張士霞，張建濤，張 楠，王洪斌

（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院，黑龍江 哈爾濱150030）

動物腹腔鏡技術(shù)已經(jīng)被獸醫(yī)們所接受，其應(yīng)用范圍越來越廣，所用來進行的手術(shù)操作也趨向于復(fù)雜，已經(jīng)由起初簡單的動物腹腔臟器觀察與取樣，發(fā)展到對犬、貓小動物和馬、牛等大動物進行臨床疾病診療和外科手術(shù)操作［1］。隨著臨床腹腔鏡手術(shù)的廣泛開展，與之相關(guān)的基礎(chǔ)研究已經(jīng)逐漸成為人們關(guān)注的焦點。手術(shù)對機體的影響不僅是切口創(chuàng)面、解剖平面和器官切除引起的創(chuàng)傷，而其主要問題是術(shù)后肝腎功能的影響。在人類醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，腹腔鏡手術(shù)對人體肝腎功能的影響已有一些報道［2－3］，但在獸醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，相關(guān)研究還相對比較滯后，現(xiàn)將犬腹腔鏡結(jié)腸固定術(shù)對肝腎功能的影響報告如下，并和開腹結(jié)腸固定術(shù)進行對比，為腹腔鏡在獸醫(yī)臨床的應(yīng)用，提供理論依據(jù)，并填補動物腹腔鏡手術(shù)在基礎(chǔ)研究中的空白。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 12條本地雜種犬，雌雄兼有，體重為15～25kg，年齡1～2歲，臨床和實驗室檢驗健康，常規(guī)免疫和驅(qū)蟲。隨機分為兩組：腹腔鏡結(jié)腸固定組（Laparoscopic colopexy，LC）和開腹結(jié)腸固定組（Open colopexy，OC）。

1.2 試驗器材 常規(guī)手術(shù)器械，腹腔鏡手術(shù)儀器和器械，Datex重癥監(jiān)護儀和呼吸監(jiān)護儀。

1.3 試驗試劑 犬眠寶、犬醒寶；硫酸阿托品注射液；氨芐西林鈉、生理鹽水；新潔爾滅、甲醛、高錳酸鉀；天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶試劑盒、肌酐試劑盒、尿素氮試劑盒。

1.4 手術(shù)術(shù)式 試驗犬手術(shù)前禁食12h，禁水6h，手術(shù)部位大范圍剃毛和消毒。硫酸阿托品0.03mg/kg體重劑量，皮下注射。15min后，犬眠寶0.15mL/kg體重劑量，肌肉注射，實施全身麻醉，仰臥保定。氣管插管，呼吸監(jiān)護儀和循環(huán)監(jiān)護儀全程監(jiān)護。由同一組人員來完成兩種不同術(shù)式的手術(shù)操作。

1.4.1 腹腔鏡結(jié)腸固定術(shù) 采用三套管法完成手術(shù)操作。手術(shù)主要分為四步。首先建立氣腹，氣腹壓維持在10mmHg；然后進入套管和器械，一個腹腔鏡套管，兩個器械套管，腹腔鏡套管進入腹腔鏡，器械套管進入腹腔鏡無損傷抓鉗和持針器；再后是結(jié)腸的固定，將結(jié)腸和腹壁結(jié)節(jié)縫合在一起，間斷縫合6針，共2排，每排3針；最后是閉合腹腔，4號和7號不可吸收縫線結(jié)節(jié)縫合穿刺口。

1.4.2 開腹結(jié)腸固定術(shù) 手術(shù)主要分為3步。首先是結(jié)腸的暴露，腹中線切口，臍下8～10cm，切開皮膚、腹膜打開腹腔，于膀胱底部探察降結(jié)腸，并拉出體外；然后是結(jié)腸的固定，于結(jié)腸預(yù)固定處兩端做牽引線，在牽引線范圍內(nèi)切開結(jié)腸漿肌層3～4cm。預(yù)將降結(jié)腸固定于腹中線左側(cè)2.5cm處，切開此處的腹膜、腹斜肌和腹橫肌，最后用2－0號可吸收縫線，將結(jié)腸切口兩側(cè)分別和腹壁對應(yīng)切口的兩側(cè)連續(xù)縫合在一起；最后是閉合腹腔，4號不可吸收縫線連續(xù)縫合腹膜和肌肉，7號不可吸收縫線結(jié)節(jié)縫合皮膚。

1.5 樣本采集與處理 兩組試驗犬均于術(shù)前、術(shù)后即刻及術(shù)后第1、3、5、7天清晨喂食前抽取前肢靜脈血2 mL，置于5mL的真空儲血管中靜置30min，待血液自然凝固3 000r/min（4℃）離心10min后，吸取上層血清分裝于1.5mL離心管中，置于－80℃低溫冰箱保存。檢測天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶、肌酐和尿素氮。

1.6 統(tǒng)計分析 用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包進行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析，差異顯著性分析采用單因素方差分析（one－way ANOVA），數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±SD）表示。

