)：110715-200212，中國(guó)藥品生物制品檢定）。乙腈為色譜純，水為純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1色譜條件色譜柱：依利特C18（200mm× 4.6mm5μm），流動(dòng)相：乙腈-0.01mol／L庚烷磺酸鈉與0.02mol／L磷酸二氫鉀等量混合溶液（10%磷酸調(diào)PH值2.8）（23∶77），流速1.0ml／min，檢測(cè)波長(zhǎng)254nm，進(jìn)樣量5μl，理論塔板數(shù)按士的寧峰計(jì)算不低于6000。

2.2對(duì)照品溶液的制備精密稱取士的寧對(duì)照品15mg，置50ml量瓶中，加三氯甲烷至刻度，再精密吸取1ml，置10ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，即得。

2.3供試品溶液及陰性對(duì)照溶液的制備取本品20片（除去包衣），研細(xì)，精密稱取約1g，置具塞錐形瓶中，加氨水2ml，精密加入三氯甲烷25ml，密塞，稱定重量，靜置24小時(shí)，再稱定重量，用三氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，分取三氯甲烷提取液，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液3ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.4線性范圍的考察吸取士的寧對(duì)照品溶液1、3、5、7、10μl，分別注入液相色譜儀，以進(jìn)樣量和峰面積積分值進(jìn)行回歸，得到回歸方程Y=3568717X-13296（r= 0.9999）。結(jié)果表明線性關(guān)系良好，線性范圍為0.0247～0.2223μg。

2.5穩(wěn)定性試驗(yàn)取樣品溶液，室溫放置，每隔一定時(shí)間注入液相色譜儀中，以峰面積為指標(biāo)。結(jié)果，RSD= 0.62%，表明供試品溶液12小時(shí)內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.6精密度試驗(yàn)取對(duì)照品溶液，連續(xù)5次進(jìn)樣各5μl，依法操作，結(jié)果，RSD=0.88%，表明儀器精密度良好。

2.7重復(fù)性試驗(yàn)取同一批樣品，依法獨(dú)立測(cè)定5次，測(cè)得其平均含量為0.90mg／片，結(jié)果RSD=0.93%，表明重現(xiàn)性良好。

2.8回收率試驗(yàn)精密稱取已知含量供試品5份，分別精密加入對(duì)照品溶液（0.018mg／ml）25ml，按供試品溶液方法制備，依法測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。

2.9樣品含量測(cè)定依2.3方法取5批樣品進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見表2。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果

3 討論

分別采用了①三氯甲烷50ml與濃氨試液2ml，密塞，稱定重量，放置24小時(shí)；（含量為0.90mg／片）。②精密加入氫氧化鈉試液3ml，放置30分鐘，再精密加入三氯甲烷20ml，稱定重量，加熱回流2小時(shí)（含量為0.84mg／片）。結(jié)果方法①提取的充分，除雜效果好，故選此方法。

表2 樣品中士的寧含量測(cè)定結(jié)果

10.3969／j.issn.1672-2779.2013.07.101

1672-2779（2013）-07-0153-02

張文娟

2013-03-24）