施莉 韋煒 向華 范波 胡莘

·短篇論著·

急性胰腺炎血清促炎細(xì)胞因子及高遷移率族蛋白B1水平的變化及其意義

施莉 韋煒 向華 范波 胡莘

急性胰腺炎(AP)是臨床上一種嚴(yán)重的急腹癥，若處理不當(dāng)，極易進(jìn)展為重癥急性胰腺炎(SAP)，病死率可高達(dá)20%～30%[1-2]。研究認(rèn)為，炎性細(xì)胞因子的表達(dá)失衡對(duì)AP的發(fā)病起重要作用[3]，其中新的晚期促炎細(xì)胞因子高遷移率族蛋白1(HMGB1)與SAP患者的病情嚴(yán)重程度相關(guān)[4]。本研究檢測(cè)AP患者血清HMGB1、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的水平，旨在探討其對(duì)AP嚴(yán)重程度及預(yù)后的評(píng)估價(jià)值。

一、資料與方法

1．臨床資料： 收集2010年1月至2013年6月間金華市人民醫(yī)院收治的126例AP患者。入組標(biāo)準(zhǔn)：(1)均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化病學(xué)分會(huì)胰腺病學(xué)組于2004年制定的診斷及分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)[5]；(2)發(fā)病至入院時(shí)間<24 h；(3)排除其他胃腸疾病、腫瘤及慢性胰腺炎急性發(fā)作者。126例患者中男性69例，女性57例，年齡27～71歲，平均(46±6)歲；輕癥急性胰腺炎(MAP)79例，SAP 47例。選擇同期體檢合格的健康者50例作為對(duì)照組，其中男性29例，女性21例，年齡24～70歲，平均(44±5)歲。參照1995年全國危重病急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]，126例患者根據(jù)有無多器官功能不全綜合征(MODS)分為非MODS 組和MODS組。非MODS組105例，MODS組21例。各組研究對(duì)象在年齡、性別等方面具有可比性。

2．血清HMGB1、TNF-α、IL-6水平檢測(cè)：入院第1、4、7天清晨采集患者空腹靜脈血2 ml，對(duì)照組靜脈血在體檢時(shí)采集，均置于無菌抗凝試管中，3 000 r/min離心20 min收集血清，置-70℃冰箱中保存待測(cè)。HMGB1采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定，試劑盒購自美國Endogen公司。TNF-α、IL-6采用雙抗體夾心ELISA法測(cè)定，試劑盒購自深圳晶美生物工程有限公司，嚴(yán)格按說明書的操作流程操作。

二、結(jié)果

1．AP患者血清HMGB1、TNF-α、IL-6濃度：MAP組第1、4天的血清HMGB1、TNF-α、IL-6水平均顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t值分別為6.15、4.61；3.56、3.03；5.26、4.01；P值均<0.05)，第7天與對(duì)照組的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。SAP組第1、4、7天血清HMGB1、TNF-α、IL-6水平均顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t值分別為6.68、4.76、2.91；4.52、3.59、2.74；5.89、4.71、2.88；P值均<0.05)；亦顯著高于MAP組，差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t值分別為4.71、3.69、3.56；2.73、2.61、2.41；3.52、2.58、2.16；P值均<0.05，表1)。治療后，MAP組和SAP組血清HMGB1、TNF-α、IL-6水平均顯著下降(P值均<0.05)。

表1 各組血清HMGB1、TNF-α、IL-6水平的變化

注：與對(duì)照組比較，aP<0.05；與MAP組同期比較，bP<0.05

經(jīng)Pearson相關(guān)性分析，血清HMGB1水平與TNF-α、IL-6水平均呈線性正相關(guān)(r值分別為0.781、0.812，P值均<0.05)。

2．血清HMGB1、TNF-α、IL-6水平與MODS的關(guān)系：入院第1天，MODS組患者TNF-α、IL-6、HMGB1水平均顯著高于非MODS組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均<0.05，表2)。

表2 2組血清TNF-α、IL-6、HMGB1水平比較

討論AP作為一種胰腺急性炎癥反應(yīng)，多數(shù)患者的病程表現(xiàn)為自限性，但15%～20%的患者可進(jìn)展為SAP[6]。近年來，隨著對(duì)AP發(fā)病機(jī)制研究的不斷深入，細(xì)胞因子在AP的發(fā)生、發(fā)展過程中的作用愈發(fā)引人關(guān)注。炎性細(xì)胞因子的大量釋放導(dǎo)致的“級(jí)聯(lián)瀑布式”反應(yīng)，并作用于胰腺及胰外臟器是SAP進(jìn)展為全身炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS)、導(dǎo)致MODS的重要因素[7]。因此，炎性細(xì)胞因子可早期快速對(duì)AP的病情作出診斷，有助于指導(dǎo)臨床治療，降低病死率。

臨床上將細(xì)胞因子分為促炎細(xì)胞因子、抗炎細(xì)胞因子兩大類，TNF-α、IL-6均屬于前者，廣泛參與機(jī)體的免疫應(yīng)答過程，且在AP中起重要作用。TNF-α、IL-6主要由單核-巨噬細(xì)胞、激活的T細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等產(chǎn)生，均屬于早期炎性遞質(zhì)，可介導(dǎo)胰腺局部及全身性反應(yīng)，并隨AP的嚴(yán)重程度而逐漸增高[8]。低濃度的TNF-α就能通過與胰腺腺泡膜結(jié)合誘導(dǎo)腺泡凋亡，高濃度時(shí)可進(jìn)一步促使IL-1、IL-6等炎癥遞質(zhì)過表達(dá)，放大炎癥反應(yīng)[9]。Aoun等[10]的薈萃分析顯示，血清IL-6水平對(duì)SAP早期診斷的敏感性與特異性分別在81.0%～83.6%和75.6%～85.3%。本研究的MAP組第1、4天，SAP組第1、4、7天血清TNF-α、IL-6水平均明顯高于對(duì)照組，且SAP組水平又顯著高于同時(shí)間點(diǎn)的MAP組，與王要軍等[11]的結(jié)果一致，進(jìn)一步說明血清TNF-α、IL-6是AP發(fā)生、發(fā)展的重要炎癥遞質(zhì)，且與AP的嚴(yán)重程度密切相關(guān)。

HMGB1是核內(nèi)一類非組蛋白染色體結(jié)合蛋白，其作為組織損傷的重要信號(hào)，產(chǎn)生時(shí)間晚于TNF-α、IL-1等“早期”炎性遞質(zhì)，具有放大和維持炎癥反應(yīng)的作用。體內(nèi)、外研究均顯示HMGB1在內(nèi)毒素刺激8 h以后開始釋放，16～32 h達(dá)到峰值[12]。本研究結(jié)果顯示，治療后AP血清HMGB1水平均明顯下降，但SAP組血清HMGB1水平始終顯著高于同時(shí)間點(diǎn)MAP組，而且血清HMGB1水平與TNF-α、IL-6水平均呈顯著正相關(guān)，提示血清HMGB1可作為AP病情評(píng)估的良好指標(biāo)。聯(lián)合檢測(cè)血清TNF-α、IL-6、HMGB1水平對(duì)判斷AP嚴(yán)重程度及患者預(yù)后有重要意義。

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10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2013.05.012

321000 浙江金華，金華市人民醫(yī)院消化科

施莉，Email: shilijinhua@126.com

2013-08-20)

(本文編輯：呂芳萍)