2 結(jié)果

2.1 手術(shù)對肝功能的影響

2.1.1 天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）在術(shù)后即刻、術(shù)后1d、5d和7d，兩組間AST變化差異不顯著（P＞0.05）。術(shù)后3d，腹腔鏡組與開腹組 AST變化差異顯著（P＜0.05）。在腹腔鏡組，AST呈先升高后降低的趨勢，變化幅度不大。在術(shù)后1d顯著升高（P＜0.05），術(shù)后1d達到最高值，之后逐漸下降，術(shù)后7d基本恢復(fù)至術(shù)前水平。與術(shù)前相比，術(shù)后1d、3d差異極顯著（P＜0.01），其他時間點均差異不顯著（P＞0.05）。在開腹組，AST變化趨勢和開腹組相似，也于術(shù)后1d達到最高，之后逐漸下降。與術(shù)前相比，術(shù)后即刻和術(shù)后1d差異顯著（P＜0.05），其他時間點均差異不顯著（P＞0.05）。見表1。

表1 LC和OC對犬AST的影響 （±SD，n＝6）（U/L）

表1 LC和OC對犬AST的影響 （±SD，n＝6）（U/L）

注：組間比較/組內(nèi)比較；大寫字母完全不同為P＜0.01，小寫字母完全不同為P＜0.05。下表同

術(shù)前 術(shù)后即刻 術(shù)后1d 術(shù)后3d 術(shù)后5d 術(shù)后7d腹腔鏡組 24.50±6.79 34.63±9.71 47.11±5.88 45.23±8.33 38.40±8.25 29.45±6.68 Aa/Aa Aa/Aa Aa/Bb Aa/Bb Aa/Ab Aa/Aa開腹組 18.14±6.09 35.10±9.62 34.16±9.33 27.09±10.20 25.21±4.26 25.44±4.30 Aa/Aa Aa/Ab Aa/Ab Ab/Aa Ab/Aa Aa/Aa

2.1.2 丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT） 各時間點兩組間ALT變化差異不顯著（P＞0.05）。在腹腔鏡組，ALT同樣也呈先升高后降低的趨勢。在術(shù)后1d達到最高，之后逐漸下降，直到術(shù)后7d仍沒有恢復(fù)至術(shù)前水平。與術(shù)前相比，各時間點均差異不顯著（P＞0.05）。開腹組的變化趨勢與腹腔鏡組相同，組內(nèi)各時間點與術(shù)前相比均差異不顯著（P＞0.05）。見表2。

表2 LC和OC對犬ALT的影響 （±SD，n＝6）（U/L）

表2 LC和OC對犬ALT的影響 （±SD，n＝6）（U/L）

術(shù)前 術(shù)后即刻 術(shù)后1d 術(shù)后3d 術(shù)后5d 術(shù)后7d腹腔鏡組 29.77±5.83 55.02±17.32 61.36±22.76 59.80±28.78 61.10±38.23 49.58±19.62 Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa開腹組 32.23±6.42 40.65±2.94 42.46±4.70 35.47±1.19 34.43±2.50 34.17±6.25 Aa/Aa Aa/Ab Aa/Ab Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa

2.1.3 堿性磷酸酶（ALP） 各時間點兩組間ALP變化差異不顯著（P＞0.05）。在腹腔鏡組，ALP在術(shù)后1d顯著升高（P＜0.05），并且術(shù)后1d達到最高，之后逐漸下降，直到術(shù)后7d基本恢復(fù)至術(shù)前水平。與術(shù)前相比，術(shù)后1d差異顯著（P＜0.05），其他時間點均差異不顯著（P＞0.05）。在開腹組，ALP先升高后降低，術(shù)后1d達到最高，之后逐漸降低。各時間點與術(shù)前相比均差異不顯著（P＞0.05）。見表3。

2.2 手術(shù)對腎功能的影響

2.2.1 肌酐（Cr） 各時間兩組間Cr變化差異不顯著（P＞0.05）。在腹腔鏡組，Cr呈先升高后降低的趨勢，在術(shù)后1d達到最高值，之后逐漸下降，術(shù)后3d基本恢復(fù)到術(shù)前水平。相對于術(shù)前，術(shù)后1d差異顯著（P＜0.05），而其他時間點均差異不顯著（P＞0.05）。開腹組的變化趨勢與腹腔鏡組相同，組內(nèi)各時間點與術(shù)前相比均差異不顯著（P＞0.05）。見表4。

表3 LC和OC對犬ALP的影響 （±SD，n＝6）（U/L）

表3 LC和OC對犬ALP的影響 （±SD，n＝6）（U/L）

術(shù)前 術(shù)后即刻 術(shù)后1d 術(shù)后3d 術(shù)后5d 術(shù)后7d腹腔鏡組 133.77±34.78 171.40±18.03 220.88±58.27 168.96±46.05 140.36±41.45 128.88±39.30 Aa/Aa Aa/Aa Aa/Ab Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa開腹組 141.86±76.72 167.64±81.48 189.84±77.84 164.06±64.94 142.05±64.78 142.61±62.20 Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa

