董軍奎??

【摘要】 目的 分析高血壓狀態(tài)下阿托伐他汀對(duì)大鼠血管內(nèi)壁細(xì)胞的影響，探討阿托伐他汀對(duì)改善大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的作用。方法 將我院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室30只SD大鼠作為研究對(duì)象，采用經(jīng)典的兩腎一夾法構(gòu)建SD大鼠腎性高血壓模型，隨機(jī)分為高血壓組10只、他汀組10只和不套銀夾的對(duì)照組10只，他汀組于術(shù)后4周給予阿托伐他汀20mg/（kg·d）灌胃8周，其余2組則給予均等的蒸餾水灌胃8周。結(jié)果 他汀組第4周與第12周的收縮壓差異不明顯，但他汀組第4、12周收縮壓均明顯高于對(duì)照組（P<0.01）。結(jié)論 阿托伐他汀可一定程度上提高循環(huán)內(nèi)皮組細(xì)胞數(shù)量，進(jìn)而提高其功能，增強(qiáng)循環(huán)內(nèi)皮組細(xì)胞對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的修復(fù)能力，起到對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用。

【關(guān)鍵詞】 阿托伐他?。谎軆?nèi)皮細(xì)胞；微循環(huán)內(nèi)皮組細(xì)胞；保護(hù)

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2013.08.491 文章編號(hào)：1004-7484（2013）-08-4514-02

近年來大量研究發(fā)現(xiàn)，冠心病、高血壓、腦血栓等心血管疾病患者循環(huán)內(nèi)皮組細(xì)胞普遍伴有數(shù)量銳減和衰老加速等現(xiàn)象，這使得血管內(nèi)皮細(xì)胞受損，進(jìn)而導(dǎo)致其修復(fù)能力減退。而阿托伐他汀作為羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶抑制劑藥物，能顯著增加循環(huán)內(nèi)皮組細(xì)胞數(shù)量，抑制循環(huán)內(nèi)皮組細(xì)胞老化，從而達(dá)到改善循環(huán)內(nèi)皮組細(xì)胞功能目的[1]。本文筆者以大鼠高血壓模型為研究對(duì)象，探討了阿托伐他汀對(duì)循環(huán)內(nèi)皮組細(xì)胞數(shù)量、功能的影響。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室30只SPF級(jí)SD大鼠，均為雄性，體重198-250g，平均（224+8.4）g。以上實(shí)驗(yàn)于2011年6月——2012年5月完成。

1.2 主要試劑與儀器 見表1。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 分組及模型搭建[2] 30只試驗(yàn)用SD大鼠隨機(jī)取10只作為對(duì)照組，其余20只搭建兩腎一夾高血壓大鼠模型，大致操作是體積為10%水合氯醛腹腔注射麻醉，用內(nèi)徑0.25mm的U形銀夾套在腎動(dòng)脈上使其狹窄，右腎固定不動(dòng)。模型搭建完成后再隨機(jī)分為高血壓組和他汀組，他汀組接著給予阿托伐他汀20mg/（kg·d）溶解于1ml的蒸餾水后灌胃，其余2組則給予均等的蒸餾水灌胃，3組支持時(shí)間均為8周。以第4周連續(xù)3d3次收縮壓≥150mmHg視為建模成功。

1.3.2 收縮壓及血脂測(cè)定 3組分別于第4、12周后測(cè)定血壓、血脂。血壓測(cè)定：經(jīng)40℃預(yù)熱15-20min，待平靜后測(cè)定尾壓，間隔5min再測(cè)1次，共3次，取平均值。血脂測(cè)定：大鼠空腹12h時(shí)斷尾抽血檢測(cè)，涉及指標(biāo)總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）等。

1.3.3 胸主動(dòng)脈掃描 斷頭處死大鼠，采血并立即取其胸主動(dòng)脈，即刻固定于25g/L戊二醛溶液中，行掃描電鏡觀察血管內(nèi)皮細(xì)胞。

1.3.4 循環(huán)內(nèi)皮組細(xì)胞計(jì)數(shù) 采用倒置熒光顯微鏡對(duì)每孔進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)15個(gè)隨機(jī)選擇的*200視野的CEPCs，取平均值。

1.3.5 循環(huán)內(nèi)皮組細(xì)胞增殖、黏附能力及凋亡情況檢測(cè) 循環(huán)內(nèi)皮組細(xì)胞增殖、黏附、前移能力及凋亡情況檢測(cè)參見文獻(xiàn)[3]，在此不作贅述。

