郝晶晶 李海亮 李 偉 梁 卓 李金梅

北京衛(wèi)生職業(yè)學(xué)院，北京 100053

小兒氨酚黃那敏顆粒是一種適用于緩解兒童普通感冒及流行性感冒常用的復(fù)方制劑，由對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏、人工牛黃以及適量的輔料組成，其中馬來酸氯苯那敏占處方總量的萬分之一，給生產(chǎn)工藝帶來較大的困難。

目前小兒氨酚黃那敏顆粒有294個國內(nèi)生產(chǎn)企業(yè)，該產(chǎn)品現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于《國家藥品標(biāo)準(zhǔn)》化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)第三冊[1]，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)未對該藥品中的微量有效成分馬來酸氯苯那敏進(jìn)行質(zhì)量控制，產(chǎn)品質(zhì)量良莠不齊，因此其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)急待提高。本文參考文獻(xiàn)[2-4]，通過采用HPLC 同時測定產(chǎn)品中對乙酰氨基酚和馬來酸氯苯那敏，對現(xiàn)市場上8個不同廠家產(chǎn)品中二組分的含量均勻度進(jìn)行了考察，調(diào)查該產(chǎn)品的質(zhì)量情況，為今后提高制劑的質(zhì)量要求，保證藥品使用的安全有效，以及制定更高的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供一定的資料依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Waters1525 高效液相色譜系統(tǒng)，Waters2998PDA 檢測器，Empower 色譜工作站（Waters 科技（上海）有限公司）；BP211D 型sartorius 電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器北京有限公司）；KQ-250DB 型數(shù)控超聲波清洗器（昆山超聲儀器廠），PHS-3C 型精密pH 計（上海雷磁儀器廠）。

1.2 試藥

對乙酰氨基酚對照品（批號：100018-200408，中國藥品生物制品檢定所），馬來酸氯苯那敏對照品（批號：100047-200606，中國藥品生物制品檢定所）；甲醇（色譜純，Metl，批號：10071753，Burdick＆Jackson 公司），水為重蒸餾水；磷酸二氫鉀（批號：091129，天津石英鐘廠霸州化工分廠），磷酸（批號：20100705，北京化工廠），三乙胺（批號：20100410，天津市福晨化學(xué)試劑廠），以上試劑均為分析純。

小兒氨酚黃那敏顆粒（批號：201112121B、1106151、066110801、1111018、111002、1112347、11051091、110303）。

2 方法與結(jié)果

2.1 方法

2.1.1 色譜條件 Waters C18色譜柱（150 mm ×4.6 mm，5 μm），流動相為甲醇-磷酸二氫鉀溶液-三乙胺（15∶85∶0.02，磷酸調(diào)pH=3.30），檢測波長為215 nm，流速為1.0 mL/min，柱溫為30℃，進(jìn)樣量為10 μL。以峰面積外標(biāo)法定量，理論塔板數(shù)以對乙酰氨基酚計算不得低于3 000。

2.2 溶液的配制

2.2.1 對照品儲備溶液的配制 精密稱取馬來酸氯苯那敏對照品20.03 mg 于100 mL 量瓶中，加流動相適量，溶解，加流動相稀釋至刻度，精密量取10.0 mL 置于100 mL 容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。

精密稱取對乙酰氨基酚對照品250.76 mg 于50 mL 量瓶中，加流動相適量，溶解，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2.2 供試品溶液的配制 精密稱取裝量的樣品 （相當(dāng)于含對乙酰氨基酚125 mg，馬來酸氯苯那敏0.05 mg）置50 mL量瓶中，加流動相適量，溶解，加流動相稀釋至刻度，過濾，取續(xù)濾液，得樣品。

2.2.3 專屬性試驗(yàn)溶液的配制 按其工藝處方比例制備不含對乙酰氨基酚和馬來酸氯苯那敏的陰性樣品溶液，照上述樣品溶液的制備制成專屬性試驗(yàn)溶液。

2.3 專屬性試驗(yàn)

