李 云

（包頭師范學(xué)院化學(xué)學(xué)院，內(nèi)蒙古包頭 014030）

橙汁飲料中Vc含量的測(cè)定*

李 云

（包頭師范學(xué)院化學(xué)學(xué)院，內(nèi)蒙古包頭 014030）

為市售飲料中維生素C（Vc）的科學(xué)測(cè)定提供參考。利用Cu2+催化溶解氧氧化Vc，建立紫外分光光度法測(cè)定橙汁中還原型Vc的方法，并對(duì)測(cè)定條件進(jìn)行優(yōu)化。采用磷酸和醋酸混酸溶液（3:7;V:V）或pH=3－4的鹽酸作穩(wěn)定劑，Cu2+為催化劑，70℃恒溫水浴，測(cè)定市售匯源果汁飲品中Vc的含量，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=0.0714x+0.1350，該方法精密度為0.1，建立紫外分光光度法測(cè)定橙汁中Vc的方法，該方法簡(jiǎn)單，快速結(jié)果令人滿意。

維生素C;紫外分光光度法;橙汁

1 引言

目前維生素C（Vc）的測(cè)定方法主要有熒光分析法，碘量法，BPR體系分光光度法、電位滴定法［1－5］。熒光分析法與高效液相色譜法比較貴，通常采用碘量法。但是處理后的樣液都有顏色，不同程度地影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，另外，對(duì)顏色的去除步驟也較為繁瑣，不適合大批量的樣品測(cè)定。Vc在紫外區(qū)246.0nm處有最大吸收，且線性良好，可以直接采用紫外分光光度法測(cè)量。然而由于果汁中其他成分以及被氧化后的Vc在紫外區(qū)也有本底吸收，干擾較大，如何校正本底吸收成為應(yīng)用紫外分光光譜法測(cè)定匯源果汁中Vc含量的關(guān)鍵。目前報(bào)道的方法主要用堿溶液破壞抗壞血酸。筆者采用市售的匯源果汁為研究材料，以Cu2+作為催化劑，加速溶解氧對(duì)還原型Vc的氧化［6］。對(duì)紫外分光光度法測(cè)定橙汁中Vc含量的方法進(jìn)行研究和探索，旨在為Vc的科學(xué)測(cè)定提供參考

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 抗壞血酸的性質(zhì)

維生素C（Vitamin C，Ascorbic Acid）又叫L－抗壞血酸，是一種水溶性維生素。外觀:無(wú)色晶體。熔點(diǎn):190－192℃。紫外線吸收最大值:246.0nm。水溶性維生素。分子式:C6H8O6。分子量:176.13。酸性，具有較強(qiáng)的還原性，加熱或在溶液中易氧化分解。

圖1:抗壞血酸的鍵線式

1.2 基本原理

Vc在紫外區(qū)246.0nm處有最大吸收且線性良好，然而由于果汁中其他成分以及被氧化后的Vc在紫外區(qū)也有本底吸收，干擾較大，調(diào)整溫度70攝氏度，反應(yīng)時(shí)間控制在20min，以Cu2+作催懷劑，Vc被破壞的最完全，測(cè)其被氧化后的5組吸光度，驗(yàn)證儀器精密度及測(cè)得消光值。Vc在體積比為3:7的磷酸和醋酸的混合溶液或pH為3－4溫柔的氫離子環(huán)境中比較穩(wěn)定，在246.0nm處的吸收峰最合適選擇?？芍苯硬捎米贤夥止夤舛确▽?duì)匯源果汁標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行測(cè)量。純匯源果汁Vc吸光度與被氧化后匯源果汁中Vc的吸光度之差即為純匯源果汁中Vc的吸光度，Vc在pH為3－4的溫柔的氫離子環(huán)境中較穩(wěn)定，可直接采用紫外分光光度法對(duì)匯源果汁標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行測(cè)量。

1.3 實(shí)驗(yàn)用品

儀器:UV3010紫外分光光度計(jì)（日本日立公司）、FA1004電子天平（上海越平科學(xué)儀器公司）、SYC－15B超級(jí)恒溫水?。暇┥Ａ㈦娫O(shè)備廠）、100ml容量瓶2個(gè) 、10ml量筒2個(gè)、500ml容量瓶1個(gè)50ml容量瓶5個(gè)、移液管50ml量筒1個(gè)5ml量筒1個(gè)、1cm石英比色皿2個(gè)100ml燒杯1個(gè)50ml燒杯1個(gè)，ph試紙玻璃棒

