王玉龍 胡仁莉

（1.江蘇省動物疫病預防控制中心，南京 210000；

2.江蘇省蘇州市畜牧獸醫(yī)站，蘇州 215000）

家畜口蹄疫雙價疫苗免疫效果評估

王玉龍1胡仁莉2

（1.江蘇省動物疫病預防控制中心，南京 210000；

2.江蘇省蘇州市畜牧獸醫(yī)站，蘇州 215000）

為了對現(xiàn)用的口蹄疫雙價苗免疫效果進行有效評估，我們選擇了不同疫苗生產(chǎn)廠家生產(chǎn)的疫苗對家畜進行免疫，對同一疫苗生產(chǎn)廠家疫苗選擇不同劑量免疫，并用不同檢測方法進行檢測。現(xiàn)將實驗比較結(jié)果報告如下：

1 材料和方法

1.1 實驗動物

蘇州市種羊場提供的湖羊和蘇州云蘭牧場提供的奶牛。

1.2 疫苗

由中農(nóng)威特生物科技股份有限公司和中牧股份有限公司提供。

1.3 檢測試劑

檢測試劑由蘭州獸醫(yī)研究所提供；實驗操作和結(jié)果判定按說明書要求進行。

1.4 分組方法及免疫劑量

試驗湖羊和奶牛均隨機分成2組，首次免疫分別按廠家推薦劑量和加倍量進行免疫。

1.5 不同廠家生產(chǎn)的疫苗免疫效果比較

另各選取湖羊和奶牛用中牧股份生產(chǎn)的疫苗進行免疫，并跟蹤監(jiān)測抗體水平，對使用兩個生產(chǎn)廠家的疫苗的實驗動物，進行平行對比試驗。

1.6 不同檢測方法檢測抗體的相關(guān)性比較

隨機選取了湖羊和奶牛血清樣品進行兩種不同的抗體檢測方法的相關(guān)性比較。以正向間接血凝試驗（HA）為基礎，HA檢測為陽性的樣本中液相阻斷酶聯(lián)免疫吸附試驗（LB-ELISA）的陽性檢出率為二者的陽性符合率，HA檢測為陰性的樣本中LBELISA方法的陰性檢出率為二者的陰性檢出率，兩種方法檢測同為陽性或陰性的血清樣本占檢測總樣本的比率為二者的總體符合率。

2 結(jié)果與分析

2.1 湖羊分組后按正常推薦劑量和加倍劑量免疫的抗體消長結(jié)果

湖羊以推薦劑量和加倍劑量免疫后通過LB-ELISA檢測O型口蹄疫抗體的OD值，以50%的阻斷計算效價。

2.1.1 羔羊首免后分兩組免疫后抗體消長情況檢測結(jié)果，詳見表1、表2。平均滴度 239 677 648 487 277 132合格率（%） 72.6 100 100 96.8 88.7 73.2

表1 羔羊推薦計量首免后O型抗體檢測結(jié)果（1∶X）

表2 羔羊加倍劑量首免后O型抗體檢測結(jié)果（1∶X）

2.1.2 犢牛首免后分兩組免疫后抗體消長情況檢測結(jié)果，詳見表3、表4。

表3 犢牛推薦計量首免后O型抗體檢測結(jié)果（1∶X）

表4 犢牛加倍劑量首免后O型抗體檢測結(jié)果（1∶X）

2.2 不同疫苗生產(chǎn)廠家疫苗免疫后的O型口蹄疫抗體消長結(jié)果

中牧股份生產(chǎn)的疫苗免疫抗體監(jiān)測結(jié)果如下，中農(nóng)威特生物股份有限公司生產(chǎn)的疫苗抗體監(jiān)測結(jié)果見結(jié)果2.1。

