李晨，陳霞

（泰州市疾病預(yù)防控制中心，江蘇泰州 225300）

實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)是判定實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力的重要手段之一，也是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制的補(bǔ)充措施［1–2］。實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)是按照預(yù)先規(guī)定的條件，由兩個(gè)或多個(gè)實(shí)驗(yàn)室對(duì)相同或類似被測(cè)物品進(jìn)行檢測(cè)的組織、實(shí)施和評(píng)價(jià)的活動(dòng)。為進(jìn)一步提高泰州市疾病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力，加強(qiáng)檢測(cè)的質(zhì)量管理，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可比性和可靠性，該中心于2013年組織并實(shí)施了5市疾控中心的實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)活動(dòng)，項(xiàng)目為奶粉中的蛋白質(zhì)測(cè)定。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 比對(duì)樣品制備

泰州市大型乳制品集團(tuán)提供的進(jìn)口奶粉（3種蛋白質(zhì)含量水平），經(jīng)過單因素方差分析，滿足比對(duì)試驗(yàn)要求。

1.2 比對(duì)樣品檢測(cè)方法

推薦采用GB／T 5009.5–2003 《食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》第一法或第二法。

1.3 比對(duì)對(duì)象

揚(yáng)州、南通、徐州、鎮(zhèn)江和泰州疾控系統(tǒng)43個(gè)實(shí)驗(yàn)室，其中地（市）級(jí)5家，縣（區(qū)）級(jí)34家，行業(yè)疾控機(jī)構(gòu)4家。

1.4 比對(duì)樣品考核方法

樣品分為3個(gè)濃度，分別為A，B，C 3組，43個(gè)參試實(shí)驗(yàn)室隨機(jī)分為兩組，第1組23個(gè)實(shí)驗(yàn)室，發(fā)放A，B兩個(gè)濃度樣品；第2組20個(gè)實(shí)驗(yàn)室，發(fā)放B，C兩個(gè)濃度樣品，每個(gè)參試實(shí)驗(yàn)室從1~43分別賦予一個(gè)代碼。

1.5 比對(duì)結(jié)果評(píng)價(jià)方法

該次比對(duì)結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析采用穩(wěn)健統(tǒng)計(jì)方法［3–4］，該法是目前國際上對(duì)實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證和實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)的最常用方法，能客觀、科學(xué)地評(píng)價(jià)每一個(gè)參試實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果。以Z比分?jǐn)?shù)［包括實(shí)驗(yàn)室間Z比分?jǐn)?shù)(ZB)和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)Z比分?jǐn)?shù)(ZW)］評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室的能力檢測(cè)結(jié)果，數(shù)值的統(tǒng)計(jì)判定：| Z |≤2，結(jié)果滿意；2＜| Z |＜3，結(jié)果有問題（或可疑結(jié)果）；| Z |≥3，結(jié)果不滿意或離群。

2 結(jié)果與分析

共發(fā)放了43份奶粉樣品，其中A樣為23份，B樣為43份，C樣為20份，即為23個(gè)實(shí)驗(yàn)室收到A和B兩種樣品，20個(gè)實(shí)驗(yàn)室收到B和C兩種樣品。37家實(shí)驗(yàn)室在規(guī)定時(shí)間內(nèi)提交了蛋白質(zhì)的測(cè)定結(jié)果，檢測(cè)數(shù)據(jù)的總回收率為86.0%，第1組20個(gè)參試實(shí)驗(yàn)室提交了A和B兩種樣品的檢測(cè)結(jié)果，第2組17個(gè)實(shí)驗(yàn)室提交了B和C兩種樣品的檢測(cè)結(jié)果。

2.1 樣品均勻性檢驗(yàn)

依據(jù)《能力驗(yàn)證樣品均勻性評(píng)價(jià)指南》（CNAS–GL03：2006）［5］的規(guī)定，分別從所制備的3種濃度樣品中各隨機(jī)稱取18份樣品進(jìn)行檢測(cè)，利用F檢驗(yàn)對(duì)樣品的均勻性進(jìn)行統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)，結(jié)果見表1和表2。A，B，C 3組樣品均通過相應(yīng)置信水平檢驗(yàn)，3組奶粉的F值分別為2.64，1.12，1.47，均小于3.23［F0.05(8，9)］，表明樣品內(nèi)和樣品間無顯著性差異，樣品的均勻性能夠滿足實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)試驗(yàn)的要求。

表1 比對(duì)樣品的均勻性檢驗(yàn)結(jié)果 g／（100 g）

表2 均勻性檢驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果

2.2 比對(duì)樣品檢測(cè)結(jié)果分析

37家實(shí)驗(yàn)室所提交的蛋白質(zhì)測(cè)定結(jié)果中，結(jié)果滿意(| Z |≤2)的有33家，結(jié)果可疑(2＜| Z |＜3)的有3家，結(jié)果不滿意(| Z |≥3)的有1家。兩組測(cè)定結(jié)果分析見表3～表5。

