陳 進(jìn) 杭劍萍 李勵(lì)琦

(無(wú)錫市第四人民醫(yī)院腫瘤外科，江蘇 無(wú)錫 214062)

淋巴結(jié)狀態(tài)是反映乳腺癌預(yù)后的重要指標(biāo)。Ki-67抗原為一種細(xì)胞核抗原，僅在增殖細(xì)胞核中表達(dá)，被認(rèn)為是較理想的檢測(cè)細(xì)胞增殖活性的指標(biāo)。已有文獻(xiàn)報(bào)道Ki-67抗原可以作為乳腺癌的預(yù)后指標(biāo)之一〔1〕。本文借助免疫組化技術(shù)，檢測(cè)乳腺癌Ki-67抗原表達(dá)并與彩色多普勒血流顯像(CDFI)檢測(cè)腫塊內(nèi)血流結(jié)合，探討其與乳腺癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1研究對(duì)象 本院2010年5月至2011年5月資料完整、經(jīng)手術(shù)和病理確診的浸潤(rùn)性乳腺癌60例(浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌52例，浸潤(rùn)性小葉癌5例，黏液腺癌3例)，其中腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移33例，腋窩淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移27例，均為女性，年齡34～76(平均53.65)歲。術(shù)前均未接受過(guò)放療或化療。儀器為GE公司Logiq9及 Logiq700彩色多普勒超聲儀，探頭頻率5～12 MHz。

1.2CDFI檢查 患者于術(shù)前1 w行乳腺CDFI檢查，著重觀(guān)察病灶內(nèi)血流信號(hào)分布情況。測(cè)量數(shù)值指標(biāo)存盤(pán)，進(jìn)行脫機(jī)分析。CDFI血流根據(jù)Addler的半定量法分級(jí)，分為0～3共4級(jí)。0級(jí)：腫塊內(nèi)未發(fā)現(xiàn)血流信號(hào)；Ⅰ級(jí)：為少量血流，可見(jiàn)1～2個(gè)點(diǎn)狀或細(xì)短棒狀血管；Ⅱ級(jí)：為中量血流，可見(jiàn)3～4個(gè)點(diǎn)狀血管或一個(gè)較長(zhǎng)的血管，其長(zhǎng)度可接近或超過(guò)腫塊的半徑；Ⅲ級(jí)：為多量血流，可見(jiàn)5個(gè)以上點(diǎn)狀的血管或2個(gè)較長(zhǎng)的血管。

1.3病理檢查 實(shí)驗(yàn)試劑 Ki-67鼠抗人單克隆抗體為即用型，購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。每例標(biāo)本都選擇包括腫瘤中心和腫瘤邊緣的石蠟塊1～2個(gè)，制成連續(xù)切片，片厚3～4 μm。免疫組化采用EnVision二步法。Ki-67陽(yáng)性染色位于細(xì)胞核，呈棕黃色。光鏡下對(duì)每例組織切片癌組織區(qū)域連續(xù)計(jì)數(shù)5個(gè)高倍鏡視野(×400)，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)作為Ki-67指數(shù)。其中陽(yáng)性細(xì)胞所占比例<10%為陰性，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≥10%為陽(yáng)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS11.0軟件進(jìn)行成組設(shè)計(jì)兩樣本均數(shù)t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1CDFI與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系 腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組較未轉(zhuǎn)移組腫瘤內(nèi)彩色血流信號(hào)豐富，轉(zhuǎn)移組主要以Ⅱ～Ⅲ級(jí)血流為主(24例)，未轉(zhuǎn)移組主要以0～Ⅰ級(jí)血流為主(20例)，兩組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。

2.2Ki-67表達(dá)與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系 轉(zhuǎn)移組中Ki-67陽(yáng)性表達(dá)28例，占84.8%；未轉(zhuǎn)移組中Ki-67陽(yáng)性表達(dá)12例，占44.4%。腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組較未轉(zhuǎn)移組Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率明顯增高(P=0.0010)。

2.3CDFI結(jié)合Ki-67診斷乳腺癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的靈敏度及特異度 兩者結(jié)合診斷乳腺癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的敏感度及特異度較單獨(dú)應(yīng)用增高；CDFIⅡ～Ⅲ級(jí)血流診斷乳腺癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的靈敏度為72.7%，特異度為74.1%；Ki-67診斷淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的靈敏度為84.8%，特異度為55.6%；CDFI結(jié)合Ki-67診斷淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的敏感度為90.9%，特異度為85.2%。

3 討 論

局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生與否是決定患者預(yù)后的重要因素之一，也是選擇手術(shù)及放化療的依據(jù)。術(shù)前若能判斷出乳腺癌腋窩淋巴結(jié)狀態(tài)，對(duì)于選擇治療方案和降低術(shù)后患側(cè)上肢水腫、肩關(guān)節(jié)活動(dòng)障礙及胸壁皮膚麻木等并發(fā)癥有重要價(jià)值。