2.2.1 湖羊血清樣品通過LB-ELISA檢測O型口蹄疫抗體的OD值，以50%的阻斷計算效價。

2.2.1.1 羔羊母源抗體消長情況檢測結(jié)果，詳見表5。

表5 羔羊口蹄疫O型母源抗體檢測結(jié)果（1∶X）

2.2.1.2 羔羊中牧股份生產(chǎn)疫苗首免后抗體消長情況檢測結(jié)果，詳見表6。

表6 羔羊口蹄疫O型首免后抗體檢測結(jié)果（1∶X）

2.2.1.3 羔羊中牧股份生產(chǎn)疫苗二免后抗體消長情況檢測結(jié)果，詳見表7。

表7 羔羊口蹄疫O型二免后抗體檢測結(jié)果（1∶X）

2.2.2 奶牛血清樣品通過LB-ELISA檢測O型口蹄疫抗體的OD值，以50%的阻斷計算效價。

2.2.2.1 犢牛母源抗體消長情況檢測結(jié)果，見表8。

表8 犢?？谔阋逴型母源抗體檢測結(jié)果（1：X）

2.2.2.2 犢牛中牧股份生產(chǎn)疫苗首免后抗體消長情況檢測結(jié)果，見表9。

表9 犢?？谔阋逴型首免后抗體檢測結(jié)果（1：X）

2.2.2.3 犢牛中牧股份生產(chǎn)疫苗二免后抗體消長情況檢測結(jié)果，見表10。

表10 犢牛口蹄疫O型二免后抗體檢測結(jié)果（1∶X）

2.3 LB-ELISA和HA方法的檢測符合率

2.3.1 兩種方法檢測湖羊O型口蹄疫抗體的檢測符合率 詳見表11。表中可見LB-ELISA和HA兩種方法對所有檢測血清樣品的陽性符合率為77.1%，陰性符合率為61.8%，陰陽性符合率為74.5%。

表11 LB-ELISA和HA方法的檢測湖羊O型口蹄疫抗體符合率分析結(jié)果

2.3.2 兩種方法檢測奶牛O型口蹄疫抗體的檢測符合率 詳見表12。表中可見LB-ELISA和HA兩種方法對所有檢測血清樣品的陽性符合率為75.8%，陰性符合率為65.1%，總符合率為73.5%。

表12 LB-ELISA和HA方法的檢測奶牛O型口蹄疫抗體符合率分析結(jié)果

3 討論

3.1 從上面的結(jié)果中可以看出，加倍劑量免疫的抗體水平比正常推薦劑量的抗體水平稍高，換算成平均滴度的話，平均高1～2個滴度水平，并不存在特別高的抗體水平的差異[1～2]，因此，我們在進行免疫時還是建議采用廠家推薦的劑量進行。

3.2 在本試驗過程中，我們也進行了不同廠家疫苗的比較性試驗，從試驗結(jié)果我們可看出，這兩家廠家生產(chǎn)的疫苗的免疫效果也不存在顯著差異，因為我們試驗所用的疫苗均為我國正規(guī)廠家所生產(chǎn)的，有合格的生產(chǎn)批號，從一定程度上也可說明我國正規(guī)廠家生產(chǎn)的疫苗還是可以信賴的，但由于本試驗時間及實驗動物有限所以我們只是做了兩個生產(chǎn)廠家的疫苗進行了比較，要想得出這種結(jié)論還需進一步的試驗證明。

3.3 本試驗中，我們還采用了LB-ELISA和HA兩種檢測方法進行了相關(guān)性的比較，從比較的結(jié)果可以看出這兩種方法在檢測O型口蹄疫抗體中還是存在一定的相關(guān)性的，其中有一部分的檢測差異可能的原因有：首先，HA試驗本身就有假陽性的非特異性反應存在，而LB-ELISA是比HA更敏感、特異性更強的試驗方法；其次，這兩種方法所檢測的口蹄疫抗體不同，HA檢測的主要是口蹄疫病毒的全抗體，而LB-ELISA檢測的是口蹄疫病毒的中和抗體，兩種方法相比LB-ELISA可能更有助于真實反映機體的全部免疫應答效果。

3.4 由于本試驗中所需要的實驗動物數(shù)量太大，所以在不同劑量分組免疫試驗、不同廠家疫苗的平行對比試驗中，我們對原來設計的試驗方案要求稍做了改變，但改動后我們所采用的實驗動物樣本數(shù)完全符合統(tǒng)計學意義[3]，可能對試驗結(jié)果存在一些影響，但這并不影響我們對現(xiàn)用口蹄疫雙價苗免疫效果的評估。

[1] 萬莉，郭鎖鏈，昌尚民，等.家畜口蹄疫疫苗免疫效果的觀察及注苗反應淺析[J].內(nèi)蒙古畜牧科學，2002，（2）：29-30.

[2] 潘鑫，詹松鶴，江定豐，等.家畜免疫O型口蹄疫普通滅活疫苗后的應激反應及抗體變化[J].中國獸醫(yī)科學，2006，36（S1）：5-10.

[3] 楊永欽，李 樂.口蹄疫病毒滅活的研究[J].中國畜禽傳染病學，1995，（2）：32-34.