鄭會(huì)超，黃 新，吳建良，姜俊芳，宋雪梅，蔣永清

（浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，浙江杭州310021）

據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織（FAO）估計(jì)，全世界每年大約有5%～7%的糧食和飼料受霉菌侵蝕而發(fā)生霉變，營養(yǎng)價(jià)值降低，嚴(yán)重失去飼用價(jià)值。霉菌產(chǎn)生的毒性代謝產(chǎn)物還會(huì)使動(dòng)物發(fā)生慢性或急性中毒，霉菌毒素殘留于動(dòng)物產(chǎn)品中，通過食物鏈威脅人類健康。飼料中常見且危害較大的霉菌毒素有黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素、嘔吐毒素以及伏馬毒素等。浙江省位于長江三角洲地區(qū)，高溫多雨的獨(dú)特氣候條件非常利于霉菌生長繁殖，在飼料作物生長或倉貯期間容易受到霉菌毒素的污染［1－2］。當(dāng)前對(duì)單胃動(dòng)物如豬、禽等精飼料中霉菌毒素污染的報(bào)道較多，而草食家畜如奶牛、肉牛、肉羊中青粗飼料霉菌毒素殘留鮮見報(bào)道［3－4］。筆者從浙江省牛羊飼養(yǎng)量較大的金華、杭州、湖州、寧波等地抽樣采集了代表性青粗飼料樣品，檢測(cè)了黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A、嘔吐毒素以及伏馬毒素B1的殘留情況，并與國內(nèi)和歐盟的飼料已生標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較分析，以期為廣大草食家畜養(yǎng)殖企業(yè)和飼料生產(chǎn)企業(yè)提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

2012年6～12月從浙江省金華、杭州、湖州、寧波、嘉興和衢州地區(qū)的奶牛場(chǎng)、肉牛場(chǎng)和湖羊場(chǎng)采集了22份青粗飼料樣品，詳細(xì)采樣情況見表1。所有樣品在65 ℃鼓風(fēng)恒溫烘干后粉碎過1 mm 篩，在－20 ℃冰箱凍存待測(cè)霉菌毒素殘留。

1.2 分析方法

采用免疫親和柱凈化－柱后光化學(xué)衍生高效液相色譜法檢測(cè)青粗飼料中的黃曲霉毒素，方法的回收率在80%以上，黃曲霉毒素總量的檢出限為1.2 μg／kg。采用進(jìn)口ELISA 試劑盒檢測(cè)玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A、嘔吐毒素和伏馬毒素B1。ELISA 試劑盒由新加坡PRIBOLAB 提供，按試劑盒提供的方法進(jìn)行測(cè)定。酶標(biāo)板孔中赭曲霉毒素A濃度高于2μg／kg、伏馬毒素B1濃度高于1μg／kg，玉米赤霉烯酮濃度高于1μg／kg，嘔吐毒素濃度高于20μg／kg視為陽性樣品。

2 結(jié)果與分析

浙江省主要青粗飼料霉菌毒素污染采樣及檢測(cè)結(jié)果見表1和表2。青粗飼料樣品中多種霉菌毒素并存的情況較為嚴(yán)重，68.2%的樣品中檢測(cè)到3種及以上霉菌毒素殘留，其中鄱陽湖草中5種霉菌毒素并存，野生谷殼中4種霉菌毒素并存。此外，杭州啤酒糟、湖州醬油渣、金華羊草、湖州稻草和嘉興發(fā)酵藥渣中并存2種不同的霉菌毒素，豆腐渣中僅檢出伏馬毒素B1殘留。

浙江省青粗飼料中黃曲霉毒素的檢出率很低，22份檢測(cè)樣品中僅在鄱陽湖草中檢出，其中黃曲霉素G2（AFG2）殘留含量3.7μg／kg，黃曲霉毒素B2（AFB2）殘留含量6.2μg／kg，未檢測(cè)到黃曲霉毒素B1（AFB1）和黃曲霉毒素G1（AFG1）殘留。目前我國尚未制定青粗飼料樣品霉菌毒素標(biāo)準(zhǔn)，只能參考精料標(biāo)準(zhǔn)。我國飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定以AFB1計(jì)，玉米粉，花生餅粕、棉籽餅粕，菜籽餅粕＜50μg／kg；豆粕＜30μg／kg；奶牛精料補(bǔ)充料＜10μg／kg；肉牛精料補(bǔ)充料＜50μg／kg［5］。歐盟，以AFB1計(jì)，犢牛和羔羊飼料＜10μg／kg，泌乳奶牛飼料＜5μg／kg，其他牛羊飼料＜50μg／kg［6］。聯(lián)合國糧農(nóng)組織（2003）對(duì)世界各國關(guān)于奶牛飼料中黃曲霉毒素限量標(biāo)準(zhǔn)整理和分析顯示，多數(shù)國家規(guī)定奶牛飼料中黃曲霉毒素總量須＜20μg／kg［7］。目前我國尚未制定青粗飼料樣品霉菌毒素標(biāo)準(zhǔn)，只能參考精料標(biāo)準(zhǔn)?？梢娵蛾柡葜悬S曲霉毒素殘留未超出我國及世界上多數(shù)國家對(duì)牛羊飼料的限量標(biāo)準(zhǔn)。