2.3 Z值結(jié)果柱狀圖

圖1、圖2分別為第1組奶粉蛋白質(zhì)測(cè)定ZB，ZW比分?jǐn)?shù)柱狀圖，圖3、圖4分別為第2組奶粉蛋白質(zhì)測(cè)定ZB，ZW比分?jǐn)?shù)柱狀圖。

表3 第1組比對(duì)樣品測(cè)定結(jié)果分析

表4 第2組比對(duì)樣品測(cè)定結(jié)果分析

表5 比對(duì)樣品檢測(cè)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果

圖1 第1組奶粉蛋白質(zhì)測(cè)定ZB比分?jǐn)?shù)柱狀圖

圖2 第1組奶粉蛋白質(zhì)測(cè)定ZW比分?jǐn)?shù)柱狀圖

圖3 第2組奶粉蛋白質(zhì)測(cè)定ZB比分?jǐn)?shù)柱狀圖

圖4 第2組奶粉蛋白質(zhì)測(cè)定ZW比分?jǐn)?shù)柱狀圖

2.4 參試實(shí)驗(yàn)室總體能力狀況統(tǒng)計(jì)結(jié)果

本次比對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的滿意率為89.2%，有問題率為8.11%，不滿意率為2.70%，結(jié)果見表6。

表6 參試實(shí)驗(yàn)室的總體能力狀況統(tǒng)計(jì)表

3 結(jié)論

(1)實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)試驗(yàn)結(jié)果，總體情況較好，采用穩(wěn)健統(tǒng)計(jì)方法對(duì)參試實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果、參加實(shí)驗(yàn)室的總體能力狀況和各參加實(shí)驗(yàn)室的能力狀況進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)。對(duì)于出現(xiàn)的可疑結(jié)果和不滿意結(jié)果，進(jìn)行了技術(shù)分析［6–7］，并針對(duì)分析提出相應(yīng)的技術(shù)建議［8］。

(2) 37家實(shí)驗(yàn)室均選用凱氏定氮法，經(jīng)過分析，發(fā)現(xiàn)結(jié)果不滿意的那一家實(shí)驗(yàn)室取樣量過大，按照國家規(guī)定的操作方法進(jìn)行操作，樣品消化時(shí)間不長(zhǎng)便干涸成一個(gè)黑球，消化無法繼續(xù)進(jìn)行，原因?yàn)闈饬蛩峒尤肓坎粔蛩?，可通過增加其用量使消化完全。濃硫酸必須過量但又不能加入太多，以避免溫度過高，硫酸銨分解。第二個(gè)造成可疑結(jié)果的原因?yàn)榈味ńK點(diǎn)的判斷。該法采用溴甲酚綠–甲基紅混合指示劑，滴定終點(diǎn)時(shí)由藍(lán)綠色變?yōu)榛疑灾甘窘K點(diǎn)的到達(dá)。但這是一個(gè)漸變過程，不易觀察，而是觀察藍(lán)綠色消失剛變?yōu)榧t色為滴定終點(diǎn)［9］。還有氫氧化鈉溶液的用量和硼酸吸收液的溫度均需嚴(yán)格控制，否則均會(huì)造成結(jié)果的偏離。

［1］ GB／T 15483.1–1999 實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)的能力驗(yàn)證第Ⅰ部分：能力驗(yàn)證計(jì)劃的建立和運(yùn)作［S］.

［2］ GB／T 15483.1–1999 實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)的能力驗(yàn)證第Ⅱ部分：實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可機(jī)構(gòu)對(duì)能力驗(yàn)證的選擇和使用［S］.

［3］ CNAS–GL03: 2006 能力驗(yàn)證結(jié)果的統(tǒng)計(jì)處理和能力評(píng)價(jià)指南［S／OL］.［2009–03–06］http: //www.cnas.org.cn.

［4］ 王承忠.實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)的能力驗(yàn)證及穩(wěn)健統(tǒng)計(jì)技術(shù)［J］.理化檢驗(yàn)：物理分冊(cè)，2005，41(1): 48–51.

［5］ CNAS–GL03: 2006 能力驗(yàn)證樣品均勻性評(píng)價(jià)指南［S／OL］.［2006–03–06］.http://www.cnas.org.cn.

［6］ 戴坤富，楊志國，曾茹萍，等.實(shí)驗(yàn)室間能力驗(yàn)證理化比對(duì)試驗(yàn)結(jié)果分析［J］.中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2013，23(7): 1 811–1 813.

［7］ 王衛(wèi)華，盧曉華，徐銳鋒，等.醬油中3-氯-1，2-丙二醇檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)分析［J］.化學(xué)分析計(jì)量，2012，21(3): 89–91.

［8］ 陸娟.實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)試驗(yàn)結(jié)果分析評(píng)價(jià)［J］.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2008，35(1): 130–134.

［9］ 黃婷婷，曾家民，丘山，等.食品中蛋白質(zhì)測(cè)定方法的改進(jìn)［J］.現(xiàn)代食品科技，2010，26(7): 763–766.