分別取對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏對照品溶液、陰性樣品溶液、供試品溶液注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖（圖1）。如圖1 所示，對乙酰氨基酚的保留時間約6.8 min，馬來酸氯苯那敏的保留時間約2.4 min，陰性溶液無干擾。

2.4 重現(xiàn)性試驗(yàn)

取樣品溶液6 份，按樣品含量測定方法測定馬來酸氯苯那敏含量為100.7%，RSD=0.7%（n=6）；對乙酰氨基酚含量為102.8%，RSD=1.9%（n=6），表明重現(xiàn)性良好。

2.5 線性關(guān)系考察

2.5.1 馬來酸氯苯那敏 精密吸取馬來酸氯苯那敏對照品儲備液 15、20、25、30、35、40、45mL分別定容至 50 mL，搖勻。按上述色譜條件，分別精密吸取25 μL 注入高效液相色譜儀中，進(jìn)行測定，記錄峰面積。以馬來酸氯苯那敏的峰面積A 對濃度C（mg/mL）進(jìn)行線性回歸，對照品溶液濃度范圍0.006～0.018 mg/mL 得回歸方程為：A=25 138 591.630 5C－9 686.340 5，r=0.999 5（n=7）。

2.5.2 對乙酰氨基酚 精密吸取對乙酰氨基酚對照品儲備液 10、15、20、25、30、35、40 mL，分別定容至 50 mL，搖勻。按上述色譜條件分別精密吸取25 μL 注入高效液相色譜儀中，進(jìn)行測定，記錄峰面積。以馬來酸氯苯那敏的峰面積A 對濃度C（mg/mL）進(jìn)行線性回歸，對照品溶液濃度范圍1～4 mg/mL 得回歸方程為：A=19 176 195C+2 589 351，r=0.999 1（n=7）。

2.6 精密度試驗(yàn)

分別取0.008、0.012、0.016 mg/mL 馬來酸氯苯那敏對照品溶液25 μL，分別連續(xù)進(jìn)樣5 次，測得馬來酸氯苯那敏峰面積的RSD 分別為1.26%、1.62%、1.25%（n=5），表明精密度良好；分別取1.5、2.5、3.5 mg/mL 對乙酰氨基酚對照品溶液25 μL，分別連續(xù)進(jìn)樣5 次，測得對乙酰氨基酚峰面積的RSD 分別為1.24%、1.39%、0.84%（n=5），結(jié)果表明儀器精密度良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取樣品溶液 1份，于 0、1、2、3、4、5 h，分別進(jìn)樣，依法測得馬來酸氯苯那敏和對乙酰氨基酚的峰面積，RSD 分別為 2.0%和 2.2%（n=6）。

2.8 回收率試驗(yàn)

按處方比例配制含對乙酰氨基酚與馬來酸氯苯那敏對照品分別為標(biāo)示量的80%、100%、120%的樣品3 份于量瓶中，按樣品溶液制備及含量測定方法測定，計算回收率。結(jié)果見表1、2。

2.9 樣品含量均勻度測定

圖1 溶液高效液相色譜

取每個廠家的樣品各10 袋，精密稱定每袋藥品的質(zhì)量，定量溶解，搖勻，過濾，取續(xù)濾液，進(jìn)樣10 μL，記錄峰面積，按外標(biāo)法計算對乙酰氨基酚與馬來酸氯苯那敏的含量，結(jié)果見表3。根據(jù)含量計算均勻度，均勻度=A+1.80S，其中A=∣100-相對百分含量∣。

表1 馬來酸氯苯那敏回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表2 對乙酰氨基酚回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表3 樣品含量均勻度測定結(jié)果

3 討論

3.1 小兒氨酚黃那敏顆粒劑中馬來酸氯苯那敏的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定有待提高

