呂丹 劉冠男

摘 要：高效液相色譜法作為藥物分析的常規(guī)方法應(yīng)用廣泛，本文對其在藥物含量測定及藥代動力學(xué)研究上的應(yīng)用進(jìn)行綜述。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜法；藥物分析；研究；進(jìn)展

高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatogra

phy，HPLC） 是一項(xiàng)柱色譜分離技術(shù)，因分析速度快、分離效率高、檢測靈敏度高、檢測自動化、適用范圍廣、組分易回收、樣品處理較簡單等特點(diǎn)已廣泛應(yīng)用于各種藥物及其制劑的分析測定。隨著與質(zhì)譜、核磁共振波譜等的聯(lián)用技術(shù)的發(fā)展，HPLC的應(yīng)用將愈加廣泛[1]。

一、高效液相色譜法作為藥物分析的常規(guī)方法在藥物分析中的應(yīng)用

高效液相色譜法作為藥物分析中的最主要的分析方法，常被作為常規(guī)分析和檢驗(yàn)方法[2]。近年來這個方面的研究較多，陳英紅等通過對人參糖肽注射液中多糖1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化，采用高效液相色譜法進(jìn)行組成糖分析，建立了人參糖肽注射液特征圖譜。該方法操作簡便，分離度高，重復(fù)性及穩(wěn)定性良好，可有效控制人參糖肽注射液的質(zhì)量，同時(shí)可作為酸性雜多糖的測定方法。陳金泉等建立抗艾滋病藥物更昔洛韋、阿昔洛韋、噴昔洛韋和伐昔洛韋的HPLC快速檢測方法。采用同一色譜體系實(shí)現(xiàn)對四種藥物的分析，該檢測方法快速、簡便，準(zhǔn)確。這些研究充分利用了高效液相色譜操作簡單，靈敏度高，回收率高的特點(diǎn)。

二、高效液相色譜在藥物分析測定中的研究進(jìn)展

高效液相色譜法是一種集分離和測定為一體的分析方法，其作為藥物分析中藥物鑒別、雜質(zhì)檢查及含量測定的重要方法。

（一）在鑒別中的應(yīng)用。HPLC用于藥物鑒別時(shí)，一般規(guī)定按供試品含量測定項(xiàng)下的高效液相色譜條件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。要求供試品和對照品色譜峰的保留時(shí)間一致。在HPLC法中，保留時(shí)間與組分的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)有關(guān)，是定性的參數(shù)。如頭抱拉定、頭孢噻酚鈉等頭孢類藥物以及地西泮注射液、曲安奈德注射液等多種藥物均采用HPLC法進(jìn)行鑒別。

（二）在有關(guān)物質(zhì)檢查中的應(yīng)用。目前藥品的有關(guān)物質(zhì)的檢查方法主要有薄層色譜法（TLC）、高效液相色譜法（HPLC）、氣相色譜法（GC）、紫外分光光度法（UV）及容量分析法等多種。近年來隨著儀器分析技術(shù)的發(fā)展，HPLC分離效果佳分離速度快的特點(diǎn)使其成為最主要的檢測有關(guān)物質(zhì)的方法。

（三）在藥物（含中藥）成分含量測定上的應(yīng)用。在藥物分析中，高效液相色譜由于其專一性，靈敏度高，快速簡便的特點(diǎn)，廣泛的應(yīng)用于藥物分析中的定量分析，尤其在干擾因素較多的時(shí)候表現(xiàn)出更大的優(yōu)越性。中藥材及其制劑組成復(fù)雜，不少有效成分的含量測定也越來越多地采用了高效液相色譜法。李翔等建立高效液相色譜法測定麻杏口服液中鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的含量。該方法簡便準(zhǔn)確，快速可靠，能夠用于麻杏口服液的含量測定和質(zhì)量控制。

（四）在藥物的質(zhì)量控制上的應(yīng)用。在早期各國的藥典中，藥品質(zhì)量多用化學(xué)分析方法來控制，該方法難以對藥品生產(chǎn)、儲存中產(chǎn)生的有關(guān)物質(zhì)、及微量雜質(zhì)進(jìn)行監(jiān)測。隨著HPLC方法的發(fā)展，此類問題得到較好的解決。HPLC在止痛藥、抗生素、抗病毒藥、抗高血壓藥、抗抑郁藥、消化系統(tǒng)藥等藥物質(zhì)量控制中有著廣泛的應(yīng)用。如氨基糖苷類抗生素的結(jié)構(gòu)因缺少強(qiáng)紫外吸收基團(tuán)，故常用柱前或柱后衍生化來分析測定，但是這種方法前處理過于繁瑣，衍生過程可能導(dǎo)致樣品的降解，不適用于對相關(guān)物質(zhì)的控制，但利用蒸發(fā)光散射檢測器檢測的HPLC法控制氨基糖苷類抗生素的質(zhì)量可以得到滿意的結(jié)果。

三、高效液相色譜在藥物動力學(xué)研究進(jìn)展

體內(nèi)樣品大多具有采樣量少，待測物濃度低，干擾物多等特點(diǎn)，基于這些特點(diǎn)HPLC特別適用于藥代動力學(xué)研究與臨床藥物監(jiān)測體內(nèi)樣品中大多數(shù)小分子藥物及其特定代謝產(chǎn)物的測定。付洪瑜等建立了大鼠血漿中卡瓦內(nèi)酯麻醉椒苦素的液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用定量的分析方法，并用于大鼠體內(nèi)藥物動力學(xué)研究。所建立的HPLC-MS/MS定量分析方法特異、快速、靈敏，可用于麻醉椒苦素臨床前藥物動力學(xué)研究。戴青等建立測定人體血漿中氨磺必利高效液相色譜法，測定健康志愿者口服氨磺必利片48h內(nèi)血藥濃度，進(jìn)行藥動學(xué)研究。本法簡便、快速、經(jīng)濟(jì)、準(zhǔn)確，可用于測定人血漿中氨磺必利的濃度及藥動學(xué)研究。

四、展望

HPLC的出現(xiàn)為藥物分析的發(fā)展創(chuàng)造了新的契機(jī)，經(jīng)過近四十多年的發(fā)展，HPLC已經(jīng)成為一種廣泛應(yīng)用于藥物分析、環(huán)境監(jiān)測、食品檢驗(yàn)和法學(xué)檢驗(yàn)等領(lǐng)域的一種比較成熟而且具有巨大潛力的分析技術(shù)。隨著HPLC-MS聯(lián)用技術(shù)的應(yīng)用更加廣泛，無疑將進(jìn)一步促進(jìn)生命科學(xué)和藥學(xué)的研究和發(fā)展。

參考文獻(xiàn)：

[1] 李發(fā)美主編，分析化學(xué)[M].人民衛(wèi)生出版社，2007：385.

[2] 孫毓慶主編，現(xiàn)代色譜法及其在藥物分析中的應(yīng)用[M].科學(xué)出版社，2005.

[3] 陳英紅，羅浩銘，王穎，姜瑞芝.HPLC法建立人參糖肽注射液特征圖譜的研究[J].藥物分析雜志，2014，34（2）：360-363