Okuyama等〔2〕應(yīng)用CDFI對(duì)乳腺癌腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的價(jià)值研究表明：腫瘤內(nèi)的血流信息是診斷乳腺癌重要的因素，而且腫瘤內(nèi)的血流信息和腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。趙漢學(xué)等〔3〕應(yīng)用彩超檢測(cè)乳腺癌腫瘤內(nèi)CDFI血流，發(fā)現(xiàn)病變內(nèi)部血流Ⅱ～Ⅲ級(jí)的腫瘤較血流0～Ⅰ級(jí)的腫瘤腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生率高。腫瘤的生長(zhǎng)可分為無(wú)血管期和血管期。無(wú)血管期時(shí)，血管在瘤周生長(zhǎng)而未進(jìn)入瘤內(nèi)，因?yàn)檠褐醒鹾蜖I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)通過(guò)彌散作用能達(dá)到的距離有限，所以腫瘤體積增長(zhǎng)速度較慢；血管期時(shí)，血管延伸至腫瘤內(nèi)部并迅速生長(zhǎng)，腫瘤因此獲得足夠的血供和營(yíng)養(yǎng)，生長(zhǎng)速度明顯增快。同時(shí)因?yàn)槟[瘤血供豐富，血流的剪切力增大，腫瘤細(xì)胞易于脫離，從而增加了轉(zhuǎn)移的潛能〔4〕。因此，CDFI在腫瘤內(nèi)部檢測(cè)出豐富的血流信號(hào)時(shí)，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的概率高。

Ki-67抗原是位于10號(hào)染色體上，由分子質(zhì)量為345 kD和395 kD的2條多肽鏈組成的核蛋白。Ki-67表達(dá)出現(xiàn)于除G0、G1早期以外的細(xì)胞周期中，在G2、M期表達(dá)最強(qiáng)，在有絲分裂后期迅速降解或失去抗原決定簇，被認(rèn)為是能可靠、全面反映細(xì)胞群體增殖活性的客觀(guān)指標(biāo)〔5〕。它的高表達(dá)是細(xì)胞增殖活躍的重要標(biāo)記，可反映腫瘤細(xì)胞的增殖活性。有學(xué)者研究顯示Ki-67在乳腺癌中表達(dá)陽(yáng)性率隨著病理組織學(xué)分級(jí)、TNM 分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目的增加而增加，說(shuō)明腫瘤細(xì)胞的增殖與乳腺癌的腫瘤分化和淋巴侵襲相關(guān)〔6，7〕。Molino等〔8〕亦報(bào)道乳腺癌中Ki-67抗原表達(dá)與腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、雌激素受體(ER)狀態(tài)、孕激素受體(PR)狀態(tài)及組織學(xué)分級(jí)相關(guān)。本研究提示隨著Ki-67抗原表達(dá)強(qiáng)度的增加，腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率亦增高。

綜上所述，浸潤(rùn)性乳腺癌腫瘤內(nèi)CDFI彩色血流信號(hào)分布、豐富程度及Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率與腋窩淋巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。

4 參考文獻(xiàn)

1仲偉霞.乳腺癌診治中的病理學(xué)新進(jìn)展〔J〕.腫瘤防治雜志,2001；8(z1):66-71.

2Okuyama N,Murakuni H,Ogata H,et al.The use of Doppler ultrasound in evaluation of breast cancer metastasis to axillary lymph nodes〔J〕. Oncol Rep,2004；11(2):389-93.

3趙漢學(xué),朱 強(qiáng).聲像圖表現(xiàn)和VEGF-C表達(dá)與乳腺癌腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系分析〔J〕.中國(guó)冶金工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志,2007；24(4):396-8.

4Byers SW,Sommers CL,Hoxter B,etal.Role of E-cadherin in the response of tumor cell aggregates to lymphatic，venous and arterial flow：measurement of cell-cell adhesion strength〔J〕.J cell Sci,1995；108(5):2053.

5徐 衛(wèi),盛瑞蘭,鄭肇巽,等.增殖相關(guān)抗原Ki-67與非霍奇金淋巴瘤組織學(xué)惡性程度及預(yù)后關(guān)系的研究〔J〕.江蘇醫(yī)藥,2001；27(4):261-2.

6李寶江,朱志華,王軍業(yè),等.Ki-67、P53、VEGF和CerbB-2在乳腺癌組織中表達(dá)的相關(guān)性研究及其臨床意義〔J〕.癌癥,2004；23(10):1176.

7王海燕,黃愛(ài)民,高美欽.生存素與Ki-67在乳腺癌的表達(dá)及臨床病理意義.福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2006；40(2):143.

8Molino A,Pedersini R,Micciolo R,etal.Relationship between the thymidine labeling and Ki-67 proliferative indices in 126 breast cancer patients〔J〕.Appl Immunohistochem Mol Morphol,2002；10(4):304-9.