1.4 觀察指標(biāo) ①3組第4、12周時(shí)收縮壓及血脂水平變化；②大鼠胸主動(dòng)脈掃描情況；③循環(huán)內(nèi)皮組細(xì)胞數(shù)量，增殖、黏附、遷移能力及凋亡情況。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS15.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料采用（χ±s）表示，采用X2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 3組第4、12周收縮壓及TC、TG等血脂指標(biāo)水平情況比較，結(jié)果他汀組第4周與第12周的收縮壓分別為（168+11）mmHg、（168+10）mmHg，差異不明顯，說明阿托伐他汀鈣對(duì)收縮壓未見明顯影響，但他汀組第4、12周收縮壓均明顯高于對(duì)照組（P<0.01）。他汀組第4周與第12周4項(xiàng)血脂指標(biāo)均未見明顯差異（P>0.01）。

2.2 3組循環(huán)內(nèi)皮組細(xì)胞數(shù)量，增殖、黏附能力及凋亡率情況比較，3組在循環(huán)內(nèi)皮組細(xì)胞數(shù)量對(duì)比上有顯著性差異（P<0.01）。高血壓組循環(huán)內(nèi)皮組細(xì)胞繁殖能力、黏附能力明顯低于他汀組和對(duì)照組，凋亡率高于他汀組和對(duì)照組（P<0.01）。

3 討 論

從血管細(xì)胞構(gòu)造來看，血管內(nèi)皮細(xì)胞多貼附于血管內(nèi)壁，呈單層連續(xù)扁平狀，其作用在于介導(dǎo)炎癥與免疫、調(diào)節(jié)脂質(zhì)氧化，但特點(diǎn)是受損因素多，如近年來大量研究發(fā)現(xiàn)，血管內(nèi)皮細(xì)胞受損及功能障礙對(duì)高血壓等心血管疾病發(fā)生、發(fā)展有密切關(guān)系，二者互為作用，構(gòu)成臨床心血管疾病多發(fā)的重要原因之一。

大量相關(guān)性研究表明，高血壓狀態(tài)下循環(huán)內(nèi)皮組細(xì)胞有加速老化趨向，從而導(dǎo)致對(duì)受損內(nèi)皮細(xì)胞修復(fù)能力大大降低，這成為高血壓發(fā)生、發(fā)展重要內(nèi)在因素之一，而他汀類藥物則可顯著提高循環(huán)內(nèi)皮組細(xì)胞數(shù)量，并增強(qiáng)功能有積極的促進(jìn)作用。從本文SD大鼠胸主動(dòng)脈掃描結(jié)果來看，高血壓組大鼠胸主動(dòng)脈內(nèi)皮層完整性受破壞，現(xiàn)大量內(nèi)皮細(xì)胞脫落，對(duì)照組則血管內(nèi)壁光滑，可見連續(xù)性扁平狀內(nèi)皮細(xì)胞，至于而他汀組則內(nèi)皮細(xì)胞覆蓋血管內(nèi)壁，且從治療前后收縮壓及血脂水平變化來看，他汀組治療前后收縮壓、4項(xiàng)血脂指標(biāo)變化較另2組差異亦不明顯。

綜上所述，高血壓狀態(tài)下可致血管內(nèi)皮細(xì)胞受損，影響到循環(huán)內(nèi)皮組細(xì)胞數(shù)量及功能，而阿托伐他汀鈣可增加外周血循環(huán)內(nèi)皮組細(xì)胞數(shù)量，并改善其功能，從而達(dá)到增強(qiáng)其對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的修復(fù)能力。

參考文獻(xiàn)

[1] 宋顯晶，劉斌，楊萍鋒.辛伐他汀對(duì)體外培養(yǎng)人臍靜脈血內(nèi)皮祖細(xì)胞擴(kuò)增及黏附能力的影響[J].中國組織上程研究與臨床康復(fù)，2009，12（20）：7268-7261.

[2] 彭文鴻，毛寶齡，鄒霞英.ACEI對(duì)大鼠缺氧性肺動(dòng)脈高壓血管內(nèi)皮保護(hù)作用的研究[J].中國病理生理雜志，2003，5（07）：661-663.

[3] 楊乃令，張馥敏，胡政力，等.辛伐他汀對(duì)內(nèi)皮祖細(xì)胞增殖、遷移及凋亡影響的研究[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2007，27（9）：952-955.