馬來酸氯苯那敏是抗組織胺H1受體藥物，可改善鼻塞、流涕等感冒引發(fā)的過敏癥狀，但服用過量極易引發(fā)頭暈、嗜睡等嚴(yán)重不良反應(yīng)。小兒氨酚黃那敏顆粒國家標(biāo)準(zhǔn)中僅控制了對乙酰氨基酚的含量，而對制劑中馬來酸氯苯那敏缺少含量控制指標(biāo)，直接影響了臨床用藥的安全和有效產(chǎn)生，因此對小兒氨酚黃那敏顆粒劑中馬來酸氯苯那敏的質(zhì)量規(guī)定十分必要且有待提高。

3.2 HPLC 法可作為小兒氨酚黃那敏顆粒的質(zhì)量控制方法

原標(biāo)準(zhǔn)含量測定方法中僅測定對乙酰氨基酚，目前有關(guān)采用HPLC 法測定單一組分對乙酰氨基酚含量的文獻(xiàn)報道尚多[5-8]。本實(shí)驗(yàn)在相同色譜系統(tǒng)條件下同時測定小兒氨酚黃那敏顆粒中的馬來酸氯苯那敏及對乙酰氨基酚，方法簡便、快速、準(zhǔn)確、靈敏，穩(wěn)定性、重現(xiàn)性、回收率均符合要求，可作為該制劑的質(zhì)量控制方法。

3.3 對乙酰氨基酚和馬來酸氯苯那敏的均勻度的調(diào)研情況

通過HPLC 同時測定小兒氨酚黃那敏顆粒中對乙酰氨基酚和馬來酸氯苯那敏，對現(xiàn)市場上8個不同廠家的該產(chǎn)品中二組分進(jìn)行了的含量均勻度考察，以二組分含量均勻度為衡量標(biāo)準(zhǔn)，對乙酰氨基酚的均勻度7個產(chǎn)品合格；馬來酸氯苯那敏的均勻度1個產(chǎn)品合格，所抽查的小兒氨酚黃那敏顆粒質(zhì)量只有1個達(dá)到合格要求。

3.4 小兒氨酚黃那敏顆粒存在的質(zhì)量問題及原因分析

通過測定了8個不同廠家的樣品，結(jié)果發(fā)現(xiàn)對乙酰氨基酚含量均勻度大都較好，而馬來酸氯苯那敏的含量均勻度較差，且不同廠家之間的差別較大。這可能原因一是馬來酸氯苯那敏的處方含量較小，僅有萬分之一，生產(chǎn)過程中不易混勻，給生產(chǎn)工藝帶來一定的困難；二是不同廠家的生產(chǎn)工藝和設(shè)備不同，也會給產(chǎn)品的質(zhì)量和差異帶來較大的影響；三是地方藥監(jiān)部門對該藥品的質(zhì)量監(jiān)督管理力度不足。

[1]國家藥品監(jiān)督管理局.國家藥品監(jiān)督管理局國家藥品標(biāo)準(zhǔn)（試行）[S].WS-10001-（HD-0214）-2002.

[2]宋寧寧.小兒氨酚黃那敏顆?，F(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的改進(jìn)建議[J].廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2011，28（3）：354-356.

[3]王丹彧，賈首時，張連成.小兒氨酚黃那敏顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)鑒別方法的改進(jìn)[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2011，8（7）：57-59.

[4]歐陽吉德，王燦，胡雯婷，等.小兒氨酚黃那敏顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究[J].藥物分析雜志，2009，12（8）：45-46.

[4]候毅.HPLC 法測定小兒氨酚黃那敏顆粒劑中對乙酰氨基酚含量[J].中國新技術(shù)新產(chǎn)品，2009，（19）：9-10.

[5]劉旺培，黃義.純高效液相色譜法測定小兒氨酚黃那敏顆粒中對乙酰氨基酚的含量[J].首都醫(yī)藥，2008，15（3）：53.

[6]閆海燕.高效液相色譜法測定小兒氨酚黃那敏顆粒中對乙酰氨基酚的含量[J].安徽醫(yī)藥，2011，15（10）：1213-1214.

[8]陳瓊，馬穩(wěn)，石國明，等.HPLC 測定小兒氨酚黃那敏顆粒中馬來酸氯苯那敏的含量[J].中國醫(yī)藥指南，2009，7（14）：76.