李文婷， 王 瑩， 趙 峰

(新疆醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院1病理科， 2醫(yī)務(wù)部, 烏魯木齊 830011)

宮頸癌(cervical carcinoma, CC)是危害女性健康和生命的常見惡性腫瘤之一。其中鱗狀細胞癌(簡稱鱗癌)占宮頸癌的90%以上[1]。新疆維吾爾族(維族)婦女是宮頸鱗癌的高發(fā)人群。和所有惡性腫瘤一樣，宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展也是一個多因素、多步驟的過程。研究證實，高危型人類乳頭狀瘤病毒(human papilloma virus, HPV)16/18是導致宮頸癌發(fā)生的主要病因之一[2]。本研究采用原位雜交(In situ hybridization, ISH)方法檢測宮頸癌中HPV16/18的表達情況，進一步探討其與宮頸癌的臨床病理特征的關(guān)系，為宮頸癌的診斷、治療及預(yù)后判斷提供一定的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1標本隨機選取并整理新疆醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院病理科2010-2012年50例維族婦女宮頸癌手術(shù)切除石蠟包埋組織及其臨床病理資料，所有病例經(jīng)核實患者無重復，年齡、病理診斷等臨床病理資料完整。50例宮頸鱗癌均經(jīng)HE染色切片，進行組織學觀察和復診。所有病例均為宮頸浸潤性鱗癌，年齡24～72歲，腫瘤最大徑0.5～6.8 cm；已絕經(jīng)22例，未絕經(jīng)28例，伴有CINⅢ級(cervical intraepithelial neoplasia)26例，不伴有CINⅢ級 24例；高-中分化30例，低分化20例；FIGO分期中Ⅰ期32例，Ⅱ期18例，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移7例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移43例。術(shù)前均未進行放化療。

1.2方法取組織蠟塊4 μm厚切片，HPV16/18原位雜交檢測試劑盒(產(chǎn)品編號：ISH-5126)購自北京中杉公司。實驗步驟按試劑盒說明進行。每組實驗均設(shè)置陽性對照及陰性對照。以PBS代替一抗為陰性對照，以已知陽性切片作為陽性對照。HPV定位于宮頸鱗癌細胞核，呈棕黃色細顆粒，陽性細胞數(shù)≥10%為陽性。

1.3統(tǒng)計學處理采用SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行處理，率的比較采用χ2檢驗，P<0.05為有差異統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1HPV16/18在宮頸癌中的表達HPV16/18在宮頸癌中的陽性表達率為72%(36/50)；HPV16/18表達在宮頸鱗癌組織的細胞核，呈棕黃色細顆粒(圖1)，腫瘤間質(zhì)不著色。

圖1 HPV16/18在宮頸癌中的表達(×400)

2.2HPV16/18表達與宮頸癌臨床病理特征的關(guān)系HPV16/18表達在是否伴發(fā)CINⅢ級及不同F(xiàn)IGO分期各組中的差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，HPV16/18表達在臨床表現(xiàn)、是否絕經(jīng)、腫瘤大小、分化程度及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移各組中的差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 HPV16/18表達與宮頸癌臨床病理特征的關(guān)系/例(%)

3 討論

宮頸癌是威脅女性健康和生命的主要疾病之一。新疆為多民族聚居地區(qū)，其中維族與漢族人口比例相當。王東存等[3]報道新疆醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院收治的宮頸癌患者中，維吾爾族女性占75%以上，近年來呈現(xiàn)出年輕化趨勢。

HPV是小分子DNA病毒，可分為高危型和低危型。高危型HPV如 HPV16/18是公認的引起宮頸癌發(fā)生發(fā)展的重要病因之一，HPV16/18病毒的E6/E7蛋白可通過中和抑癌基因如p53、pRb等對細胞周期的負性調(diào)控作用，喪失自我修復及凋亡的功能，使細胞持續(xù)增殖，從而導致腫瘤的發(fā)生發(fā)展。

本研究中HPV16/18在宮頸癌中的陽性表達率為72%(36/50)，這種高表達和Vega等[4]的結(jié)果相符，再一次證實了高危型HPV16/18在宮頸癌發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。原位雜交技術(shù)也是目前大多數(shù)病理科開展的項目之一，具有操作簡便、可重復性高、特異性較好等優(yōu)點。采用原位雜交技術(shù)進行HPV16/18在宮頸癌中的檢測，可為臨床宮頸癌早期篩查、早期診斷提供一定的參考依據(jù)。

HPV16/18表達在是否伴發(fā)CIN分組中差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，這與陳寶蓮等[5]報道的CIN患者也可檢出HPV16/18有關(guān)，可推測從HPV病毒感染，引起CIN至最終發(fā)生浸潤性癌是一個漸進的過程。但并非所有的CIN都會進展為浸潤癌，大多數(shù)CIN病變可能長期無進展或自行消退，僅有部分CINⅢ級，尤其是伴有累及腺體的病變進展為浸潤性鱗癌的可能性最大。因此，對CIN患者進行HPV16/18檢測，有助于宮頸癌前病變的早期診斷，并進行一定的臨床干預(yù)[6]，從而避免發(fā)展為浸潤性癌。HPV16/18的表達在不同F(xiàn)IGO分期各組中存在差異，也提示了HPV16/18在宮頸癌的進展過程中存在一定的參考價值。

宮頸癌臨床多表現(xiàn)為接觸性出血、不規(guī)則陰道出血及陰道排液等，近年來，發(fā)病年齡也呈現(xiàn)年輕化趨勢，而絕經(jīng)前后宮頸癌患者的治療選擇有很大的不同。本研究中，HPV16/18表達在臨床表現(xiàn)、是否絕經(jīng)、腫瘤大小、分化程度及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移各組中的差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，說明HPV感染可能只是宮頸癌發(fā)生發(fā)展的始動因素之一，還有很多其他因素共同作用，導致宮頸癌的發(fā)生發(fā)展[7]。

綜上所述，HPV16/18在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用，與伴發(fā)CINⅢ級及FIGO分期有關(guān)，可作為早期診斷、臨床分期及預(yù)后判斷的依據(jù)之一。

參考文獻：

[1] Wentzensen N, sherman ME, Schiffman M, et al. Utility of methylation markers in cervical cancer early detection: appraisal of the tate-of-the-science[J]. Gynecol Oncol, 2009, 112(2):291-293.

[2] Negri G, Bellisano G, Zannoni GF, et al. p16ink4a and HPV L1 immunohistochemistry is helpful for estimating the behavior of lowgrade dysplastie lesions of the cervix uteri[J]. Am J Surg Pathol, 2008, 32(11):1715-1720.

[3] 王東存, 葉明, 王莉. 子宮頸上皮病變18304例臨床病理分析[J]. 臨床與實驗病理學雜志, 2010, 26(6):692-695.

[4] Vega PA, Illades AB, Flores AE, et al. Risk of progression of early cervical lesions is associated with integration and persistence of HPV-16 and expression of E6, Ki-67, and telomerase [J]. J Cytol, 2013, 30(4):226-232.

[5] 陳寶蓮. HPV-DNA檢測篩查宮頸癌價值探討[J]. 重慶醫(yī)學, 2009, 38(7):854-856．

[6] Yang HP, Zuna RE, Schiffman M, et al. Clinical and pathological heterogeneity of cervical intraepithelial neoplasia grade 3[J].PloS One, 2012, 7 (1):1-10.

[7] Badaracco G, Savarese A, Micheli A, et al. Persistence of HPV after radio-chemotherapy in locally advanced cervical cancer[J]. Oncol Rep, 2010, 23(4):1093-1095.