廖建寧

【摘 要】目的：進一步研究順鉑、川穹嗪對于小細胞肺癌細胞的治療作用以及影響分析。方法：在含小牛血清10%的培養(yǎng)液RPMI1640，進行細胞株NCI-H446的培養(yǎng)。結(jié)果：相比于對照組，順鉑組、川穹嗪組、順鉑川穹嗪組的P16表達水平升高，順鉑川穹嗪組的P16表達水平又高于順鉑組、川穹嗪組。順鉑組、川穹嗪組、順鉑川穹嗪組的Cyclin D1表達水平下降。順鉑川穹嗪組的Cyclin D1表達水平又高于順鉑組、川穹嗪組。結(jié)論：順鉑、川穹嗪都可以對NCL-H446細胞增殖起到抑制作用，兩種藥物的聯(lián)合使用效果更加明顯。與此同時，還可以降低小細胞肺癌的Cyclin D1水平，提高P16表達水平。

【關(guān)鍵詞】川芎嗪；順鉑；小細胞肺癌細胞

小細胞肺癌比較容易出現(xiàn)血行和淋巴轉(zhuǎn)移，這是研究和治療的一個難點，也是重點問題。通過大量的研究資料證明，川穹嗪對于肺癌細胞有抑制生長的作用，順鉑則是一種比較常用的“化療”藥物，對于小細胞肺癌的治療有著一定的療效和作用，但是，在后期則比較容易出現(xiàn)抗藥性。還有的研究表明，川穹嗪與化療藥物一起使用，可以有效地提高對于部分惡性腫瘤的療效[ 1 ]。為了進一步研究順鉑聯(lián)合川穹嗪對于小細胞肺癌的治療和作用，筆者進行了詳細研究。

1 材料與方法

1.1 主要試劑及細胞株

人小細胞肺癌NCI-H446細胞株，順鉑、川穹嗪注射液、小牛血清、培養(yǎng)液RPMI1640， Cyclin D1蛋白。

1.2 方法

在含小牛血清10%的培養(yǎng)液RPMI1640，進行細胞株NCI-H446的培養(yǎng)。漿細胞進行胰酶消化，成為單細胞的懸液，將細胞密度設(shè)成1×105/ml，分成空白對照組（常規(guī)培養(yǎng)），順鉑組（加入順鉑培養(yǎng)液2ug/ml），川穹嗪組（加入川穹嗪培養(yǎng)液100ug/ml）和順鉑聯(lián)合川穹嗪組（加入順鉑培養(yǎng)液2ug/ml+加入川穹嗪培養(yǎng)液100ug/ml），進行培養(yǎng)。在一定的時間廢培養(yǎng)液、終止培養(yǎng)。每孔加入10ulMTT，培養(yǎng)四小時，去掉上清，在加入100ulDMSO震蕩10分鐘，然后檢測OD值。

2結(jié)果

細胞集落形成率分析：順鉑組是15.7%±3.6%，川穹嗪組是17.8%±3.8%，順鉑聯(lián)合川穹嗪組是11.3%±2.8%，對照組是23.9±4.1，相比較P小于0.05. 順鉑聯(lián)合川穹嗪組與順鉑組、川穹嗪組相比較，P小于0.05.

3 討論

對于小細胞肺癌患者主要是以化療和放療為主，此病患者的存活率僅為5%。最主要的原因就是：大部分患者在治療過程中會產(chǎn)生耐藥性[2]。隨著醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，人們對于川穹嗪治療腫瘤的療效作用日益關(guān)注。根據(jù)本文的研究顯示：在24、48、72小時時，光密度值，順鉑組為0.317±0.043，0.803±0.038，0.987±0.027，川穹嗪組為0.389±0.045，0.816±0.062，1.032±0.033，順鉑聯(lián)合川穹嗪組為0.318±0.039，0.781±0.035，0.854±0.036，空白組的為0.428±0.043，0.831±0.058，1.005±0.068，相比較P小于0.05. 細胞集落形成率分析：順鉑組是15.7%±3.6%，川穹嗪組是17.8%±3.8%，順鉑聯(lián)合川穹嗪組是11.3%±2.8%，對照組是23.9±4.1，相比較P小于0.05. 順鉑聯(lián)合川穹嗪組與順鉑組、川穹嗪組相比較，P小于0.05.在用藥72小時之后，相比于對照組，順鉑組、川穹嗪組、順鉑川穹嗪組的P16表達水平升高，順鉑川穹嗪組的P16表達水平又高于順鉑組、川穹嗪組。順鉑組、川穹嗪組、順鉑川穹嗪組的Cyclin D1表達水平下降。順鉑川穹嗪組的Cyclin D1表達水平又高于順鉑組、川穹嗪組。此結(jié)果充分說明，順鉑、川穹嗪都可以在一定程度上起到對小細胞肺癌的抑制作用，兩種藥物的聯(lián)合使用，對于小細胞肺癌的抑制作用更加增強，主要原因在于川穹嗪種新的血管生長抑制劑，能夠抑制腫瘤新生血管的形成，對惡性腫瘤細胞與內(nèi)皮細胞之間的黏附有明顯的抑制作用，降低內(nèi)皮細胞的通透性，保護內(nèi)皮細胞的完整，阻斷惡性腫瘤細胞與組織基質(zhì)的黏附，降低小細胞肺癌的Cyclin D1水平，提高P16蛋白表達水平，從而減少惡性腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移，且川芎嗪可通過其抗凝作用起到抗腫瘤轉(zhuǎn)移；另外，川穹嗪是活血化瘀抗腫瘤中藥川芎的主要成分，具有放射增敏及放射保護、化療增效與減毒以及免疫調(diào)節(jié)的作用，臨床應(yīng)用的安全性較高[3]。綜上所述，順鉑、川穹嗪都可以對NCL-H446細胞增殖起到抑制作用，兩種藥物的聯(lián)合使用效果更加明顯。與此同時，還可以降低小細胞肺癌的Cyclin D1水平，提高P16蛋白表達水平。

參考文獻

[1]吉濤，劉永，王偉等.肺癌端粒酶活性、P53突變蛋白及細胞增殖DNA合成期比例相關(guān)研究[J].徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2008，22（1）：30-33

[2] 徐曉玉，嚴鵬科，陳剛等.川芎嗪對小鼠肺癌血管生長和VEGF表達的抑制[J].中國藥理學(xué)通報，2009，20（2）：151-154

[3]謝佐福，沈世仁.川芎嗪和羥基脲對阿霉素K562細胞株DNA合成的影響.中華醫(yī)學(xué)雜志，2009，73（9）：559-562