表1 浙江省主要青粗飼料中霉菌毒素殘留含量（風(fēng)干物質(zhì)基礎(chǔ)）Table 1 Mycotoxins residual content in forages in Zhejiang（air－dry matter basis）

赭曲霉毒素的檢出率為18.2%，僅從鄱陽湖草、青貯筍殼、啤酒糟和野生谷殼中檢出赭曲霉毒素。我國飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定配合飼料和玉米中赭曲霉毒素殘留須＜100μg／kg［8］。歐盟規(guī)定配合飼料中，豬＜50μg／kg，家禽＜100μg／kg，其他飼料＜250μg／kg［9］。可見4個(gè)陽性樣品的赭曲霉毒素殘留均低于我國及歐盟對(duì)牛羊配合飼料赭曲霉毒素殘留的限量標(biāo)準(zhǔn)。

玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素和伏馬毒素的檢出率較高，分別為90.9%、72.7%和90.9%。我國飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定配合飼料，玉米中玉米赤霉烯酮含量須＜500μg／kg，限定嘔吐毒素犢牛配合飼料＜1 mg／kg，泌乳期動(dòng)物配合飼料＜1mg／kg，牛配合飼料＜5 mg／kg，尚未對(duì)飼料伏馬毒素殘留進(jìn)行限定［8－10］。歐盟規(guī)定犢牛、奶牛、綿羊、山羊補(bǔ)充料和完全飼料玉米赤霉烯酮含量須＜500μg／kg，限定嘔吐毒素犢牛、羔羊補(bǔ)充料和完全飼料＜2mg／kg，豬配合飼料＜0.9 mg／kg其他動(dòng)物＜5 mg／kg，限定伏馬毒素犢牛和羔羊＜20mg／kg，成年反芻動(dòng)物＜50mg／kg。可見，嘔吐毒素的超標(biāo)率較高，壓塊玉米秸、野生谷殼、毛豆稈和金華稻草的嘔吐毒素含量超出我國犢牛和泌乳動(dòng)物配合飼料限定標(biāo)準(zhǔn)，而玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素和伏馬毒素陽性樣品均低于我國及歐盟對(duì)牛羊飼料殘留限量標(biāo)準(zhǔn)。

表2 浙江省主要青粗飼料中霉菌毒素殘留匯總Table 2 Total residues of mycotoxins in forages in Zhejiang

3 討論

霉菌毒素在浙江省青粗飼料中的超標(biāo)率不高，人們重點(diǎn)關(guān)注的黃曲霉毒素的檢出率也不高，與荷蘭和捷克研究人員的調(diào)查結(jié)果相似［11－12］。不過浙江省及歐洲國家生鮮牛奶中黃曲霉毒素M1的檢出率和超標(biāo)率并不樂觀［13－14］，提示除了青粗飼料外，還需關(guān)注精飼料黃曲霉毒素污染狀況。浙江省青粗飼料中玉米赤霉烯酮的檢出率很高，玉米赤霉烯酮被微生物降解后，其代謝產(chǎn)物對(duì)奶牛的危害更大［15］，提示在草食家畜實(shí)際飼養(yǎng)中尚需要密切關(guān)注玉米赤霉烯酮含量。草食家畜能夠依靠瘤胃微生物降解嘔吐毒素、伏馬毒素和赭曲霉毒素，這三種毒素從飼料轉(zhuǎn)移到牛奶的轉(zhuǎn)化率較低［16－18］。壓塊玉米秸、野生谷殼、毛豆稈和金華稻草中嘔吐毒素含量超出我國對(duì)犢牛和泌乳動(dòng)物飼料的限量標(biāo)準(zhǔn)，提示尚需關(guān)注浙江省青粗飼料的嘔吐毒素殘留。伏馬毒素和赭曲霉毒素在浙江省青粗飼料中的殘留量平均值遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于飼料衛(wèi)生限定標(biāo)準(zhǔn)，表明浙江省的氣候條件不利于青粗飼料生長及儲(chǔ)存期間產(chǎn)毒煙曲霉和赭曲霉的生長，提示該兩種毒素在浙江省草食家畜生產(chǎn)中的暴露風(fēng)險(xiǎn)較低。

綜上，玉米赤霉烯酮是浙江省青粗飼料霉菌毒素的首要風(fēng)險(xiǎn)因子，嘔吐毒素次之。青貯玉米是奶牛場(chǎng)的當(dāng)家青粗飼料，占全混合日糧的30%以上；鄱陽湖草中5種霉菌毒素并存；壓塊玉米秸的嘔吐毒素含量超標(biāo)。因此，浙江省青粗飼料需重點(diǎn)關(guān)注青貯玉米、鄱陽湖草及壓塊玉米秸的霉菌毒素殘留。

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