藥品:抗壞血酸 AR/500g一瓶，85%的H3PO4，99.5%的冰HAC，稀鹽酸，干燥的CuCl2，所用試劑均為分析純，試驗(yàn)用水均為二次蒸餾水

1.4 藥品的配置

1.4.1 濃磷酸的稀釋

由資料查得85%濃磷酸的密度是1.685g/ml，ρ濃磷酸=1.685g/ml，ω%=85% 經(jīng)計(jì)算取 1ml85% 的濃 H3PO4混入46.05ml二次蒸餾水中即得3%的磷酸。用移液管準(zhǔn)確移取1ml85%的H3PO4于100ml燒杯中。用50ml的量筒量取46.05ml的二次蒸餾水，將蒸餾水倒入燒杯即得3%的磷酸備用

1.4.2 冰乙酸的稀釋

查得 99.5%冰乙酸的密度為 1.049g/mlρ乙酸=1.049g/ml，ω%=99.5% 經(jīng)計(jì)算取 1ml99.5% 的冰乙酸混入 11.9979ml二次蒸餾水即得8%的冰乙酸。用移液管準(zhǔn)確移取1ml99.5%的冰乙酸于100ml燒杯中。用50ml的量筒量取11.9979ml的二次蒸餾水，將蒸餾水倒入燒杯即得8%的磷酸備用。

1.4.3 混酸的配制

用移液管取3ml3%的H3PO4與7ml8%的HAC混合稀釋定容至50ml容量瓶中。

1.4.4 氯化銅溶液的配制

用FA1004電子天平稱取0.0675gCuCl2定容到100ml容量瓶中，制得的溶液濃度5×10－3mol/L

1.5 Vc標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制及吸光度的測(cè)定

通常以100μg/mLVc溶液為基準(zhǔn);100μg/mLVc溶液配制方法:取0.0504g抗壞血酸，以10ml混酸溶解，用蒸餾水定容到500ml容量瓶中。

準(zhǔn)確移取抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)液 1.00、2.00、5.00、10.00、25.00ml于5個(gè)50ml的容量瓶中;二次蒸餾水定容至刻度，以試劑空白為參比，于246.0nm波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸光度;以Vc濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。（見(jiàn)圖2）

圖2

1.6 匯源果汁中Vc被氧化后吸光度的測(cè)定［7－8］

匯源果汁標(biāo)準(zhǔn)液的配制:由匯源果汁包裝上標(biāo)注每100ml含有8.9g碳水化合物，現(xiàn)要令其有0.0504g碳水化合物，則需取匯源果汁0.5663ml。加10ml混酸溶解，用蒸餾水定容到500ml容量瓶中。

準(zhǔn)確移取匯源果汁標(biāo)準(zhǔn)液 1.00、2.00、5.00、10.00、25.00ml于5個(gè)50ml的容量瓶中;加入3ml濃度5×10－3mol/l氯化銅溶液，少量二次蒸餾水稀釋，搖勻;于70℃恒溫水浴反應(yīng)5min，二次蒸餾水稀釋至刻度，放置20min;以試劑空白為參比，于246.0nm波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸光度。

1.7 匯源果汁吸光度測(cè)定

取匯源果汁0.5663ml。加10ml混酸溶解，用蒸餾水定容到500ml容量瓶中。

準(zhǔn)確移取匯源果汁標(biāo)準(zhǔn)液 1.00、2.00、5.00、10.00、25.00ml于5個(gè)50ml的容量瓶中;定容至刻度，以試劑空白為參比，于246.0nm波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸光度。

2 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄與處理及實(shí)驗(yàn)結(jié)論

2.1 數(shù)據(jù)記錄

2.1.1 Vc標(biāo)準(zhǔn)溶液數(shù)據(jù)記錄 （見(jiàn)表1）

2.1.2 加入Cu2+的匯源果汁數(shù)據(jù)記錄（見(jiàn)表1）

2.1.3 純匯源果汁的數(shù)據(jù)記錄（見(jiàn)表1）

表1:抗壞血酸與匯源橙汁的吸光度值

2.2 數(shù)據(jù)處理

2.2.1 抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)線性曲線圖的繪制

由 Y=kx+b，求得 k=0.0714，b=0.1350。

故線性方程為 y=0.0714x+0.1350。

2.2.2 匯源果汁Vc含量的計(jì)算

每一組測(cè)得的純匯源果汁的吸光值，減去被氧化之后的相同濃度相對(duì)應(yīng)的吸光值，A1=0.3171A2=0.4452A3=0.9268A4=1.7348A5=3.6970 A 的平均值為 1.42418 代入線性方程，求得

純 Vc 的濃度 18.055μg/ml，

式中:

μ—從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的抗壞血酸的含量（μg），

V1—測(cè)消光值時(shí)吸取樣品溶液的體積（mL），

V總—樣品定容體積（mL），

W總—稱樣重量（g）。

計(jì)算得出匯源果汁Vc含量:100mg/ml

2.2.3 Vc標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光度的精密度計(jì)算

平均值Y=Y/N，

標(biāo)準(zhǔn)偏差S=SQR﹛［（Y1－Y）2+（Y2－Y）2+…（Y5－Y）2］/（5－1），

S=SQR﹛［（Y1－Y）2+（Y2－Y）2+…（Y5－Y）2］/（5－1）﹜ =2.9158 ×10－3，

相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 =S/Y=0.093≈0.1，

精密度:5次測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.1說(shuō)明儀器精密度較好

2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)論

測(cè)定Vc時(shí)，穩(wěn)定劑的選擇是關(guān)鍵，若穩(wěn)定劑選擇的不合適，Vc就不能穩(wěn)定存在，容易被氧化并且穩(wěn)定劑本身也有吸收，影響Vc的準(zhǔn)確測(cè)定，因此通過(guò)實(shí)驗(yàn)，選用磷酸和醋酸（3:7.V:V）的混酸或pH為3－4的鹽酸做穩(wěn)定劑和稀釋液，可以延長(zhǎng)Vc的穩(wěn)定時(shí)間，反應(yīng)中以銅離子作為催化劑來(lái)催化溶液中的溶解氧氧化Vc，對(duì)銅離子加入量進(jìn)行了選擇。銅離子的加入量不影響Vc在246nm處的吸光度，銅離子本底吸收小，通過(guò)實(shí)驗(yàn)，建立了一種簡(jiǎn)單、快速測(cè)定Vc含量的方法，該方法也只作為一種參考為后續(xù)Vc測(cè)定的研討，提供一個(gè)方面的探索，本實(shí)驗(yàn)還可以繼續(xù)提升精密空間，還能繼續(xù)探索。

［1］馮寧川，徐伯興，方禹之.動(dòng)力學(xué)熒光法測(cè)定藥物，水果，蔬菜中的維生素C［J］.廣州:分析測(cè)試學(xué)報(bào)，1993，26－31.

［2］布都會(huì)，等.碘量法測(cè)定維生素C的改良［J］.干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究，2004:195－198.

［3］肖桂初，趙國(guó)太.2.4－二硝基苯肼法測(cè)總維生素C時(shí)活性碳對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響和改進(jìn)［J］.食品與發(fā)酵工業(yè)，1987 .35 －36.

［4］馮德明，周曉霞.用高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定飲料中維生素C的含量［J］.嘉興學(xué)院學(xué)報(bào)，2003:43－46.

［5］黃寶華，羅宗銘，方巖雄，等.鐵（Ⅱ）－鄰菲羅啉 －BPR體系分光光度法測(cè)定果蔬中的維生素C［J］.化學(xué)世界，1996:319－321.

［6］李軍 .紫外分光光度法測(cè)定果蔬中的維生素C［J］.河北職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào)，2000:41－44.

［7］張立科，田水泉.紫外可見(jiàn)分光光度法測(cè)定果蔬中的維生素 C［J］.河北化工，2001:66－72.

［8］徐茂軍，樂(lè)培思，杜偉 .紫外光度法測(cè)定食品中還原型維生素 C［J］.食品與發(fā)酵工業(yè)，1994，12 －15.

Determination of Vc Content in Orange Juice Beverage

LI Yun
（College of Chemistry，Baotou Teachers College;Baotou 014030）

commercially available vitamin C drinks（Vc）provide reference determination of science.using Cu2+catalytic oxidation method to establish Vc dissolved oxygen，ultraviolet spectrophotometric method for the determination of orange juice is the prototype of Vc，and the determination conditions were optimized.by using phosphoric acid and acetic acid solution（3:7;V:V）as stabilizer，Cu2+as catalyst，70 ℃ constant temperature water bath，determination of orange juice beverage market in Vc，the standard curve equation is y=0.0714x+0.1350，The precision is 0.1，spectrophotometric method for the determination of orange juice in Vc to establish the UV，the method is simple，rapid with satisfactory results.

vitamin C;ultraviolet spectrophotometry;orange juice

O655

A

1004－1869（2014）02－0019－03

10.13388/j.cnki.ysajs.2014.02.005

2014－03－28

李 云（1964－），女，遼寧朝陽(yáng)人，副教授，研究方向:無(wú)機(jī)化學(xué)。