表4 LC、LAC和OC對犬Cr的影響 （±SD，n＝6）（umol/L）

表4 LC、LAC和OC對犬Cr的影響 （±SD，n＝6）（umol/L）

術(shù)前 術(shù)后即刻 術(shù)后1d 術(shù)后3d 術(shù)后5d 術(shù)后7d腹腔鏡組 52.63±16.08 66.67±10.53 85.38±16.58 53.80±33.16 51.46±8.83 53.80±4.05 Aa/Aa Aa/Aa Aa/Ab Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa開腹組 56.14±7.02 63.16±12.15 65.50±4.05 56.14±7.02 53.80±17.31 50.29±10.72 Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa

2.2.2 尿素氮（BUN） 各時間點兩組間BUN變化差異不顯著（P＞0.05）。在開腹組，BUN同樣也呈先升高后降低的趨勢，術(shù)后1d達到最高，之后逐漸下降，術(shù)后7d基本恢復(fù)到術(shù)前水平。相對于術(shù)前，術(shù)后1d差異極顯著（P＜0.01），而術(shù)后其他時間點均差異不顯著（P＞0.05）。在開腹組，BUN也于術(shù)后1 d顯著升高（P＜0.05），之后逐漸下降，其他時間點與 術(shù)前相比差異不顯著（P＞0.05）。見表5。

表5 LC和OC對犬BUN的影響 （X±SD，n＝6）（mmol/L）

3 討論

3.1 手術(shù)對肝功能的影響 腹腔鏡手術(shù)中肝功能的改變與氣腹大小，氣腹持續(xù)時間的長短，體位，電熱損傷等因素有關(guān)。Van Goethem等［4］的研究認(rèn)為，腹腔鏡手術(shù)后肝功能改變與術(shù)中過度電灼，損傷肝組織有關(guān)。周正東等［5］也認(rèn)為，電熱損傷局部肝組織和肝外膽管的熱電效應(yīng)是術(shù)后肝功能變化的主要原因。嵇武等［6］研究表明，CO2氣腹對兔肝功能有明顯的影響，表現(xiàn)為肝酶的升高，此種作用與氣腹壓力的高低、作用時間長短相關(guān)。本試驗中，LC組術(shù)后AST、ALT、ALP均迅速升高，均于術(shù)后第1天達到高峰，AST、ALP與術(shù)前相比差異顯著，ALT與術(shù)前相比沒有顯著性差異。這與Kotak等［7］報道的LC術(shù)后AST和ALT都有一定程度的上升是一致的。氣腹后3d，肝酶有所下降，但大部分指標(biāo)未恢復(fù)正常。肝酶在術(shù)后的變化說明腹腔鏡手術(shù)改變了肝臟的灌注、影響了病人的肝功能。OC組肝酶也于術(shù)后1d達到高峰，變化趨勢基本與LC組相似。說明LC術(shù)后肝功能的變化幾乎與OC組沒有差異。

3.2 手術(shù)對腎功能的影響 CO2氣腹對腎功能的影響與CO2的吸收和腹腔內(nèi)壓力（IAP）狀態(tài)相關(guān)。目前CO2氣腹對腎功能影響的報道相對較少，吳越等［8］在腹腔鏡膽囊切除術(shù)中不同氣腹壓力對腎功能影響的對比觀察中報道，腎功能正常者在低壓和高壓氣腹?fàn)顟B(tài)下，術(shù)前術(shù)中腎功能比較差異無顯著性。郁兆存等［9］研究報道，術(shù)后腎功能變化與氣腹壓力和氣腹持續(xù)時間明顯相關(guān)。本試驗表明，LC組術(shù)后BUN和Cr均升高，二者均于術(shù)后第1天即達到高峰，且顯著高于術(shù)前水平。術(shù)后第3天逐漸下降，且BUN和Cr于術(shù)后第7天即恢復(fù)到術(shù)前水平。這與郁兆存等報道的4kPa氣腹2h術(shù)后第1天BUN、Cr均升高，氣腹后第3天有所恢復(fù)，第5天恢復(fù)至氣腹前水平的報道基本一致，也與嵇武等［10］報道的LC術(shù)后肝腎功能下降，在術(shù)后1～3d比較明顯，7d左右恢復(fù)正常是一致的。OC組術(shù)后BUN和Cr也升高，但由于氣腹時間較短和未氣腹，術(shù)中各時間點與術(shù)前相比均差異不顯著。腎功能指標(biāo)各時間點兩組之間相比差異不顯著，說明兩種手術(shù)方法對腎功能的影響沒有顯著差異。

3.3 結(jié)語 我們認(rèn)為在本研究條件下，腹腔鏡結(jié)腸固定術(shù)可引起犬的AST、ALT、ALP、BUN、Cr短暫的、可逆性增高，短期內(nèi)可恢復(fù)正常，對遠期肝腎功能無影響。LC手術(shù)與OC手術(shù)相比對肝腎功能的影響沒有顯著差異。

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